备课素材：PCR+的扩增是指数增长吗 第一学期高中生物学选择性必修三_第1页
备课素材：PCR+的扩增是指数增长吗 第一学期高中生物学选择性必修三_第2页
备课素材：PCR+的扩增是指数增长吗 第一学期高中生物学选择性必修三_第3页
备课素材：PCR+的扩增是指数增长吗 第一学期高中生物学选择性必修三_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

PCR的扩增是指数增长吗先看一道试题：如图为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图．据图分析，下列说法正确的是A.催化①过程的酶是RNA聚合酶B.④过程发生的变化是引物与单链DNA结合C.催化②⑤过程的酶相同，且都能耐高温D.通过该过程可以使目的基因的量以指数的形式增长答案：BD解析：结合图示过程分析，①过程为逆转录过程，②过程为单链DNA合成双链DNA的过程；③④⑤过程为PCR反应过程。①过程为逆转录过程，需要逆转录酶催化，A错误；④过程发生的变化是引物与单链DNA结合，B正确；催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，但只有催化⑤过程的酶能耐高温，C错误；通过PCR技术可以使DNA

扩增量呈指数上升，反应最终的DNA扩增量可用Y=(1+X)n计算，D正确。这道试题D选项：通过该过程可以使目的基因的量以指数的形式增长。解析中认为如此。PCR扩增中是指数增长吗？在PCR中，随着扩增周期的增加，理论上模板以指数方式进行扩增。每一扩增周期后产物的量可以下式表达Yn=Yn-1*(1+E)

0≤E≤1

-------1其中E表示扩增效率，Yn表示在n个周期后PCR产物的数量，Yn-1为n-1个周期后PCR产物的数量。而扩增一定的周期后，扩增产物的总数量可以下式表示Yn=X·(1+E)n

-------2其中Y为PCR产物的分子数量，X为原始模板的数量，n为周期数，E为扩增效率，位于0至1之间。公式（2）仅在限定的扩增周期数即指数扩增期（通常为20~30个循环）内成立，超过此周期数，扩增过程即由指数扩增降低至稳定的扩增速率，最终达到平台，不再扩增。此时，公式（1）中的E逐步降低，直至0。影响扩增效率的因素较多，如：引物／靶核酸的退火情况；参与扩增反应试剂的相对量尤其是TaqDNA聚合酶／靶核酸；扩增仪孔中温度的不均一性；临床标本中TaqDNA聚合酶抑制物的去除不完全；扩增试剂的有限和扩增中焦亚磷酸盐累积等。因此，PCR扩增最后不再以指数方式进行。要定量PCR扩增产物很容易，但从上述扩增产物与模板之间的关系来看，由于E和扩增周期数（n）的变化，扩增产物的量与最初PCR模板的量之间没有一个确定的比例关系。只有在PCR的指数扩增期的扩增产物量才与起始模板的量有正比例相关。因此，定量PCR必须在PCR扩增的指数期进行测定，而以前的非实时PCR方法很难确定特定的PCR的扩增指数期，通常需要大量的实验论证实时PCR的出现，则使得整个PCR的扩增过程测定信号的变化处于动态监测之中，很容易判断指数扩增期的出现，从而避免了传统PCR反应中产物量的可变性。实时PCR，就是检测PCR扩增周期每个时间点上扩增产物的量，通常是检测每个循环结束后的产物量，从而实现PCR扩增的动力学监测。要达到这一点，就需要有

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 中学教育

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论