实时荧光定量PCR仪技术简介-2

东胜创新实时荧光定量PCR仪技术简介聂尚海博士定量PCR仪组成概述光源光学元件反应管光学元件热循环仪东胜创新21、热循环仪（PCR仪）2、检测系统3、总结东胜创新3定量PCR原理及Opticon热循环技术之东胜创新4PCR仪组成❏加热❏制冷❏控温热循环技术之

加热❏电阻丝加热❏半导体/电阻丝加热东胜创新5热循环技术之电阻丝加热样品模块电阻丝风扇毛细管风扇电阻丝东胜创新6热循环技术之电阻丝/半导体加热样品模块Peltier模块散热槽风扇电阻丝优点：❏升温快速❏准确东胜创新7热循环技术之

制冷东胜创新8❏风扇制冷❏压缩机制冷❏半导体制冷热循环技术之风扇制泠毛细管风扇电阻丝优势❏价格低东胜创新9劣势❏精确性和均一性差❏不能主动致冷❏控温不能低于室温热循环技术之压缩机制冷聚乙烯醇管压缩机样品模块电阻丝优势❏制冷快❏精确性尚可接受劣势❏体积大❏控温易过头(制冷时尤为如此)❏违反蒙特利尔公约(破坏臭氧层)东胜创新10最大可过头

3°-8Data

collected

by

CYCLERtest

BV热循环技术之东胜创新11制冷过头热循环技术之半导体制冷优势❏体积小❏控温性能出色❏可低于室温❏可主动致冷劣势❏技术要求高样品模块Peltier模块散热槽风扇电阻丝东胜创新12Opticon仪器组成东胜创新13Opticon的PCR仪之

结构东胜创新14Opticon的PCR仪结构：❏三传感器和双区域❏

温度控制技术❏具有动态温度梯度Opticon的PCR仪之

寿命长Last

nearlytwice

aslong

as

thenearestcompetitorSlope

change

inresistance

isnearly

three

times

better东胜创新15Opticon的PCR仪之

小结东胜创新16❏先进的加热技术---电阻丝/半导体加热❏先进的致冷技术---半导体制冷❏控温技术---三点探测，双区域控制控温快速、准确精确性、均一性能良好有温度梯度寿命长检测技术之原理概述光源光学元件反应管光学元件热循环仪东胜创新17检测技术之东胜创新18原理概述❏光源❏荧光染料❏检测系统检测技术之

光源·三种类型❏钨灯❏氩离子激光❏发光二极管(LED)东胜创新19检测技术之光源——钨灯优势❏常用❏发出全光谱的光❏价格适中❏易更换劣势❏预热耗时❏寿命短❏需滤光片❏产热东胜创新20检测技术之光源——氩离子激光优势❏亮度高❏可发出单或双波长的光❏聚焦好劣势❏需要移动扫描❏价格昂贵❏产热❏寿命短❏耗电东胜创新21检测技术之光源——发光二极管优势❏价格便宜❏寿命长稳定❏可输出不同颜色的光东胜创新22❏体积小❏需要滤光片❏更换困难❏亮度低最高性价比！❏产热少劣势检测技术之东胜创新23荧光染料·工作原理❏染料吸收光能跃迁至高能级.❏染料以荧光形式释放能量以回到基态，发出荧光.❏发射光和激发光的波长不同.❏常用的染料:FAM,SYBR

Green，Pico

Green❏

等多种染料检测技术之检测系统·三种类型❏Charged

Coupled

Device

(CCD)❏光电二极管❏光电倍增管(PMT)东胜创新24检测技术之检测系统——CCD优势❏灵敏❏可检测一定范围的光谱❏体积小❏稳定–劣势❏检测范围窄❏对强光和弱光❏

分辨率低❏背景高东胜创新25检测技术之检测系统——半导体二极管半导体二极管通过吸收光子产生电流优势❏体积小❏价格便宜❏耐用劣势❏灵敏度低❏一次只能扫描一个样品东胜创新26检测技术之检测系统——PMT通过把光能转化成电子能使信号得到扩增，所以PMT检测非常灵敏优势❏超灵敏:可检测到单个光子❏检测范围广劣势❏体积大❏一次只能读一个样品东胜创新27检测技术之东胜创新28Opticon检测系统❏最高性价比的光源---LED❏最灵敏、最实用的检测技术---PMT超灵敏、检测范围最广❏扫描的时机、频率、次数、间隔、时间等都可控制❏每2秒钟扫描一遍，

96个发光管依发光❏无机械部分VVVVVVVVVVVV东胜创新29Opticon实时荧光定量PCR仪之检测系统确定初始模板的浓度东胜创新30Opticon实时荧光定量PCR仪之分析方法-标准曲线荧光检测

热循环仪光色:单色光均一性:

±0.4°C染料:FAM,

SYBR

Green,Molecular

beaconsTaqMan

Probes精确性:

±0.3°C发射光波长:515-545nm升降温速率: 达

3°C/秒.灵敏度:<5nM的荧光素温度梯度:

有检测范围:100

-108

拷贝容量:96样品反应管:0.2mL反应管&

96孔板操作系统:Windows

NT东胜创新31Opticon

实时荧光定量PCR仪之

小结Opticon

实时荧光定量PCR仪之

总结东胜创新32荧光技术❏96个LED对应不同的孔❏通过PMT检测 (515-545nm)❏通过把光信号转化成电信号来检测❏适用于SYBR

green、FAM染料；TaqManProbes❏

和Molecular

beacons等探针热循环技术❏半导体/电阻丝,

三传感器❏PCT200质量可靠总结——MJ公司DNA

Engine

Opticon™优势非常灵敏检测范围广无移动部分占地面积小热循环仪技术可靠可升级有温度梯度高性价比可用机器人操作东胜创新33Opticon

实时荧光定量PCR仪之

应用东胜创新34❏可广泛应用于临床观测病情发展及预后❏多种疾病的诊断❏判断药物疗效❏基础研究❏其他北京总部

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