消炎宝宝霜制备及抗炎效果评价 中药学专业

消炎宝宝霜制备及抗炎效果评价目录TOC\o"1-2"\h\z\u摘要 前言1.1背景及发展前景随着社会的发展和人们生活水平的提高，人们对日常用品的要求也越来越高，婴儿的皮肤稚嫩脆弱，无论是秋冬干燥的天气，还是夏天炎热潮湿的天气，或者衣服的材质，尿布的更换等等都容易让其受损脱皮，甚至红肿，这对于初生稚嫩的宝宝来说是痛苦的，所以人们希望出产一种毒副作用小，安全，绿色健康的日用品，以解决婴儿皮肤红肿过敏，干燥脱皮，干红瘙痒，湿疹，麻疹，尿布疹，痱子等[1-4]的问题。以中草药为添加剂的膏霜具有副作用小，安全健康，而且药性稳定，药力持久的特点，并且针对性强，对皮肤安全温和，刺激性小，特别适合婴儿稚嫩的肌肤。根据贾红梅[5]的膏霜的基础配方技术一文，李东光和翟怀凤[6]的实用化妆品配方手册，基础膏霜一般是由油相原料、水相原料、乳化剂组成乳化体系，加入保湿剂,达到保湿作用，防腐剂达到防腐作用。为了优化配方，在保湿膏霜的基础上加入薄荷、芦荟、紫草、甘草、洋甘菊、马齿苋、莪术、倒地铃、橄榄油等中药提取物，运用中医药理论体系，排除配伍禁忌，利用药物相畏相须相使的理论选用了具有抗炎消肿，抗过敏，清热凉血，解热镇痛，修复受损肌肤，促进皮肤新陈代谢等功效的中草药。在膏霜配方中采用的药物都具有抗炎消肿和解热镇痛的功效，并且运用了具有缓和药性作用的天然药物甘草，使配方更加温和,运用芦荟和薄荷醇缓解了肌肤红肿带来的热痛并起到很好的修复作用,制作出一种针对婴幼儿及敏感肌肤的红肿，湿疹，过敏，以及肌肤修复，美白保湿等问题的膏霜。近年来，随着人们生活水平和认知的提高，以天然药物为主流的保健品，护肤保养品，甚至化妆品成为市场主流，药妆的概念越来越深入人心，其中中药药妆不仅毒副作用小，安全温和，绿色健康。还提高了肌肤的修复能力和抵抗力，还能起到预防作用，使皮肤更加健康，将逐步发展成为化妆品市场的主流。1.2选用的中药及中药提取物的功效利用中医药理论，考虑药物间的配伍关系，选用的几种中药或中药提取物均有抗炎功效，利用药物相须相使理论，提高了膏霜的抗炎效果，其中马齿苋和芦荟连用，增强了利水消肿的功效；芦荟、马齿苋与薄荷脑均有抗炎抑菌的功效，配伍使得抗炎效果更为显著；紫草凉血消肿与莪术的破血逐瘀，消肿止痛，增强了配方消肿止痛的功效，促进皮肤的微循环，促进皮肤自我修复能力；芦荟与洋甘菊均具有抗过敏的功效，使得配方有抗过敏的功效；薄荷脑和紫草透疹能力良好，对治疗各种湿疹，麻疹均有奇效。甘草具有清热解毒，抗炎消肿，缓和药性的作用，选用甘草与其它抗炎药物一同使用，除了有美白的功效外，还可缓和消除其带来的毒副作用，是配方更加温和，对婴儿脆弱稚嫩的皮肤来说，无疑是最好的。薄荷脑[7]：薄荷脑又叫薄荷醇，是植物薄荷的提取物，具有抗炎消肿，透疹，抑菌，解毒，解热镇痛和止的等功效；具有刺激中枢神经的功能，能作用于皮肤有灼感和冷感同时，它对感觉神经末梢又有抑制和麻痹的作用，具有明显的缓解和镇痛作用。甘草：甘草的有效成分为甘草甜素，具有抗炎消肿、抗病毒、免疫调节的作用，又能缓和药性、清热解毒，降低副作用缓和或消除毒性及副作用。芦荟[8]：芦荟的有效成分为芦荟多糖、芦荟大黄素等蒽醌类化合物，具有抗炎消肿、解热镇痛、修复肌肤和抗过敏的作用，此外还有抑菌，提高免疫力，促进伤口愈合和细胞再生的作用。洋甘菊[9]：洋甘菊的有效成分为总黄酮，有消炎，抗过敏，润泽和美白肌肤的功效，此外还能舒缓肌肉疼痛，增强皮肤的抵抗力和改善过敏肌肤。马齿苋：马齿苋有效成分为总黄酮，具有抗炎的功效，因为其含有大量的钾盐和胡萝卜素，故又具有利水消肿和防治溃疡的作用，马齿苋对格兰阴性菌有较强的抑制作用，有“天然抗生素”之称。紫草[10]：效成分为紫草素，具有清热凉血，解毒透疹的功效，可用于麻疹，湿疹。也可用于烧伤，起到消炎止痛消肿的作用。莪术：莪术是一种抗炎效果很好的中药，其有效成分主要是为挥发油，气味芬芳，具有破血逐瘀，消肿止痛，可促进皮肤微循环以提高肌肤的自我修复能力，抑制局部水肿和炎症。此外还有抑菌的作用。倒地铃[11]：倒地铃的有效成分为总黄酮，具有抗炎止痛的良好功效，同时还可清热凉血，解毒。2材料与仪器2.1材料2.1.1中草药及有效成分甘草、紫草、洋甘菊、芦荟、马齿苋、莪术、倒地铃、薄荷醇2.1.2基础原料凡士林、芦芭油、霍霍巴油、二甲基硅油、甘油、十六十八醇、聚乙二醇200、去离子水、卡波姆940、甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸脂（GlucateSS）,甲基葡萄糖苷倍半硬脂-EO-20(GlucateSSE20)、吐温60(Tween60)、司盘60(Span60)。表1材料明细表名称规格厂家霍霍巴油分析纯重庆高岛化妆品商行芦芭油分析纯汉宝宝化妆品原料研发白凡士林分析纯泰尊家居专营店甘油分析纯上海阿拉丁生物科技股份有限公司甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯（GlucateSS）甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯-EO-20（GlucateSSE-20）分析纯路博润有限公司薄荷醇、橄榄油分析纯唯你油脂手工皂原料化妆品DIY原料二甲基硅油、十六/十八醇卡波姆940、聚乙二醇分析纯青岛优索化学科技有限公司2.1.3动物种蛋：质量45~55g,购买于韩山生态农场。置于温度为37.5±0.5℃，相对湿度为55%~70%的微电脑全自动孵化器进行孵育。昆明种小白鼠：体重质量20~30g,购买于广东药科大学实验动物中心，SPF级，置于专门的无菌实验室中进行适应性培养。2.2仪器表2仪器明细表仪器型号厂家BP211D型十万分之一电子分析天平BP211D德国赛多利斯集团SZCL-3B型数显智能控温磁力搅拌器SZCL-3B巩义市予华仪器有限责任公司TC-15控温电热套TC-15海宁新华医疗器械厂DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器DF-101S上海智光仪器仪表有限公司PHS-3C型pH酸度计PHS-3C上海三信仪表厂数显游标卡尺FS-0601艾瑞泽微电脑全自动孵化器-嘉兴俊思电子有限公司3方法与结果3.1中药提取物的主要成分和提取方法表3中药活性成分及提取方法中药溶剂提取方法时间主要活性成分芦荟蒸馏水-乙醇水提醇沉法24h芦荟多糖、蒽醌类化合物干草根乙醇索氏提取12h甘草甜素洋甘菊乙醇乙醇回流2h总黄酮马齿苋乙醇超声波提取45min总黄酮紫草乙醇乙醇回流12h紫草素莪术蒸馏水水蒸气蒸馏提取8h挥发油倒地铃乙醇、石油醚、乙酸乙酯乙醇回流、萃取6h总黄酮3.2中药活性成分提取流程以及提取液的制备芦荟：根据王怡丹[12]的研究，采用水提醇沉法提取芦荟中的多糖及蒽醌类化合物，用蒸馏水浸泡直至芦荟表皮中的黄色液汁去除。去掉芦荟表明叶片，用蒸馏水清洗留下的凝胶，捣碎后用纱布过滤去掉渣滓，放置一晚，然后离心抽滤，浓缩的芦荟汁再次离心，放置冰箱备用，滴加无水乙醇至浓度为80%为止，静置12h，再次重复，过滤得到结晶，配置成含芦荟提取物10%的提取液。甘草：根据李振汉[13]等人的研究，将甘草粉碎成粉末，过20目筛，以70%乙醇为溶剂，索氏提取回流1.5h，过滤取滤液蒸发浓缩，静置12h过滤，滤液离心静置，得到沉淀，洗涤，干燥得到粗品，重结晶的纯品，用饱和蔗糖溶液配置成含甘草提取物10%的提取液备用。洋甘菊：根据夏娜[14]的研究，将洋甘菊头状花絮粉碎（40目筛），准确称取洋甘菊干粉20.0g，加入70%的乙醇200mL，在75℃的水浴回流提取2h，离心取上清液进行减压浓缩至无醇味，加蒸馏水至100mL，用饱和蔗糖溶液配置为洋甘菊提取液备用。马齿苋：根据陈国妮[15]等人的研究，取马齿苋50g粉碎，用70%的乙醇浸泡在锥形瓶中，在35℃条件下超声波提取40min，然后抽滤浓缩到无醇味得到马齿苋黄酮结晶，加极少量的NaHCO3溶液溶解，使得溶液呈弱碱性，用饱和蔗糖溶液配制成10%的马齿苋提取液备用。紫草：取紫草50g，干燥3h，粉碎，用90%的乙醇回流提取12h，过滤，蒸发浓缩至无醇味结晶，加极少量的NaHCO3溶液溶解，使得溶液呈弱碱性，用饱和蔗糖溶液配制成10%的紫草提取液备用。莪术：取莪术100g，粉碎，于500mL的蒸馏烧瓶中，加6倍水，用挥发油提取装置提取6h，关火，收集莪术挥发油备用。倒地铃：取倒地铃50g，粉碎，于500mL的圆底烧瓶中加300mL95%乙醇，回流提取3h，过滤，取滤液蒸发回收乙醇，至滤液无醇味，用70%石油醚萃取除去叶绿素，重复多次，再用乙酸乙酯萃取得到总黄酮溶液，蒸发回收乙酸乙酯得到总黄酮，用少量NaHCO3溶液溶解，将其用饱和蔗糖溶液配置成10%的溶液。3.3膏霜基础配方的选择3.3.1油相原料凡士林：是一种矿物蜡，化学稳定性和抗氧化性良好，能在皮肤表面形成一道保护膜且不被吸收，从而防止皮肤的水分轻易散失，因此具有很好的保湿效果，十分适合干燥肌肤使用。芦芭油：芦芭油是一种矿物油，可以作为一种多功能的保湿基质，能增加肤感和润滑性，提高化妆品保湿性，它还是一种润湿平衡剂，稳定乳液和增粘。具有锁水功能且安全性能极佳。霍霍巴油：霍霍巴油是从植物霍霍巴树的种子中提取出来的一种无色、无味、透明的天然植物油脂，主要功效是滋润、收紧和软化皮肤，此外还具有良好的消炎效果。霍霍巴油是渗透性较强的基础油，极易被皮肤吸收，清爽滋润，特别适合油性敏感皮肤，能恢复皮肤pH平衡，改善皮肤状况。二甲基硅油：具有抗紫外线的作用，润滑保湿性能和透气性良好。是一种良好的化妆品保湿基质，二甲基硅油能与单硬脂酸甘油酯、吐温、司盘等表面活性剂混合使用，作为膏霜、乳液的基质。使用比例最高可达到15%以上，对皮肤及粘膜没有刺激。聚乙二醇200：无色无臭无毒的液体，对皮肤无刺激性，具有优良的润滑性、保湿性和分散性。水溶性良好，并与许多有机物组份有良好的相溶性。十六十八醇：可以作为乳化剂和助乳化剂，在乳状液中有稳定和共同乳化的作用。作为一种助乳化剂，它可减少形成稳定乳剂所需的表面活性剂的用量。十六十八醇用量过多会使膏霜出现白条，所以应该控制用量。3.3.2水相原料甘油：可以作为保湿剂，是一种无色、无臭、味甜的黏稠状液体。30%以上的用量会对皮肤产生刺激性，需控制用量。卡波姆940：增稠剂，酸性，可用三乙醇胺中和，中和后的卡波是优秀的凝胶基质，有增稠的作用且稳定性好，可广泛应用于乳液、膏霜、凝胶中。去离子水：水中一般含有钠、钙、铁、铜、氯、溴等元素的离子。去离子水是指自然界的水除去了呈离子形式杂质后的纯水。自然状态下,水中的这些电解质的存在不仅能够使膏霜乳液产生结块现象，同时也可以使肌肤老化，因此护肤品的生产上一定要使用去离子水。3.3.3乳化剂吐温60：聚氧乙烯失水山梨醇硬脂酸酯，W/O型非离子型表面活性剂，与司盘可形成乳化剂复配体系，增强乳化效果。司盘60：山梨醇酐单硬脂酸酯，W/O型非离子型表面活性剂，与吐温可形成乳化剂复配体系，增强乳化效果。甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯（GlucateSS）：优良的油包水型膏霜乳化剂，和甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯-EO-20(glucateSSE-20)配合形成高效的非离子乳化剂体系，此体系在水包油乳液中有不寻常程度的粘度附加力。甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯-EO-20（GlucateSSE-20）：优良的油包水型膏霜乳化剂,和甲基葡萄糖苷半倍硬脂酸脂（GlucateSS）配合形成高效的非离子型乳化体系，此体系在水包油乳化液中有不寻常程度的粘度附加力。3.4膏霜的制备称取油相原料，水相原料，中药提取物及有效成分。将油相原料和水相原料分别加热融解，在80℃条件下，将熔融油相加入水相于3000R的均质机或恒温磁力搅拌器下搅拌均匀得白色膏霜，在膏霜基质温度降至50℃时，再加入有效成分及防腐剂，继续搅拌，降低至室温，封口，既得膏霜。3.4.1宝宝霜的配方为了得到最佳的膏霜的基础配方，通过大量文献的阅读和理解，本实验将已经确定的膏霜原料中对实验影响较小的原料固定为一个值，方便进行正交实验筛选出最佳的配方。表4宝宝霜的配方原料名称作用用量%油相白凡士林膏霜基质C芦芭油膏霜基质6.0霍霍巴油保湿剂3.0二甲基硅油保湿基质6.5Peg200保湿剂4.0十六十八醇乳化剂0.3SS乳化剂ASSE20乳化剂A水相甘油保湿剂5.0卡波姆940增稠剂B去离子水水To100C相（共4.8%）薄荷醇有效成分、香料0.1芦荟提取液有效成分4.0紫草提取液有效成分0.1洋甘菊提取液有效成分0.1马齿苋提取液有效成分0.1莪术挥发油有效成分0.1甘草提取液有效成分0.1倒地铃提取液有效成分0.1橄榄油有效成分0.1卡松防腐剂3滴3.4.2乳化剂的选择要制备有一定相对稳定性的膏霜或乳液，必须加入第三种物质，即乳化剂。贾艳梅[5]说“乳化剂在膏霜中的比例为2%~6%”，我们控制乳化剂的用量在此之间。选择性能优良的乳化剂的方法有多种：常用的是HLB法、PIT法和EIP法等。本次实验用到的是HLB法，在膏霜中，不同的油相需要的乳化剂的HLB值不同，因而乳化体系所需的HLB值与乳化剂的HLB值应使之尽可能一致。我们在选择乳化剂之前，首先要确定被乳化体系所需的HLB值，再选择乳化剂。通常，使用复合乳化剂的乳化效果比使用单一乳化剂要好，且非离子型乳化剂的乳化效果较好，本实验中选用复配乳化剂是SSE20和SS，其HLB值分别为15和5；还有span60和tween60，其HLB值分别为14.9和4.7。根据公式(3-1）公式（3-2）计算。乳化油分所需HLB的计算见公式(3-1）乳化所需…………………公式(3-1）混合乳化剂HLB的计算见公式（3-2）HLB=(WA×HLBA+WB×HLBB)/（WA+WB）………………公式(3-2）见公式(3-2）中，WA、WB分别为混合乳化剂A和B的用量，HLBA、HLBB分别为乳化剂SSE20和SS、span60和tween60的HLB值。本实验中将除乳化剂外的其它用量控制为一个值，我们以正交实验的水平组分别进行计算，根据公式(3-1)和公式(3-2)计算得的乳化剂的比例约为1:1,用量则保持在2%~6%之间。本实验将乳化剂比例用量取3组数据进行以下正交实验以筛选出最佳的膏霜配方。3.5正交试验筛选最佳配方3.5.1膏霜评价指标1.感官指标性状：膏体颜色是否洁白，膏体色泽暗沉或明亮有色泽。香气是否符合香型。粘稠度：膏霜是否粘稠。铺展性：在涂抹过程中是否容易铺展，是否会起白条。滋润性：是否赋予皮肤滋润感。油腻性；在使用过程中有无过度的油腻感，是否容易吸收。2．理化指标 耐热稳定性实验：取正交实验的18组试验品，倒入18支试管中，使液面高度一致，塞上干净的玻璃塞。把试管置于预先调好的（40±1）℃的电热恒温干燥箱内，经过24h后取出，恢复室温后与原样品进行目测比较，观察其性状有无油水分离现象。耐寒稳定性实验：取正交实验的18组试验品，倒入18支的试管中，使液面高度一致，塞上干净的玻璃塞。放置在（4±1）℃的冰箱内，经过24h后取出，恢复室温后与原样品进行目测比较，观察其性状有无油水分离现象。耐热耐寒交替实验：取正交实验的18组试验品，倒入18支试管中，使液面高度一致，塞上干净的玻璃塞。分别把试管置于预先调节好的（40±1）℃的电热恒温干燥箱内，经过24h后取出，再放置在（4±1）℃的冰箱内，24h后取出在与原样品进行目测比较，观察其性状有无油水分离现象。离心稳定性实验：取正交实验的18组试验品，倒入18支尖头离心管中，使液面高度一致，塞上干净的玻璃塞。分别把试管置于预先调节好的3000R的离心机内离心30min后取出，观察其性状有无油水分离现象。pH值的测定：取膏霜20g，分次加蒸馏水10份并不断搅拌，加热至40℃，使其完全溶解后，冷却至室温。用pH试纸或pH计进行测定其pH值。3.5.2正交试验本实验主要以膏霜的外观及理化性质作为评价指标，对影响膏霜稳定性较大的因素:乳化剂配比A，增稠剂配比B，膏霜基质配比C，三个因素进行筛选优化。由于研究的乳化剂不同，故分为乳化剂不同的A1，A2两组正交试验，第一组见表5~6，第二组见表7~8，每个因素取3个水平，配制100g样品进行各种理化性质检验和感官评价，照L9(33)进行试验，一共18组试验。第一组乳化剂：表5正交因素水平表单位：g水平A1（乳化剂）B（增稠剂）CSSE20SS卡波姆940凡士林12.002.000.35732.502.500.59表6正交试验表序号因素A1BC111121323123421252216233731383319322第二组乳化剂：表7正交因素水平表单位：g水平A2（乳化剂）B（增稠剂）CSpan60Tween60卡波姆940凡士林12.002.000.35732.502.500.59表8正交试验表序号因素A2BC111121323123421252216233731383319322本课题将先从膏霜的性状观察，按照膏霜的质量评价标准系统综合进行检验和评价，主要包括:膏霜的色泽和香气、铺展性、肤感、粘稠度、拈起感等外观性状，对其感官指标进行初步判断，看膏霜的色泽是否洁白，香气是否符合香型，是否容易铺展，涂抹有无白条现象，肤感细腻或者厚重，是否粘稠或倒扣呈流动状态，类似乳液。再结合其理化性质进行评价，包括冷热稳定性、离心稳定性、pH值等理化指标，筛选出膏霜的最佳配方。将以上两组正交试验的结果依次排序综合在一个表格分析。表9正交样品分析序号色泽PH粘稠度铺展性油腻感粘起感耐热耐寒热寒循环离心稳定性香气1洁白中性较稀良好轻一般稳定不稳定不稳定不稳定清新2洁白中性较稠一般重良好稳定不稳定稳定不稳定清新3洁白中性较稠一般重一般不稳定稳定不稳定不稳定一般4洁白中性适中良好轻良好不稳定稳定不稳定不稳定清新5洁白中性适中良好轻良好稳定稳定稳定稳定清新6洁白中性粘稠一般重一般稳定不稳定不稳定不稳定一般7洁白中性适中一般轻良好稳定稳定稳定稳定清新8微黄中性粘稠差轻一般不稳定不稳定不稳定不稳定一般9洁白中性适中良好轻良好稳定稳定稳定稳定清新10洁白中性较稀良好轻一般不稳定稳定不稳定不稳定清新11洁白中性较稠一般重一般不稳定稳定不稳定不稳定清新12洁白中性较稠一般重一般不稳定不稳定不稳定不稳定一般13洁白中性适中良好轻良好不稳定稳定不稳定不稳定清新14洁白中性较稀良好轻良好不稳定稳定不稳定不稳定清新15洁白中性较稠一般重一般稳定稳定稳定不稳定一般16洁白中性适中良好轻良好稳定稳定稳定稳定清新17微黄中性较稠一般重一般稳定不稳定不稳定不稳定一般18微黄中性适中良好轻良好稳定稳定稳定稳定清新实验结果分析，由表分析得出5、9、16号样品气味清新，色泽洁白，铺展性，粘稠度，粘起感，寒热稳定性，离心稳定性等各项指标良好，故初步筛选出这三个样品加入不同量的中药提取液进行进一步质量评价。3.6抗炎效果的测定为了筛选出适宜的有效成分加入量，我们选择有效成分在膏霜中占比为3.80%，4.80%，5.80%的三组进行实验，分别将正交实验筛选出三组样品按有效成分加入量为3.80%，4.80%，5.80%各制备100g样品，再次进行各项指标的检验，筛选出进行抗炎效果检测的样品组。表10有效成分含量筛选样品组样品有效成分占比（%）色泽气味热稳定寒稳定热寒循环粘稠度铺展性油腻感粘起感53.80洁白清新稳定稳定稳定适中良好轻良好54.80洁白清新稳定稳定稳定适中良好轻良好55.80微黄清新稳定稳定稳定适中良好轻良好93.80洁白清新稳定稳定稳定适中良好轻良好94.80洁白清新稳定稳定稳定适中良好轻良好95.80洁白清新稳定稳定稳定适中良好轻良好163.80洁白清新稳定稳定稳定适中良好轻良好164.80洁白清新稳定稳定稳定适中良好轻良好165.80微黄清新稳定稳定稳定适中良好轻良好实验结果分析，通过表可得出9号样品各项指标良好，不同占比的中药提取物下均呈现出良好的理化指标，色泽较好，故选择其三个试验组进行抗炎效果的检验，以筛选出最佳的有效成分加入量。3.6.1蛋清致炎小鼠足后跖实验单因素方差分析方法：在方差分析中，我们将要考察的对象的某种特征称为试验指标，影响试验指标的条件称为因素，在一项试验中只有一个因素在改变，则称为单因素试验，方差分析就是对试验的数据进行分析，检验方差相等的多个正态分布整体的均值是否相等，进而判断各因素对试验指标的影响是否显著。假设前提是每个总体均服从正态分布，方差齐性，总体中的每个样本是独立的。单因素方差分析是针对多组均数之间的比较。皮下注射是将药液注入皮下组织以快速发挥作用。对于小鼠来说蛋清是一种异源性蛋白，足跖皮下注射会导致即发性足跖肿胀。根据王思农[16]的消炎止痛膏抗炎作用的实验研究，我们采用鸡蛋清致炎小鼠后足跖，通过涂抹产品观察测量小鼠的后足跖的厚度，计算其肿胀度和肿胀抑制率，以此来检验膏霜的消炎效果。根据公式（3-3）和公式（3-4）计算可以得出数据。肿胀度………………公式（3-3）肿胀抑制率（……………..公式（3-4）实验步骤：选取重量在20~30g之间的小鼠20只，将小鼠分为空白组和实验组，空白组5只，实验组各5只。用游标卡尺测量每只小鼠右足跖的厚度（同一位置），记录数据，随后在小鼠后足跖（测量的位置）远心端皮下注射鸡蛋清0.02mL/只，使其发炎肿胀，观察小鼠足跖，保证蛋清不溢出影响实验结果。分别在各实验组的小鼠后足跖涂擦本抗炎膏霜，空白组涂抹空白基质。测量记录致炎涂抹膏霜后小鼠右后足跖的厚度，时间间隔10min，1.5h，3.5h，5.5h各测量一次。观察并记录实验数据，计算肿胀度及肿胀抑制率。实验结果及结论：不同含量有效成分对小鼠足跖的肿胀度和肿胀抑制率的影响，根据肿胀度和肿胀抑制率计算公式（3-3）和公式（3-4）可得出涂抹膏霜后各个时间段小鼠右足跖的肿胀度和肿胀抑制率。表11不同含量有效成分下小鼠足跖的肿胀度(x±σ)单位：mm组别注射前小鼠足跖肿胀度注射10min后的小鼠足跖肿胀度注射1.5h后小鼠足跖肿胀度注射3.5h后小鼠足跖肿胀度注射5.5h后的小鼠足跖肿胀度空白组0.0000.222±0.0400.212±0.0410.200±0.0410.188±0.0493.80%0.0000.220±0.0320.124±0.0270.070±0.0170.064±0.0164.80%0.0000.232±0.0390.072±0.0230.052±0.0130.045±0.0055.80%0.0000.258±0.0190.066±0.0090.047±0.0110.048±0.008肿胀度用均数±标准差表示，对数据进行统计学分析，应用SPSS软件进行统计学处理，由方差齐性检验可知注射10min后、1.5h后、3.5h后、5.5h后各个时间段P<0.05，可知方差齐性不相等,因为数据符合正态分布且方差齐性，故用单因素方差分析，单因素方差分析是针对多组均数之间的比较。SPSS软件分析可知注射10min后P=0.288>0.05，说明注射10min后的小鼠足跖肿胀度受膏霜的有效成分加入量影响不显著；注射1.5h后，3.5h后，5.5h后各组P值P=0.00<0.05说明小鼠足跖肿胀度受膏霜的有效成分加入量影响显著，说明1.5h后，3.5h后，5.5h后实验组与空白组，实验组与实验组之间小鼠足跖肿胀度对比有显著性差异，由此可知与空白组对比膏霜消炎效果良好。图1小鼠足跖肿胀度由图1可知，与空白组对比，各实验组小鼠足跖肿胀度呈下降趋势，说明其消炎效果良好，其中有效成分为4.80%和5.80%的两组下降趋势较快，且3.5h后肿胀度基本相等，由此可以得知4.80%和5.80%的两组消炎效果比3.80%的好。表12不同含量有效成分下的小鼠足跖的肿胀抑制率单位:%组别注射前小鼠足跖肿胀抑制率注射10min后的小鼠足跖肿胀抑制率注射1.5h后小鼠足跖肿胀抑制率注射3.5h后小鼠足跖肿胀抑制率注射5.5h后的小鼠足跖肿胀抑制率3.80%0.000.9041.5065.0068.004.80%0.004.5066.0074.5076.105.80%0.0016.0068.8076.1075.90图2小鼠足跖的肿胀抑制率通过实验数据及图表分析可以得知，随着有效成分的增加，肿胀抑制率提高。1.5h后有效成分为3.80%的实验组的肿胀抑制率为41.50%，而有效成分为4.80%和5.80%的实验组的肿胀抑制率为66.00%和68.80%，基本相等且高于3.80%的实验组，说明其消炎效果比3.80%的实验组好。3.5h后有效成分为3.80%的实验组的肿胀抑制率为65.00%，而有效成分为4.80%和5.80%的实验组的肿胀抑制率为74.50%和76.10%，说明其消炎效果比3.80%的实验组好。5.5h时的肿胀抑制率与3.5h时比较变化均不大，4.80%和5.80%的实验组的肿胀抑制率为76.10%和75.90%，基本相等。故可得出以下结论：5.80%的消炎效果比4.80%稍好，我们考虑到有效提取物的提取工艺复杂繁琐，成分较多且购买成本较高问题，故决定采用了4.80%的含量为膏霜的有效成分添加量。3.6.2志愿者测试实验将9号样品有效成分含量为4.80%的组取出，选择不同年龄段的志愿者30名，将膏霜涂抹于蚊虫叮咬，抑或烫伤部位，测试其消肿消炎效果，30名志愿者均表示该膏霜对蚊虫叮咬的红肿伤口有明显的止痒消炎功效，涂抹2h左右，基本实现止痒和消肿功效，皮肤红肿有所消退。6名微微烫伤的志愿者表示涂抹膏霜1h后，烫伤部位热痛感消失，感觉良好，没有过敏现象。故表明该含量的膏霜消炎效果良好。3.7刺激性的检验3.7.1鸡胚绒毛尿囊膜实验鸡胚绒毛尿囊膜实验是一种体外刺激性评估方法[17—19]，利用孵化胚胎中期尿囊绒毛膜血管完整、清晰和透明的特点，将一定量的评估物滴加在上面，过一段时间后，观察上面的血管及其网络的形态结构，颜色及通透性的变化，结合绒毛尿囊膜蛋白质性质改变判断其受损程度，评估受试物的刺激性。根据标准可知膏霜作为一种不透明的受试物，应采用终点评价法进行评分。鸡胚的培育：选取种蛋若干，置于温度为37.5±0.5℃，相对湿度为55%~70%的微电脑全自动孵化器中进行孵育，设置孵化器每4h进行一次翻蛋。第三天时进行照蛋，在黑暗环境下的用强光从气室一端照射可以观察到鸡胚中有蜘蛛状的血管，剔除孵育不成功的鸡胚，将鸡胚继续孵育到第六天，可以观察到血管布满1/3的鸡胚，再次剔除孵育不成功的鸡胚，将剩余鸡胚继续孵化至第八天，这时候鸡胚血管壁较薄，血管清晰完整，适合进行鸡胚绒毛尿囊膜实验检验刺激性。实验步骤（终点评估法）：将置于孵化器中一天的膏霜取出，将8日龄鸡胚进行照蛋检查，在蛋壳表面标记气室位置。新鲜配置质量分数0.9%NaCl溶液，高温高压消毒灭菌20min。用牙科锯齿弯镊小心剥去带标记的蛋壳部分，暴露白色蛋膜。用消毒灭菌后的胶头滴管吸取适量质量分数0.9%NaCl溶液使蛋膜湿润后，将溶液倾出。小心用镊子去除内膜，保证血管膜不受损。取0.3mL的膏霜直接作用于CAM,确保至少50%的CAM表面被受试物覆盖,或直接将涂布膏状物的薄膜与CAM膜接触。作用3min后,用生理盐水轻轻冲洗CAM膜上的受试物，冲洗操作可能很快将CAM膜上轻度的出血变化掩盖,因此应在30S冲洗完成后观察结果,观察每种毒性效应变化的程度。如果观察表明全部6只鸡胚至少1种反应的评分为中度以上，试验应重复一次。图3实验过程图示实验结果： 表13终点评价法评分标准评分血管状况0无变化1轻微出血，凝血，融血2中度出血，凝血，融血3重度出血，凝血，融血观察用于试验的六只鸡胚的血管出血情况，并记录结果。每只鸡胚的计分等于每只鸡胚观察到的出血，凝血，血管溶解程度的总和。表14鸡胚出血情况及评分鸡胚编号123456出血情况轻度出血，无血管溶解无出血，轻度血管溶解无出血，凝血及血管溶解无出血，无凝血及血管溶解轻度出血，无血管溶解轻度凝血，无出血及血管溶解评分100011刺激性轻微或无无无无轻微或无轻微或无用于检验膏霜刺激性的6只鸡胚图片图4鸡胚血管图实验结论：ES等于6只鸡胚评分之和的平均数，6个鸡胚的平均评分ES=0.50<12，实验表明该膏霜配方刺激性极小，较为温和，适合婴儿及敏感肌肤的人群使用。4结论和讨论本课题是研究以中药及其提取物作为主要抗炎成分配制出针对宝宝皮肤红肿瘙痒，湿疹，尿布疹等问题的膏霜，采用自然乳化法配制，运用正交设计的实验方法筛选配方，以蛋清致炎小鼠足跖实验验证其抗炎效果筛选出最佳有效成分含量，再以鸡胚尿囊膜实验检查其刺激性。实验结果表明以白凡士林7%，霍霍巴油3%，芦芭油6%，十六十八醇0.3%，PEG2004%，二甲基硅油6.5%，甘油5%，卡波姆9400.4%，抗炎药物提取物总量4.8%，甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸脂（GlucateSS）2.50%,甲基葡萄糖苷倍半硬脂-EO-20(GlucateSSE20)2.50%，芦荟提取液4%、橄榄油0.1%、紫草提取液0.1%、马齿苋提取液0.1%、甘草根提取液0.1%、洋甘菊提取液0.1%、莪术提取液0.1%、倒地铃提取液0.1%、薄荷脑0.1%、去离子水to100，作为配方，配制出稳定性、涂抹分散性、肤感等指标较好，抗炎效果良好，温和低刺激性的膏霜。该配方制出的膏霜均匀细腻，莹润洁白，pH值中性，稳定性良好，采用有效成分的自然药香，气味清新。参考文献[1]朱明姬,李景华,姜秀英.婴儿湿疹[J].中国社区医师,2006(3):7[2]左晓玥.婴儿湿疹的护理[J].当代临床医刊,2015,28(6):1821-1821.[3]徐祝平.小儿夏季常见皮肤病的防治[J].早期教育(家教版),2005(8):30-31.[4]HoriguchiY,IkomaA,SakaiR,etal.LinearIgAdermatosis:Reportofaninfantilecaseandanalysisof213casesinJapan[J].JournalofDermatology,2008,35(11):737-743.[5]贾艳梅.化妆品膏霜基础原料与配方技术[J].精细与专用化学品,2008,16(13):21-23.[6]李东光,翟怀凤.实用化妆品配方手册[J].日用化学工业信息,2003(14):18-18.[7]温亚娟,项丽玲,苗明三.薄荷的现代应用研究[J].中医学报,2016,31(12):1963-1965.[8]SajjadA,SajjadSS.Aloevera:AnAncientHerbforModernDentistry—ALiteratureReview[J].JournalofDentalSurgery,2014,2014:1-6.[9]袁艺,龙子江,杨俊杰,等.洋甘菊挥发油抗炎作用的研究[J].药物生物技术,2011(18):52-55.[10]詹志来,胡峻,刘谈,等.紫草化学成分与药理活性研究进展[J].中国中药杂志,2015(21):4127-4135.[11]韦建华,陈君,蔡少芳,等.倒地铃化学成分研究[J].中草药,2011(8):1509-1511.[12]王怡丹,王亮,刘冰雁.芦荟有效成分比较研究[J].北方园艺,2015(24):150-153.[13]李振汉,梁开玉.甘草甜素的提取工艺研究[J].重庆工商学学报(自然科学版),2004(6):566-569.[14]夏娜,陶海燕,赵丽凤.洋甘菊中多糖与黄酮粗提物抗氧化及抑制亚硝化作用研究[J].食品工业,2014(11):293-296.[15]陈国妮.马齿苋黄酮类化合物的提取及抗菌特效研究[D].西安:西安工程大学,2016.[16]王思农.消炎止痛膏抗炎作用的实验研究[J].卫生职业教育,2009,27(19):128-130.[17]刘彩云.鸡胚绒毛尿囊膜试验研究不同香波对眼的刺激强度[J].香料香精化妆品,2016(5):47-53.[18]王宁,洪新宇,帅怡,等.鸡胚绒毛尿囊膜血管试验在化妆品安全性评价中的应用研究[J].现代预防医学,2016,43(22).[19]中华人民共和国出入境检验检疫行业标准.化妆品眼刺激性\腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊膜试验[S].国家质量监督检验检疫总局,2009.综述中药药妆的发展前景和抗炎膏霜的简介1中药药妆的发展及其前景近年来，中药植物有效成分运用于化妆品的日趋活跃，药妆一词逐渐出现在我们生活中。药妆这个概念其实早在中国古代就出现过，只不过没被系统的总结出来，在《神农本草经》中就记载有“红玉膜”“面黑另白方”等美容品。而药妆这个概念真正出现是从上世纪九十年代出现在美国的法律条文上，随着化妆品及保养品的发展，药妆化妆品占美国化妆品市场的60%以上，而在日本和韩国，药妆也逐步成为化妆品市场的主流。在中国尽管化妆品消费和用量数额庞大，但是要药妆化妆品的市场份额却很小，而随着社会的发展以及人们认知的提高，中药成分因其绿色健康，低刺激，针对性强的特点被人们所喜爱，人们趋向于运用植物成分来解决各种皮肤问题，故以中药植物制作的化妆品越来越被全世界消费者所喜爱,为了满足市场需求，中药药妆成为许多化妆品研究开发机构的重点目标并逐步出现在中国化妆品市场中。中药药妆是以中医药理论为指导思想，添加中药功效性成分，针对性的解决皮肤问题的一类化妆品或皮肤保养品，具有副作用小，安全温和，针对性强的特点，是敏感皮肤及问题皮肤的福音。特别对于婴儿，幼儿及儿童这个群体来说尤为重要。最近几年来国内逐渐出现不少药妆品牌，且发展迅猛，其中的高利润和我国庞大的市场容量吸引着国内外药企进入药妆市场，其中就有北京同仁堂的苦参祛痘霜，以苦参提取物作为功效性成分加入膏霜中制作成为一款专门针对痘痘的膏霜。也随着人们生活水平的提高及对事物的认知的增长，药妆已逐渐进入国人的生活及眼球，并且随着社会的发展将会成为化妆品及护肤品市场的主旋律[1]。2中药消炎膏霜的简介自然界中存在许多抗炎效果良好的中药，比如芦荟、橄榄油、紫草、马齿苋、甘草根、洋甘菊、莪术、薄荷，黄连、黄柏等等，通常采用水蒸气蒸馏、乙醇回流、超声波提取等方法提取其有效成分，制作成提取液，用以制成膏霜来治疗改善皮肤瘙痒、红肿、湿疹、尿布疹等等婴儿皮肤[2-4]的问题，以达到消炎止痛的效果。中草药的添加符合中医理论的四气五味和归经等药性理论，遵循整体观念，以局部治疗和整体调治相结合，达到内外兼治的治疗效果，具有消炎消肿修复肌肤，促进皮肤微循环，增强皮肤自我调节能力，提高其免疫力的作用，其针对性较强，能较好的达到消炎消肿镇痛的效果，并且对皮肤更加温和，刺激性小。3具有抗炎效果的中药芦荟：属百合科多年生草本植物，肉质叶，具有消炎消肿，修复肌肤的作用，根据王怡丹等人[5]指出芦荟多糖是芦荟的肉质叶中的主要成分，具有修复肌肤，抗炎消肿的作用。橄榄油：具有滋润肌肤，修复肌肤，抗炎作用。紫草：紫草是紫草科拟紫草属植物新疆紫草(软紫草)。其性甘、咸，寒，归心、肝经，具有凉血、活血、解毒透疹的功效。詹志来[6]的研究指出，其药理活性主要有抑菌、抗炎、抗病毒、保肝作用。马齿苋：马齿苋科一年生草本植物，陈国妮[7]指出，有效成分为马齿苋总黄酮。具有抗炎消肿[8]的作用，同时对金色葡萄球菌有抑制作用。甘草根：豆科植物，味甘性温，具有缓和药性，清热解毒的作用，赵雨坤[9]指出：甘草有效成分复杂，其中甘草甜素是甘草的重要有效活性成分之一，又叫甘草酸、甘草皂苷、强力宁。具有免疫调节，抗炎消肿，同时具有美白的作用[10-11]。洋甘菊[12]：为菊科母菊属的一年生或多年生草本。具有消炎、抑制真菌、解痉等作用，袁艺指出[13]洋甘菊挥发油抑制炎症反应的机制是通过抑制炎症介质生成来发挥抗炎作用。莪术：姜科植物莪术的根茎，也叫蓝心姜，黑心姜姜七。具有抗炎抗菌的作用。薄荷脑[14]：唇形科植物薄荷的主要药效成分，具有清凉止痒，解热镇痛，消炎的作用。倒地铃[15]:主要成分为倒地铃总黄酮，具有消炎消肿，镇痛的功效。4膏霜基础配方的选择根据张萌和陈士林.的《中药化妆品的研发现况与发展前景》[16]及贾艳梅的《化妆品与膏霜基础原料与配方技术》[17]“一个理想的膏霜应该由油相原料、水相原料、乳化剂组成乳化体系，加入保湿剂达到保湿作用，防腐剂达到防腐作用，再加入有效成分已达到该膏霜的作用。而膏霜最佳配方的筛选是根据膏霜的稳定性、香气、膏体外观、色泽，肤感的情况来筛选的。”故选用白凡士林，二甲基硅油，霍霍巴油，芦芭油，聚乙二醇200，十六十八醇，卡波姆940，去离子水，卡松为膏霜的基础原料，其中油相的组成为白凡士林，二甲基硅油，霍霍巴油，芦芭油，聚乙二醇200，十六十八醇，GlucateSS与GlucateSSE-20复配或span60与tween60复配；水相组成为卡波姆940和去离子水，卡松和中药有效成分作为C相。因为单一乳化剂乳化效果不如复配乳化剂，故本实验选用GlucateSS与GlucateSSE-20复配，span60与tween60复配为膏霜的乳化剂。他们均为非离子型乳化剂，乳化效果良好，能与膏霜中各种成分复合使用。5质量评价和消炎效果的评价膏霜的质量评价包括：外观检查要求产品没有油水分离现象，也无明显悬浮物或沉淀，膏体细腻洁白有色泽；气味要求应符合规定香型；耐热稳定性即在40℃下放置24h，恢复至室温后要求依然维持稳定性，不出现油水分离现象；耐寒稳定性即在－5℃下放置24h，恢复至室温后要求依然维持稳定性，不出现油水分离现象。离心稳定性即在3000R条件下离心30min观察其有无油水分离现象；pH检查为膏霜的pH为4.0～7.0。膏霜消炎效果的评价：根据王思农[18]采用鸡蛋清致炎小鼠足跖，然后涂抹膏霜并测量其不同时间足跖的肿胀度，计算肿胀抑制率来检验其抗炎效果。6刺激性的评价采用鸡胚尿囊膜实验[19]其刺激性，鸡胚绒毛尿囊膜实验是一种体外刺激性评估方法[20-21]利用孵化胚胎中期尿囊绒毛膜血管完整、清晰和透明的特点，将一定量的评估物滴加在上面，过一段时间后，观察上面的血管及其网络的形态结构，颜色及通透性的变化，结合绒毛尿囊膜蛋白质性质改变判断其受损程度，评估受试物的刺激性。根据标准可知膏霜作为一种不透明的受试物，应采用终点评价法进行评分，观察血管的出血，凝血和溶解状况。7展望中药提取物为膏霜的抗炎成分，运用了中医基本治疗理论，从局部的消炎消肿到整体皮肤的改善，通过促进皮肤微循环，使得皮肤自我修复能力增强，促进皮肤免疫调节，使得皮肤修复的同时皮肤状况得到较好的改善