山木通化学成分的研究

山木通化学成分的研究

中药山木通科肝莲植物，又名大叶光叶莲、显山、九里花、老虎胡子、老虎毛和雪晶藤，主要分布在云南、贵州、四川、湖北、浙江等省。其性苦、温;入脾、胃、肝三经。具有祛风利湿、活血解毒作用,主要用于治疗感冒、膀胱炎、尿道炎等症。山木通的根、茎、叶均有药用记载,本植物的根,在广西、江西等地常混作威灵仙使用。目前国内外对山木通的研究较少,仅有一篇关于山木通挥发油成分的研究报道。本研究通过对山木通根及根茎的提取分离得到7种化合物,均为首次在该植物中分离得到,为进一步开发和利用山木通植物资源提供合理依据。1色谱、质谱、仪器旋转蒸发仪(IFQ85A上海机械专机厂);离心机(上海安亭科学仪器厂),AV-500型核磁共振光谱仪(瑞士Bruker公司,TMS为内标)。质谱仪为LC-MSD-Trap-SL(美国,安捷伦)。柱色谱用100-200目及200-300目硅胶(青岛海洋化工厂分厂);SephadexLH-20(Pharmacia公司产品);ODS(美国,Dikama公司);薄层色谱预制板(烟台市化学工业研究所);实验中所用的乙醇,氯仿,甲醇,石油醚,乙酸乙酯,正丁醇等试剂均为分析纯);水为乐百氏纯净水。药材于2009年8月采自江西省,经中国药科大学中药学院刘丽芳教授鉴定为毛茛科铁线莲属植物山木通(ClematisfinetianaLévl.etVant.)。2化合物和的合成取山木通药材2.4kg,粉碎后用5倍量95%乙醇、50%乙醇依次回流提取3次,每次3h,将乙醇提取液合并,浓缩得浸膏,浸膏加水溶解混悬为1L,混悬液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇(1∶1)萃取,减压回收溶剂得石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的萃取物。将石油醚部分经硅胶柱色谱(石油醚-乙酸乙酯系统100∶1、50∶1、20∶1、10∶1)得4个流份,其中100∶1流份再经反复硅胶柱色谱及SephadexLH-20(氯仿-甲醇1∶1)纯化得到化合物Ⅰ,50∶1流份经硅胶柱色谱、SephadexLH-20(氯仿-甲醇1∶1)纯化得到化合物Ⅱ、Ⅲ;20∶1流份经反复硅胶柱色谱分离及SephadexLH-20(氯仿-甲醇1∶1)纯化得到化合物Ⅳ和Ⅴ,5∶1流份经硅胶柱色谱、SephadexLH-20(氯仿-甲醇1∶1)纯化得化合物Ⅵ。将乙酸乙酯萃取部分以氯仿-甲醇系统100∶1、50∶1、30∶1、5∶1进行硅胶柱色谱分离,其中50∶1流份经反复硅胶柱色谱及重结晶得到化合物Ⅶ。3化合物iiiketolen化合物Ⅰ:白色针状结晶,mp.136～138℃。与β-谷甾醇对照品共薄层色谱,经3种溶剂系统展开,用10%硫酸-乙醇和磷钼酸显色,显色行为和Rf值均相同,故鉴定化合物Ⅰ为β-谷甾醇。化合物Ⅱ:白色蜡状固体,C22H46,mp.43-45℃。m/z310.6。1H-NMR(CDC13,500MHz)δ:1.26(20H,brs,H-2～21),0.88(6H,t,H-l,22)。13C-NMR(CDCl3,500MHz)δ:22.7-32.0(C-2～21),14.1(C-1,H-22)。以上数据经与文献对照一致,故鉴定化合物II为正二十二烷。化合物Ⅲ:白色粉末,C30H50O,mp.233-235℃,1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:0.72(3H,s,H-26),0.83(3H,s,H-25),0.93(3H,s,H-28),0.95(3H,s,H-30),1.00(3H,s,H-29),1.05(3H,s,H-27),1.18(3H,s,H-24),1.23(3H,s,H-23);13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ:14.6(C-26),17.9(C-7),18.2(C-25),18.7(C-27),20.2(C-28),22.3(C-24),28.2(C-2),30.0(C-23),30.5(C-20),30.9(C-16),31.8(C-12),32.1(C-15),32.4(C-21),32.7(C-17),35.0(C-30),35.3(C-11),35.6(C-29),36.0(C-19),37.4(C-22),38.3(C-1),39.2(C-4),39.7(C-10),41.3(C-13),41.5(C-14),42.1(C-18),42.8(C-8),53.1(C-6),58.2(C-9),59.5(C-5),213.3(C-3).以上谱图数据与已知化合物3-羰基-齐墩果烷对照基本一致,故鉴定化合物Ⅲ为3-羰基-齐墩果烷(3-ketooleanane)。化合物Ⅳ:白色固体,C16H32O2,mp.62～65℃。EI-MS:m/z256.0;1H-NMR(CDCl3,500MHz)δ:2.35(2H,t,J=7.2Hz,-CH2COOH),1.63(2H,m,-CH2CH2COOH),1.23～1.34(24H,brs,-CH2×12),0.88(3H,t,J=6.8Hz,-CH3);13C-NMR(CDCl3,500MHz)δ:179.6(s,C-1),33.5(t,C-2),31.9(t,C-3),29.8-29.1(t,C-4～15),24.7(t,C-16),22.7(t,C-17),14.1(q,C-18)。以上数据经与文献对照一致。故鉴定化合物IV为正十六烷酸(octadecanoicacid)。化合物Ⅴ:白色粉末(甲醇),C26H52O2,mp.87～88℃。EI-MS:m/z(%)396[M+,21.6],382(7.3),368(16.3),353(3.9),297(5),241(5.4)等为失-CH2的碎片离子峰。1H-NMR(CDCl3):δ0.88(3H,J=9.8Hz,-CH3),1.28(44H,m,-CH2×22),1.64(2H,m),2.35(2H,J=12.5Hz)为典型的长链脂肪酸氢谱特征;13C-NMR(CDCl3,500MHz)δ:179.46(s,C-1),33.68(d,C-2),31.93(t,C-3),29.70(t,C-4),29.44(t,C-5),29.36(t,C-6),29.24(t,C-7),29.07(t,C-8),24.72(t,C-9),22.69(t,C-10),14.09(t,C-11),与已知化合物正二十六烷酸的谱图数据对照一致,故鉴定化合物Ⅴ为正二十六烷酸(hexacosanoicacid)。化合物Ⅵ:白色针状结晶(甲醇),mp.205-212℃,EI-MS:m/z256.0;溴甲酚绿和三氯化铁-铁氰化钾反应均成阳性,示分子内含有羧基和酚羟基。EI-MS:m/z198.0。13C-NMR(CDCl3,500MHz)谱中显示有9个碳信号:δ170.68(-COOH),146.74(C-3,5),140.10(C-4),119.97(C-1),107.36(C-2,6),56.48(-OCH3×2)。结合碳谱可知1H-NMR(CD3OD,500MHz)谱中δ7.26(2H,s,H-2,6)为典型的具有对称结构的芳香质子信号,δ3.96(6H,s,-OCH3×2)为具有对称结构的芳香核上的2个甲氧基质子信号。综合分析,可推测该化合物为具有2个甲氧基、1个酚羟基,且结构对称的苯甲酸类化合物。并与文献中丁香酸的氢谱、碳谱数据对照一致,故鉴定化合物Ⅵ为丁香酸(eugenol)。化合物Ⅶ:无色片状晶体,C5H8O4,EI-MS:m/z132.0。13C-NMR(CDCl3,500MHz)谱中显示有6个碳信号:δ210.9(C-4),176.2(C-1),33.8(C-3),68.7(C-5),28.4(C-2);结合碳谱可知1H-NMR(500MHz,CD3OD)谱中δ4.24(2H,s,H-5),2.72(2H,t,J=6.5Hz,H-3),2.61(2H,m,J=6.5Hz,H-2)。以上数据与已知化合物5-羟基-4-氧代戊酸的谱图对照一致,故鉴定化合物Ⅶ为5-羟基-4-氧代戊酸(5-hydroxy-4-oxopentanoicacid)。4山木通的化学、药用价值(1)山木通(ClematisfinetianaLévl.etVant.)为毛茛科铁线莲属植物,主要分布于云南、贵州、四川、湖北、浙江等省,其中在江西、四川等地多作威灵仙药材使用;而在有些地区则常做川木通入药,因此研究山木通所含化学