水提物对蚕体和丝腺发育的抗炎作用

水提物对蚕体和丝腺发育的抗炎作用

赤井等人用亲水性激素（jha）处理了5度蚕和幼蚕。研究发现，它可以提高蚕的重量、茧的重量和丝的蛋白质的合成能力。大多数报告都提到了增加茧和丝绸的效果。但因其又能促使龄期延长、饲料食下量增多,故对其究竟能否提高叶丝转化率,至今尚无定论。蚕的茧丝生产和饲料营养的摄取有着密切关系,故欲探明JHA与叶丝转化率的关系,有必要详细调查蚕对饲料的摄取、消化、吸收及其与体重、茧重和茧丝产量关系等等。本试验,以对JHA敏感的多丝量一代杂种为材料,为避免叶质差异的影响,全龄以具一定营养条件的人工饲料饲育,用JHA体表涂布处理进行了研究,现将结果报告如下。美国氏族蚕体的采集一、供试蚕品种中140×日140,试验全部用雌蚕。二、饲育条件全龄饲育在25℃、自然光照条件下。人工饲料(一龄用silkmate。1M,二至五龄用silkmate.3M,农产工制)一日一回育。三、JHA处理方法用methoprene(大塚化学药品株式会社制)的原液配成250倍液(内含有效成分5μg/ml)和500倍液(2.5μg/ml),用毛笔蘸药液连续涂布蚕体2次,每次0.25ml,处理时间,三、四龄蚕在饷食后48小时处理,五龄为72小时。设区分三、四、五龄连续涂布区,四、五龄连续涂布区,五龄涂布区及用清水涂布的对照区,每区20头蚕,设2个重复区。四、皂角苷(saponin)添食法将人工饲料调制成每克干物内含皂角苷15mg的饲料,经口添食。五、硫堇(thionine)对丝腺活体染色按竹下、重松(1975)的方法,将蚕用水浸渍麻醉后,以微量注射器给每头蚕注入(经口腔)0.1%的硫堇50μl。六、蚕体重及茧重、茧层重的测定蚕体重从起蚕开始,每隔24小时调查1次,每次10头,逐头称重,连测2次,取平均值。茧重、茧层重在上蔟后第8日测定,方法与体重相同。七、消化试验用常规重量法测定,调查饲料干物食下量、消化量和消化率。结果与分析一、龄及四龄期各龄用jha处理对成虫体重的影响JHA有使桑蚕幼虫延缓发育、延长经过和体重增加的作用。从试验的3组9区比较结果(图1)可见,处理区的五龄期经过均显著长于对照区,高浓度区又长于低浓度区。三至五龄和四至五龄连续处理区及五龄高浓度区比对照区延长34小时,五龄高浓度区较低浓度区延长12小时。试验发现,在五龄期前三、四龄JHA处理区与对照区之间的发育速度基本一致,体重也近似,其三龄和四龄期的摄食时间均分别为76小时和98小时左右,其五龄起蚕体重为0.840g/头左右,各区同时饷食。这说明,在五龄前各龄用JHA处理,对当龄幼虫的经过没有多大影响。幼虫的生长量与发育经过相关连,一般经过时间长者体重也重,对照区的最大体重每头平均为3.993—4.124g,处理区达4.304—4.984g,而最大体重的出现时间,较对照区约迟1—2日。熟蚕体重三至五龄组和四至五龄组均是500倍区>250倍区>对照区,而五龄区则是250倍区>500倍区>对照区。并发现JHA处理后,体重生长量有暂时下降低于对照区的情况,约在48小时左右回升并开始超过对照区。丝腺的生长,在五龄第6日前生长量低于同期对照,但到延长龄期的1—2日内增加明显(见图2)。二、丝量增重显著试验结果表明,JHA对茧丝量有显著影响,处理区的茧重高于对照区23—47%,茧层重高于对照区13—35%。但茧层率则相反降低了18—4%(见表1),这说明JHA的增茧作用,主要是使蛹体生长量增大,茧丝量的增加还不及蛹体增重显著。从化蛹率看,连续处理区和高浓度区化蛹率低,而半化蛹率高,并在高浓度区发现有畸形蛹和永久幼虫(图略),永久幼虫吐少量丝后,约经10余日自然死亡。为探明JHA对丝腺内丝素合成和转移速度的影响,JHA处理前,在五龄第4日用苯基噻嗪(phenothiazine)类的硫堇经口注入,观察丝腺活体染色的消长情况,每24小时解剖观察1次,其染色状况见图3。丝素从丝腺后部向中部移动,在丝腺内色素和丝素结合,JHA的作用使丝素由后部丝腺向中部丝腺的移动延迟。中部丝腺的染色状况是处理区的48小时相当于对照区的24小时,直至第8日,始终比对照区迟1日。这一情况与蚕体重量的变化相一致。三、家蚕食下量减少的可能性从五龄第4日经口添食JHA后,添食区的食下量和消化量均比对照区低,第6日后处理区的食下量和消化量明显地提高,消化率也有提高的倾向(见图4、5)。由于JHA添食区经过延长,食下量和消化量的积算干物量均高于对照区,平均消化率也有提高的倾向,特别是250倍区更明显(见表2)。添食或在体表涂布JHA后的五龄期延长,是否由食下量减少而引起?为解开这一疑窦,用可阻碍家蚕摄食的皂角苷加入人工饲料内作添食试验,查证食下量下降与生长发育和茧产量的关系。以五龄雄蚕在第3—5日与JHA—样添食皂角苷结果从添食起直至熟蚕,体重一直比同时期对照区低,经过则延长了1日(见图6),而食下量和消化量并不因经过延长而增加,累计干物食下量和消化量均低于对照(见图7)。添食皂角苷对全茧量、茧层量、茧层率的影响与JHA也不同,对照区茧重、茧层重、茧层率分别为1.294g、0.342g、26.4%;皂角苷添食区则为1.173g、0.307g、26.2%。由此可见,皂角苷的作用与JHA的作用全然不同。皂角苷只是阻碍食物的食下和消化,从而因营养不足而使经过延长,故累计食下量、消化量均较对照低,最后体重也轻;JHA是生理活性物质,因对蚕体生理的调节而暂时出现的食下量、消化量减少、体重增长缓慢,而以后能很快恢复,并使累计食下量、消化量和最后体重超过对照。四、jha对蚕丝饲料效率与蝶饲料效率的影响为调查所食下的饲料转化成茧丝的效率,分别进行了饲料效率和转换效率的研讨,以下式处理数据,并将结果列于表3。表4说明,经JHA处理的蚕茧饲料效率与茧层饲料效率均有提高(4—5龄区不明显)。其中蚕茧饲料效率除五龄期外,其他连续处理区均是低浓度区略高。而茧层的饲料效率则相反,高浓度区略高于低浓度区。从转换效率看,茧重的转换效率处理区高于对照区,而茧层重的转换效率,除三至五龄的500倍处理区稍高外,均是处理区低于对照区。jha的染色作用本试验结果表明,以JHA处理家蚕幼虫,能抑制其发育,使龄期经过延长,高浓度又比低浓度处理显著。但是,这种经过延长只在五龄期明显地表现出来,在第三、四龄处理时,当龄经过并不延长,这与笔者1980年的研究结果相一致。其原因,可能是五龄期前家蚕咽侧体分泌内源性保幼激素机能旺盛,掩盖了外源JHA的作用,至五龄期咽侧体机能随发育经过衰退,在五龄中期后甚至停止分泌JH,外源JHA才开始显示其作用。本试验还发现JHA处理后1—2日内,体重比同时期的对照区轻,约处理48小时,才开始接近并逐渐超过对照区,最后体重也是处理区重。用硫堇对丝腺活体染色看到,被染色的丝素在中部丝腺内移动的相对距离,处理区比对照区约迟1日,这说明JHA对蚕体和丝腺的发育和合成代谢过程均具有延缓作用。关于JHA导致幼虫发育经过延迟,体重暂时下降的原因,本试验用皂角苷添食表明,角苷的作用只是阻害家蚕摄食,使饲料食下量减少,因营养缺乏而使经过延长,其体重、丝腺重始终低于对照,累计食下量和消化量也较对照区少。而JHA作用模式完全不同,只是在处理后一定时间内食下量、消化量和体重下降,以后能恢复并超过对照。笔者认为,JHA是通过影响蚕体内源激素的平衡而起作用的。曹梅讯等(1983)用JHA处理五龄第3—5日家蚕幼虫,发现能使前胸腺所分泌蜕皮激素滴度峰出现的时间,比对照区延迟1—2日,与本试验区较对照区五龄经过延长1—2日正相吻合。又据资料记载JHA处理后,发现肠液蛋白酶、淀粉酶的活性暂时低于对照区,后部丝腺细胞中RNA的含量也暂时减少,而以后又迅速回升,乃至超过对照。这可能是JHA处理后对食下量、消化量、体重和丝腺重暂时下降,最后超过对照区的真正原因,本试验证明,JHA处理家蚕幼虫确有一定增产茧丝效果。从饲料效率角度看,这种增产主要是由于延长了五龄期经过时间,增加了家蚕的饲料食下量,并且食下量对茧重和茧层重的饲料转化效率亦有提高(表4)。相反,茧层重的转换效率除三至五龄500倍处理区外,其他均显著低于对照区。这是因为,JHA处理后较大程度上提高了消化率,增加了消化量(表2),所以对