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文档简介

1检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1、还原性糖的检测2、蛋白质的检测3、脂肪的检测第一节细胞中的元素和化合物(二)2实验:实验原理:某些化学试剂能够与生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:

还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀

脂肪+苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液→橘黄色(或红色)蛋白质+双缩脲试剂→紫色

淀粉+碘液→蓝色(或蓝黑色)3目的要求:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。材料用具:

1.实验材料:苹果汁、花生种子、花生汁、马铃薯片、豆浆、鲜肝液

2.仪器:

3.试剂:斐林试剂、苏丹Ⅲ、碘液、双缩脲试剂方法步骤:

1.实验材料、仪器和试剂的选择

2.设计记录表格,记录预测和实验结果

3.检测的方法步骤

(1)还原糖的检测和观察;

(2)脂肪的检测和观察;(3)蛋白质的检测和观察;4设计记录表格,记录预测和实测结果。还原糖蛋白质淀粉脂肪来自那种生物材料A预BCD成分待侧样品实(一)还原糖的检测和观察:

1、还原糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖等,斐林试剂分:甲液0.1g/mlNaOH溶液,乙液0.05g/mlCuSO4溶液,甲乙液等量(体积)均匀混合,水浴加热(50℃-65℃

),由浅蓝色→棕色→砖红色的Cu2O沉淀。2、检测还原糖的理想材料:含还原糖高且颜色较浅或近白色的,如苹果、梨、白色甘蓝叶,白萝卜等;而韭菜、菠菜,鸢尾等虽有还原糖,但叶绿素含量较多,会掩盖颜色反应的现象。3、此实验必须进行加热才有实验现象。4、因斐林试剂不稳定,故应现配现用。5还原糖的检测和观察的步骤:1、向试管内注入2ml待测组织样液2、向试管内注入1ml斐林试剂(等体积混均)3、将试管在50℃-65℃

水浴中加热约2min4、观察67现象:由浅蓝色→棕色→砖红色的Cu2O沉淀设置对照组(二)脂肪的检测和观察

1、用苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液,需用光学显微镜观察被染色的脂肪微粒2、不要加热3、一般各种组织样液或标本,实验时应留有剩余,是为了反应前后做参照对比(对照)8脂肪的检测和观察的方法:方法一(简单检测):向待测组织样液中滴加苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液,观察样液被染色的情况。方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶切片细胞的着色情况(以花生为例)1、取材:取一粒浸泡过的花生去掉种皮2、切片:切若干薄片,放入清水培养皿中待用3、制片:取切片,用毛笔蘸取薄片,放在载玻片中央清水中,滴2-3滴苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液,染色3/1min;用吸水纸吸去染液,再滴1-2滴50%的酒精溶液(作用:洗去浮色),用吸水纸吸去子叶周围的酒精,滴1滴清水,盖上盖玻片(防止气泡产生)。4、观察:高倍镜下可见橘黄色或红色的脂肪颗粒910(三)蛋白质的检测和观察

1、双缩脲试剂分:A液0.1g/mlNaOH溶液,B液0.01g/mlCuSO4溶液,使用时先加A液1ml,造就碱性环境,再加4滴B液,摇匀,蛋白质能与Cu2+作用,形成紫色物---双缩脲反应。2、双缩脲试剂不稳定,也要现配现用。3、双缩脲试剂可由斐林试剂稀释而得。4、如用蛋清液为材料,浓度不能过高,否则容易发生粘附于试管内壁的现象,导致颜色反应不充分,而且难以清洗试管。(用蛋黄为材料好吗?)5、双缩脲反应相当灵敏,现象明显,不需加热。11不好,本身有颜色,掩盖反应现象蛋白质的检测和观察的步骤:1、向试管内注入2ml待测组织样液2、向试管内注入双缩脲A液1ml,摇匀3、将试管内注入双缩脲B液4滴,摇匀4、观察1213(四)淀粉的鉴定1、淀粉遇碘液变蓝色或蓝黑色2、步骤:1)、向试管内注入2ml待测组织样液2)、向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化1415未知组织液B未知组织液A碘液苏丹Ⅲ

斐林双缩脲碘液苏丹Ⅲ

斐林双缩

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