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植物生理学实验

实验五丙二醛含量测定实验原理植物在衰老或逆境下遭受伤害，在活性氧积累诱发下发生膜脂过氧化作用，产生丙二醛、二烯轭合物、脂类过氧化物、乙烷等。其中丙二醛（MDA）是膜脂过氧化最重要的产物之一，通常利用它作为膜脂过氧化指标，因此可通过测定MDA了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的对逆境条件反应的强弱。实验原理丙二醛在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸（TBA）反应产生红棕色的三甲基复合物（3,5,5´-三甲基恶唑2,4-二酮），该物质的吸光系数为155mmol/(L·cm)，在532nm处有最大吸收峰，并且在600nm处有最小光吸收。硫代巴比妥酸丙二醛3,5,5´-三甲基恶唑2,4-二酮（三甲川）实验原理可溶性糖对此反应有干扰，为消除这种干扰可使用以下公式算出MDA浓度（μmol/L），并进一步算出单位质量组织中MDA含量（μmol/g）。C（μmol/L）=6.45（A532-A600）-0.56A450

A450、A532和A600分别表示在三种波长处的吸光度值实验目的；实验材料、仪器设备与试剂目的：学习和掌握丙二醛法测定植物叶片中过氧化脂质含量的原理和方法。仪器

分光光度计、离心机、电炉；研钵、天平、试管架、离心管、移液管、滤纸等。试剂5%三氯乙酸（TCA）；0.67%硫代巴比妥酸（用10%TCA配制）；石英砂。材料：白兰叶片实验步骤1.取0.5g叶片材料，加2mL5%TCA研磨后将匀浆转入离心管，再用3mL5%TCA洗涤研钵后转入离心管。将匀浆在3000r/min下离心10min。2.取上清液2mL，加0.67%TBA2mL，混合后在100℃水浴上煮沸30min，冷却后再离心一次。3.分别测定上清液在450nm，532nm和600nm处的吸光度值（以0.67%硫代巴比妥酸溶液为空白），按公式计算MDA浓度注意事项反应之后浓度改变离心时要注意配平问题如待测液浑浊，可适当增加离心力及时间作业与思考题得出实验结果后，代入公式计

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