病理生理学实验教学大纲

病理生理学教学大纲（实验部分）安徽医科大学基础医学院病理生理教研室

病理生理实验教学大纲病理生理学是一门理论学科，同时又是一门实验学科。通过临床研究特别是动物实验，使病理生理理论得到了极大的充实和发展。同时病理生理的实验教学不仅初步指导学生初步理解人类疾病动物模型复制的基本办法，锻炼了操作技能、验证和复习理论知识；还通过实验与课堂讨论的具体环节，使学生初步含有进行医学研究与临床思维所必备的“严肃的科学态度、严密的科学办法和严谨的科学作风”等。因此实验课是病理生理教学的重要构成部分。随着人类社会知识更新速度的加紧、分子生物学的发展及研究手段的进步，病理生理学在近年也有飞速的发展。为配合规范教材第五版的使用，我们根据本校的教学特点，对病理生理实验进行了部分调节。为此特修订《病理生理实验教学大纲》。使其更适合我们教学需要。概论目的与规定：掌握病理生理实验课的规定，实验报告的书写格式；熟悉病理生理实验目的；理解人类疾病动物模型复制的办法。重要内容：病理生理理论与实验课的特点，人类疾病动物模型复制的大致办法；病理生理实验课的目的和规定；病理生理实验报告的书写规范。实验一基本实验操作技能训练目的与规定：掌握小鼠的捉拿、腹腔注射技术；掌握家兔的固定，耳缘静脉注射，颈部、腹股沟手术操作规程及气管、动脉、静脉插管技术；熟悉实验室常规器件、仪器的使用，大鼠的捉拿及腹腔注射技术；理解实验动物的特点。重要内容：介绍了病理生理动物实验的重要对象——家兔、大鼠、小鼠的大致生理特点；重点进行家兔的称重、固定，术前皮肤准备，麻醉，颈部及腹股沟手术；颈部手术重要分离气管、颈外静脉、颈动脉并做对应的插管，进行呼吸描记，静脉输液及血压测量；腹股沟手术重要分离股动脉并插管以进行股动脉放血；大、小鼠的捉拿及腹腔注射等技术。实验二实验性肺水肿目的与规定：掌握用大剂量快速输液法复制实验性肺水肿的家兔模型；复习水肿理论知识，解释家兔肺水肿时症状、体征的发生机制；讨论本水肿发生的可能机制及肾上腺素的应用意义。重要内容：家兔称重、固定及颈部手术进行气管、颈外静脉插管后，由静脉大剂量（100-120ml/kg体重）快速输液（180-200滴/分钟）复制肺水肿模型；在液体输入后，由耳缘静脉注射肾上腺素（0.45mg/kg体重）;观察输液前、输液后、注射肾上腺素后，家兔的呼吸、心率、呼吸音有何变化及有无气管分泌物出现；结合理论，讨论水肿家兔呼吸、心率、呼吸音变化及气管分泌物出现的机制；肾上腺素的作用；讨论除大剂量快速输液使肺毛细血管静水压增加造成本水肿发生外，有无其它机制参加，为什么？书写实验报告。实验三缺氧目的与规定：掌握小鼠乏氧性缺氧、血液性缺氧的模型复制；根据实验，熟悉亚硝酸盐、CO中毒的临床急救原理；结合理论，讨论麻醉、年纪对缺氧耐受性的影响机制；设计简朴实验，验证环境温度对小鼠缺氧耐受性的影响。重要内容：用250ml磨口广口瓶复制低张性缺氧的小鼠模型，并介绍设立对照在医学研究中的意义；使腹腔注射适量乌拉坦的小鼠处低张性缺氧状态、新生红皮鼠与成年鼠对比以观察麻醉、年纪对缺氧耐受性的影响；用腹腔注射亚硝酸盐法复制等张性缺氧的小鼠模型，并观察中毒小鼠的体现及美兰对亚硝酸盐中毒的作用；使小鼠处在高浓度CO环境复制煤气中毒模型，观察中毒小鼠的体现及理解CO中毒的急救原则和原理；观察不同类型缺氧小鼠皮肤、内脏出现的特殊颜色；书写实验报告，涉及设计实验验证环境温度对缺氧耐受性的影响。实验四失血性休克目的与规定：掌握股动脉放血法复制失血性休克的动物模型；熟悉休克的急救方法及原理；结合理论，讨论休克家兔症状、体征的发生机制。理解休克不同时间TNF、MDF等变化及意义。重要内容：常规手术分离家兔气管、颈动脉、颈外静脉并插管，分离股动脉并插管。由股动脉导管控制性放血使家兔血压维持在40mmHg左右30分钟，观察及检测放血前后、放血不同时间家兔活动、血压、心率、四肢温度及TNF、MDF、儿茶酚胺等变化；分组采用输血、给去甲肾上腺素、654-2等不同方法对休克家兔进行急救；结合理论分析休克家兔出现多个“变化”的机制；TNF、MDF、儿茶酚胺检测试剂盒的使用。实验五喜树碱诱导K562细胞凋亡目的与规定：掌握用电泳法检测细胞凋亡；熟悉喜树碱诱导细胞凋亡的大致办法及凋亡细胞的显微镜下变化；理解细胞凋亡的其它检测手段；结合理论讨论细胞凋亡的发生机制；重要内容：用含喜树碱的培养液培养K562细胞以诱导其凋亡。镜检观察凋亡细胞和正常K562的区别；用NP40裂解细胞，结合蛋白酶K、RNASE消化细胞蛋白和RNA以提取细胞DNA；用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测凋亡、正常K562细胞的DNA，诱导凋亡细胞的DNA应出现DNALadder.结合实验，讨论细胞发生凋亡的可能机制。实验六实验性右心衰目的与规定：掌握家兔实验性右心衰模型的复制；熟悉心衰的常见症状、体征及诊疗原则；结合理论，复习心衰的发生机制及机体的代偿方法。重要内容：经颈部手术分离家兔气管、颈动脉、颈外静脉并插管后，由耳缘静脉注射液体石蜡部分阻塞肺血管以增加后负荷、经颈外静脉大剂量快速输液提高前负荷造成家兔右心急性衰竭；观察并比较注射石蜡油前后、大剂量输液后家兔呼吸、心率、心音、中心静脉压（CVP）的变化；分析以上“变化”出现的机制；观察家兔急性右心衰与否引发其发生心源性休克；解剖家兔尸体，观察右心及有无胸、腹水出现；书写实验报告。实验七病例讨论一目的与规定：掌握病例讨论时病历报告的思路和办法；熟悉肝功效不全及肝性脑病患者的临床体现；理解临床疾病诊疗及治疗的原则。重要内容：一男性患者，52岁，年轻时日饮酒半斤，十年前开始，不停出现消化道不适症状，近期加重且有血便。无血吸虫及肝炎病史。三天前因吃牛肉后出现神经系统症状入院求治；体检发现病人神智恍惚，有黄胆、肝硬化腹水及侧枝循环建立的典型体征，且实验室检察示肝功效受损，血氨升高；入院经主动治疗病情好转，但病人出现上消化道大出血，造成休克。急救休克使之好转后，又出现典型的肝性脑病；经降血氨等治疗，症状基本消失后出院；规定给病人诊疗病情、讨论其症状和体征出现的机制、临床治疗原理。并提示病人出院注意事项。实验八病例讨论二目的与规定：掌握急性肾功效不全少尿期的机能代谢变化；熟悉急性肾炎的诊疗原则及发病机制；理解急性肾炎的临床治疗。重要内容：患者因结核性胸膜炎服用异烟肼等抗结核药，服用两月后出现水肿、尿少等症状，曾在其它医院诊疗为“急性肾炎”，治疗无效后转入我院；入院体检发现明显水肿及左下肺实变，实验室检查提示符合急性肾炎、肾功效不全的诊疗；规定讨论该疾病的发病机制和水肿出现的机制。实验九病例讨论三目的与规定：理解MODS的临床病因是多个多样的；掌握SIRS/CARS特别是白