槐米中芦丁提取工艺比较

槐米中芦丁提取工艺比较

0辅助治疗药:树丁芦笋，也被称为玉香核苷酸，广泛存在于植物界。这种陆生药物具有一定的生物学活性。在心血管疾病的治疗中，芦笋可以降低毛细管的渗透性和脆弱，促进细胞的增生，防止红细胞的聚集，降低血液中的脂，并成为一种额外的治疗药物。此外，这种芦丁通常被用作食品和保健品的安全无毒成分。对于未开花蕾的高粱，由于它含有大量的芦笋，它通常被用作提取芦笋的原料。现在，许多新技术已经被应用于我国作物提取的过程中。在本研究中，一些一般提取技术被用来改善槐米中芦笋提取方法。1材料和机器1.1药品、试剂与仪器实验所用的材料包括:槐米(产地河北,购于成都五块石药材批发市场),芦丁对照品(中国药品生物制品检定所,批号100080-200707),高效液相用甲醇为色谱纯(默克公司),高效液相用水为超纯水,其余试剂均为分析纯.1.2仪器、试药与仪器实验所用的仪器包括:DB-210SCB/3KW型电热鼓风干燥箱(成都天宇实验设备有限责任公司),pHs-25酸度计(成都方舟公司),UV-1800型紫外可见分光光度计(苏州莱顿科学仪器有限公司),HHS-2型恒温水浴锅(南通三思机电科技有限公司),P680型高效液相色谱仪(美国戴安公司),PDA-100型二极管阵列检测器(美国戴安公司).2实验方法2.1测定了石膏含量2.1.1流动相检测流动相为1%乙氧基实验的色谱条件为:色谱柱为迪马C18柱(4.6mm×25mm,5μm),流动相甲醇—1%乙酸(40∶60),流速1mL·min-1,检测波长257nm,柱温35℃,进样量20μL.2.1.2峰面积的测定芦丁含量测定方法为:取提取的固形物25mg,精密称定,置25mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀;精密量取1mL,置50mL量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,精密量取20μL,注入液相色谱仪,记录峰面积;另取真空干燥至恒重的芦丁对照品,同法测定,按外标法计算含量.2.2吸收度的测定总黄酮含量测定方法为:取芦丁对照品及提取固形物,分别用甲醇溶解并制成浓度为0.2mg/ml的溶液,作为对照品溶液与供试品溶液;分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各3mL,分置25mL量瓶中,加5%NaNO2溶液1mL,摇匀,放置6min,再加入10%Al(NO3)3溶液1mL,摇匀,继续静置6min,加4%的NaOH溶液5mL,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,静置15min,于506nm波长处测定吸光度,分别记为As及Ar;另在25mL量瓶中制备一不含黄酮的试剂空白,测定其在506nm波长处的吸收度,记为A0;以(Ar-A0)及(As-A0)比值计算总黄酮含量.2.3优良中良中毒提取技术2.3.1芦丁的提取方法准确称取槐米40g,加入硼砂0.6g,焦亚硫酸钠1.2g,分别采用碱提酸沉法、热水提酸沉法、热水提20%、40%及60%醇沉除杂法5种方法提取槐米中的芦丁,5种方法选择的提取溶剂见表1.加入提取溶剂后,在水浴65℃下搅拌提取55min,将槐米用纱布滤出,3000r/min离心5min,收集上清液.滤下的槐米再次按表1加入提取溶剂进行二次提取,最后合并二次滤液.2.3.2乙醇溶液的密封将滤液在80℃下浓缩至200mL,第1,2组直接加浓盐酸调节pH值至3.0,第3~5组按体积比分别加入相应体积的乙醇,各组均冷藏静置过夜.第1,2组取沉淀,在50℃下真空干燥至恒重;第3~5组首先过滤,取滤液,60℃下减压浓缩去除乙醇,并调整体积至200mL,加浓盐酸调pH值至3.0,冷藏静置过夜,第二日取沉淀真空干燥至恒重.然后,分别测定各组提取物干重、芦丁与总黄酮含量,并按以下公式计算槐米中芦丁的提取率:3结果与讨论3.1热水提20%醇沉除杂法与传统碱提酸沉法提取聚合物芦丁的比较不同提取工艺条件下槐米中的芦丁提取实验结果如表2所示.由表2可知,采用热水提20%醇沉除杂法获得的提取固形物芦丁纯度最高,达到98.75%,而传统的碱提酸沉法虽然芦丁的纯度偏低,为45.14%,但其提取率在5种工艺方法中为最高.3.2水提醇沉除杂方法的比较芦丁含酚羟基结构,在碱性条件下易降解,固本实验探讨了热水提取芦丁的可行性.结果发现:单纯采用热水提酸沉淀法,与传统碱提酸沉法比并无优势可言,芦丁提取率下降了1倍;当使用20%的乙醇除去部分杂质后,虽然提取率无明显改善,但芦丁的纯度可大幅度提高,已接近100%;在热水提醇沉除杂过程中,使用20%乙醇的效果最佳,而40%乙醇除杂法的提取率为最低,这可能是因为芦丁与杂质发生了共沉淀而被除去;当乙醇浓度升至60%时,提取率又有所回升,由此可推断更多乙醇的引入增加了芦丁在水相的溶解度,减少了共沉淀现象的发生.由于芦丁的酚羟基结构使其呈弱酸性,