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文档简介

空气微生物采样器四川省疾病预防控制中心四川大学一、特点OPM2.5肆虐,当今空气微生物污染所造成的严重伤害,己越来越受到重视,因而对各种空气污染采样污染采样监测的需求就更加迫切,空气微生物的数量及其大小分布乃是评价起危害的两个不可缺少的指标。oJWL-6型六级筛孔撞击式空气微生物采样器能够测定空气微生物的数量之外,它独有的特性是还能测出这些粒子的大小,而后者是判定空气微生物危害的重要指标之_。二、用途OJWL-6型六级筛孔撞击式空气微生物采样器可广泛用于疾病预防控制、环境保护、制药、发酵工业、食品工业、生物洁净等环境的空气微生物数蠆及其大小分布的采样监测,以及有关科研、教学部门作空气微生物的采样研究,为评价环境空气微生物污染的危害及其治理措施提供科学依据三、组成◦整套仪器由六级撞击器、主机(流量计)、器、三角架组成。定时!1!工作原理OJWL-6型六级筛孔撞击式空气微生物采样器模似人体呼吸道的解剖结构及其空气动力学特征,采用惯用撞击原理,將悬浮在空气中的微生物粒子,按大小等级地分别收集在采样介质表面上,然后共培养及做逬一步微生物分析,求出空气微生物粒子数量及其大小分布的特征。子JS38-级>7.0^1>另二级T二,入:;-:t--:.■・■r-ii:级-■丨Up弟S级I.1-2.t^i«第六级01^_Jtn五、使用方法0(-)撞击器的清洗与消毒01.用中性洗涤剂温水清洗撞击器,用超声波洗则更好,可除去喷孔的塞物。O2.若喷孔发生阻塞,用高压气流或配备的细针清除o3.六级撞击器使用70%酒精擦拭消毒。O(二)采样器的流量校正O六级筛孔撞击式空气微生物采样器是28.3L/min,采样前校正好流量。OL必须保证圆盘上孔眼通畅,然后按顺序將撞击器装配好,一手从上部按住撞击器,另一只手挂在三个弹簧挂钩。2.用橡胶管连接撞击器出□—主机逬气取下撞击器逬气□的上盖。3.將主机插上电源(AC220V),按下主机上“电源开关”调节“流量调节”旋钮,使流量计转子稳定在28.3L/mino(二)采样平皿的制备01.一般需氧的空气微生物采样用普通琼脂培养基(培养基1.8%-2.0%)若采集特殊微生物(如高营养的病原因,病毒,真菌等)可选用响音的采样介质。◦2.平皿采用国产C>90x18腿玻璃培养皿,用高压蒸汽灭菌后备用O◦3.在无菌条件下用量杯往平皿内倒入琼脂24_30ml,琼脂表面与高密CE3圈(8mm)一平,以保证采样时喷孔与琼脂表面之间2-3mm的最佳撞击距离。◦4.將加入采样介质的平皿,倒置放入37C恒温培养箱中培养24小时,无杂菌生长方可使用。Ei>3MB0(四)现场采样01.连接:将三角架支开并锁紧,把三角架顶部调至水平,主机放在三角架上,撞击器放在桌上或地上,用橡胶管连接撞击器出气主机进气口O2.顺序放入采样平皿(不要颠倒),一手打开平皿盖,另一手迅速盖上撞击盘,然后按住撞击器上部,挂上三个弹簧挂钩。o放入和取出采样平皿时,必须戴□罩,以防□輿排出细菌污染平皿。O3.打开撞击器逬气□上盖,离幵采样点2米之外,即可启动采样。可用定时器设定采样时间。o4.采样时间长短视所才空气环境的污染程度而定,但最好不超过30分钟,一面长时间的气流冲击致使采样介质脱水而影响微生物生长。5.为了保持菌落计数的准确性,每个平皿的均落在250个以下为宜,一般室外空气环境采10分钟,室内空气环境采卜5分钟即可。o6.采样完毕后,取出采样平皿扣上盖子,注意顺序和编号号码,切勿弄错。六、培养计数菌落O1.将采样后的平血倒置于37t!恒温箱中培养48小时,对有特殊要求的微生物则放相应条件下培养。◦2.计数各级平皿上的菌落数,一个菌落既是一个菌落形成单位(cfu)◦Cfu:每g或mL样品中的微生物在一定条件下培养后的菌落数的单位。(菌落形成单位)计算结果1.空气口微生物数i:是以每立方米2气中所含粒子数靈表示之。空气中微生物数重1

cfu)/V:所有平皿面落数X10C0_釆样时间(min)X28.3(L/min)2.空气中微生物大小分布:是以各级的菌繡占六级总菌繡百分匕表示之各级微生物粒子数心该_落数X100%六级总茴落数O利用微生物采样器逬行采样时,采样时间为5分钟,空气流速为28.3L/min,若六级撞击器从一级到六级按顺序所得菌落数依次分别为:250、180、200、110、50、90cfu。o问空气中微生物数量是多少?o求第五级微生物粒子在空气中的分布?1.空气中微生物数量,是以每立方米空气中齡粒子数量表示之。空气中微生物数重tcfu/w3=

所有平皿菌落数X1C00_采样时间(min)X28.3(L/min)2.$气中鮏物大小分布:是以各_飜数占翎总菌_百分比表示之各级微生物粒子数%=该__X100

%_六级总菌落数饼干中菌落总数的测定O方法:平板计数法jfl〆.L___imL1:100稀释1:1⑽0辑精1:10000稀释食品中菌落总数測定检验程序ProtocalofAerobicBacterialCountinFood样十225mL无蘭牛球盐水||:W稀WiK体样品悴均成解处琛1分钟(KOOft~l0O«0rpm>用无供生理盐水10倍系列稀鞸样品_11mL/\CJ1:10稀杯川无術生姆盐水W倍系列《释样砧◎..1;1O稀柙稀柙取若f辽当稀柙度的样品iml,加入尤菌培科谴||,将-40TT的开弈敢砌姆注至祇弈m屮,转动浪之3S*C*1TJ垧养*8峙2行后汁放&样籽度曲落取鏞落板为3-t»-3HOfSJ的平板为脚定标________K]|L<检样25g(mL)样品+225mL稀释液,均质10倍系列稀釋选择2个、3个适宜样品匀液,各取1mL分别加入尤调培芥皿内每个培养皿中加入15~20mL平板计数培基,混匀|361±lT\48h士2h计算各平板菌落数计弊菌落总数」一检验程序报告检样体样品:在电了•天平上称取25g+225mL0.85%灭菌屮理盐水液休样品:直接取用刮体枰品存放罐固体样品称量+取(带上试管架):■^有0.85%灭菌生理盐水的锥形瓶1个■装有9mL0.85%灭菌生理盐水的试管3支(注:液体样品只需2支)■从培养皿简中取出培养皿。培养皿出取培养皿简■在培养皿上编号提示:培养皿上的标记殆稀释倍数固体样品:稀释倍数为10_\10人103液体样品:稀释倍数为10G、104、102■操作前,用镊子取洒精棉消毒桌子、消毒手。»用量筒量取225mL0.85%灭菌牛理盐水至稀释瓶中。(注意:稀释瓶、带塞锥形瓶开盖前要过火,量筒、装有0.85%火菌生理盐水的锥形瓶及其塞子应放在酒精灯周围15cm的范围内)■-125g+225mL牛坪盐水101IS1体样品?足帝:衝培荞基时,培赛皿的开口尽量要爪:同时,开口对看?面積灯。5示播助培旅皿时,坊沴氏培养基溅到培养皿藏上。■在培养皿中加入平板计数琼脂培养基(15~20mL),轻摇培养皿,使试样与培养基混匀。■待培养芘凝固后,将培养皿放入恒温培养箱。琿示:培兼皿玟入培犛箱时要倒篁。«注意选择设置为36"C土rc的培养箱。+关于实测结果的填写■若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内(3(卜300),计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应的稀释倍数,作为毎克(毫升〉中菌落总数结果。■若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按下式计算:检验_果记录稀释度IO-1l«-2~~IO21(H~~1(H空白位II23落k多小名小756422160_\~Q____可计|可计|______________平均值多不可汁70190培养条件温度:36aC±1&C时闶:48h±2h实测结果7.0Xl(FCFU/g(7.0Xl(HCFV/mLJ标准值查看“产品标准值”表,填写吊项检符合(或不符合)验结论备注(n}+0An2)d其中:N:样品中菌落数;平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和;n(:第一个适宜稀秆度平板的个数;n2:第二个适亢稀释度平板的个数:d:稀释因子(第一稀释度)(低稀释倍数)(髙稀释倍数)■在培养皿上编号漶示:培眾皿上的标记殆褅释倍鉸。]固体样品:稀释倍数为1(H、10<103液体样品:稀释倍数为10Q、10102朴么守南奔矜矽

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