葛根素胃漂浮片处方优化研究

葛根素胃漂浮片处方优化研究

胃浮浮块是指能迅速吸收和膨胀，形成凝胶，减少收缩，留在胃中，延长药物释放时间，改善药物吸收，提高生物利用水平的片剂。葛根素(puerarin,1)具有扩张冠脉血管、改善心功能损害、降低血压等药理作用,临床用于预防和治疗多种心脑血管疾病。1溶解性和渗透性差,在肠上段的吸收较肠下段好,因此生物利用度低。本实验室前期研究中,针对其肠吸收渗透性差的问题,筛选出对1肠吸收有显著促进作用的吸收促进剂壳聚糖、冰片和白芷挥发油,通过配伍研究证实壳聚糖和白芷挥发油配伍具有协同作用,且白芷挥发油作为吸收促进剂单用及配伍使用对肠黏膜无毒性。在此基础上设计了1胃漂浮片,提高了1的吸收渗透系数。通过考察起漂时间、漂浮状态及1的体外释放和机制等,筛选较优处方。1药品、试剂与对照品ZRS-8G型智能溶出试验仪(天津大学精密仪器厂);1200型高效液相色谱仪(Agilent公司);S1DP/30A型单冲压片机(北京国药龙立);YD-20型智能硬度仪(天津大学无线电厂)。1原药(河南省宛西制药股份有限公司,含量99.98%,批号20060101);1对照品(中国药品生物制品检定所,含量99.99%,批号101765-200408);壳聚糖(中国海德贝尔海洋生物技术有限公司,脱乙酰度95%);羟丙甲纤维素(HPMCK15M,上海卡乐康包衣技术有限公司);丙烯酸树脂(EudragitL100-55,德固赛投资有限公司上海分公司);十六醇(广东汕头市西陇化工厂);白芷挥发油[吉水县金海天然香料油科技有限公司,其中α-蒎烯含量为6.71%、甲基环癸烷(methylcyclododecane)7.4%、1-十四烷醇3.80%,批号20071011];聚乙烯吡烙烷酮(PVPK30)、交联聚乙烯基吡咯烷酮(PVPP)均购自美国国际特品公司;水为重蒸水。2方法和结果2.11含量测定和方法研究2.1.1流动相0.0mm磷酸检测色谱柱EclipseXDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相甲醇-0.05%磷酸(30∶70);检测波长250nm;柱温30℃;流速1.0ml/min;进样量20µl。2.1.2对照品溶液的测定用甲醇-pH1.2盐酸(30∶70)配制1浓度为0.024、0.049、0.98、1.96、4.91、9.82µg/ml的对照品溶液,分别进样测定。以峰面积(A)对浓度(c)线性回归,得回归方程为A=83c+1.326(r=0.9999),表明1浓度在0.024~9.82µg/ml范围线性良好。2.1.3重复试验取4.91µg/ml的1对照品溶液连续进样6次,测得1峰面积的RSD为0.59%,表明重复性良好。2.1.4加标回收率试验精密称取1适量及处方量辅料,用pH1.2盐酸制成低、中、高浓度(15、37.5、75µg/ml)的1溶液,经0.45µm滤膜过滤,取续滤液用甲醇-pH1.2盐酸(30∶70)稀释10倍后进样测定,计算得低、中、高浓度的回收率为96.7%~104.3%。分别重复测定5次,RSD分别为1.05%、1.15%、0.98%,精密度符合要求。2.1.5srd测定取“2.1.4”项下稀释10倍的滤液分别于37℃放置1、6、12h后取样测定,RSD分别为1.34%、1.26%、1.32%。说明1的稳定性较好。2.2质量标准的确定1过100目筛,骨架材料、助漂剂等分别过80目筛。精密称(量)取175mg、白芷挥发油75µl、壳聚糖60mg、发泡剂NaHCO320mg、HPMC100mg、十六醇40mg、黏合剂40mg和硬脂酸镁4mg,按等量递增法混匀,用乳糖调节片重至400mg。用直径11mm的冲头,采用粉末直接压片工艺制备1胃漂浮片,压力控制在5~6kg/cm2。以体外释放度和体外漂浮性为指标进行处方筛选。2.3温度和温度采用中国药典2005年版二部ⅩC第二法装置,释放介质为pH1.2盐酸900ml,转速100r/min,温度(37.0±0.5)℃。分别于1、2、3、4、5、6、8、10、11、12h取样3ml(同时补充同温等量介质),经0.45µm滤膜过滤,过滤在30s内完成,取续滤液用甲醇-pH1.2盐酸(30∶70)稀释10倍后进样测定,计算累积释放率。2.4模拟胃肠动导率测定将按不同处方制得的1胃漂浮片分别置37℃、pH1.2盐酸900ml中,搅拌转速100r/min,在模拟胃肠蠕动条件下观察其漂浮性能。结果表明,所制片剂均能在10min内起漂,持漂时间与处方有关。2.5通过研究液体浮游生物的性能和外部释放，澄清了泡沫形成的影响因素2.5.1pp的影响照“2.2”项下方法制备3批胃漂浮片,考察10%PVP或10%PVPP对药物释放(见图1)和漂浮性能的影响。结果表明,4h内PVP和PVPP对药物释放的影响不显著,4h后含PVPP处方的药物释放速度比含PVP快。起漂时间分别为(2.4±0.1)和(2.2±0.1)min,持漂时间分别为(10.60±0.36)和(10.50±0.41)h。且混合时PVPP对白芷挥发油的吸附性优于PVP,未出现“溢油”现象,粉末流动性好,适合粉末直接压片,故选择10%PVPP。2.5.2助漂剂16醇用量的优化固定PVPP用量为40mg,其它条件同“2.2”项,制备3批片剂,考察十六醇用量对药物释放(见图2)和漂浮性能的影响。助漂剂十六醇比重较小,具疏水性,能降低骨架的水化速度,调节药物的释放速度。十六醇用量为10%、15%和20%时,3批片剂的起漂时间分别为(2.2±0.1)、(2.0±0.1)和(1.9±0.1)min,持漂时间分别为(10.50±0.36)、(10.60±0.33)和(10.80±0.42)h。其用量对药物释放和漂浮性能无显著影响,故十六醇用量选用20%。2.5.3不同nahco3用量对胃漂浮片内在稳定性的影响固定十六醇用量80mg和PVPP用量40mg,其它条件同“2.2”项,制备3批片剂,考察发泡剂NaHCO3用量为0、5%、7.5%对药物释放(见图3)和漂浮性能的影响。由图3可见,NaHCO3用量较大时,药物释放速度较快。NaHCO3对漂浮的贡献是双重性的,比例低时,NaHCO3在胃酸性环境中产生的CO2气体可被包裹在凝胶层中,有助于减小制剂密度,增加漂浮力;但比例大于一定的范围,产生的气体便从HPMC的水凝胶中逸出,造成浮力的降低,同时产气膨胀作用可能使片剂崩解,无法达到漂浮目的,因此必须控制适宜的NaHCO3用量。随NaHCO3用量的增加,胃漂浮片的起漂时间缩短,持漂时间有所延长,NaHCO3用量分别为0、5%、7.5%时,3批片剂的起漂时间分别为(3.6±0.2)、(1.9±0.1)和(1.7±0.1)min,持漂时间分别为(9.20±0.43)、(10.50±0.36)、(11.00±0.38)h。NaHCO3用量为7.5%时,释出的CO2量较多,片剂崩解较快,故NaHCO3用量选为5%。2.6混合设计，优润胃浮片的制备2.6.1l、16醇、nahco330和作为乳化剂的制备方法根据单因素考察结果,固定片重为400mg,其中含175mg、白芷挥发油75µl、十六醇80mg、NaHCO320mg、PVPP40mg、硬脂酸镁4mg和乳糖17mg。综合考察壳聚糖、HPMC、EudragitL100-55(3种辅料总量为164mg)用量配比对片剂漂浮性及释放的影响,设计因素和水平如表1。2.6.2漂浮性能测定经DesignExpert软件(Version7.1.3,Stat-Ease公司)设计,得到7组混合实验(见表2),根据所给出的试验方案压片,按“2.3”项下方法操作,于1、2、3、4、5、6、8、10、11、12h取样检测,计算各处方的累积释放率(如图4),并用零级方程拟合。用综合评分(Y1)和拟合方程的相关系数(Y2)为指标,考察结果见表2。体外漂浮性能测定表明,1~7号实验制得的片剂均能在3min内起漂,片剂表面形成了凝胶屏障层,以维持片剂形状。随漂浮时间延长,片剂体积增加,但仍保持片形完整,持漂时间都超过10h,满足要求。2.6.3项式方程拟合方程效果检验分别以Y1和Y2对A、B、C进行多元线性回归和二项式拟合,通过复相关系数判断模型的拟合程度。多元线性回归方程:Y1=0.44A+0.098B+0.29C(R2=0.4452,P=0.3078);Y2=0.61A+1.17B+1.35C(R2=0.8333,P=0.0278)。二项式方程:Y1=0.53A+0.14B+0.45C-1.16A×C-0.75B×C(R2=0.9764,P=0.0466);Y2=0.54A+1.22B-0.16C+4.03A×C(R2=0.9686,P=0.0093)。从拟合方程的复相关系数R2值可见,3个指标采用二项式方程拟合效果较好。3个因素对Y1和Y2均有较显著影响。用DesignExpert软件优化得到与设定值接近的2个组合(见表3),可见较优组合为:壳聚糖为0.5,HPMC为0.36,EudragitL100-55为0.14,即壳聚糖82mg,HPMC59mg,EudragitL100-5523mg。2.6.4起漂时间和持漂时间照优化处方制备1胃漂浮片3批,测定体外释放度(见图5)和漂浮性能。结果表明,3批片剂的起漂时间为(2±0.1)min,持漂时间为(10.5±0.35)h,Y1=0.1699±0.0049,Y2=0.9832±0.0032,与预测值相近。由Y2值(零级方程拟合的相关系数)可见,制品的体外释放符合零级模型。3两种吸收促进剂的配比对患者残留时间的影响1具有酚