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文档简介

某些因素对家兔尿液生成的影响一、实验目的1.掌握膀胱插管技术,神经分离技术,学习尿量的记录和测量方法。2.观察神经体液因素(生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素、呋塞米、垂体后叶素)和电刺激对尿生成的影响,并分析其作用机制。二、实验材料家兔一只,氨基甲酸乙酯,生理盐水,葡萄糖溶液,去甲肾上腺素,呋塞米,垂体后叶素,手术器械一套,兔手术台,膀胱插管,注射器两支,针头两个,微机生物信号采集处理系统,电刺激连线,棉线若干,婴儿秤,培养皿。三、实验方法1.兔子称重,根据1mg/kg从兔耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯麻醉。2.待兔麻醉后,将其仰卧在兔手术台上,先后固定四肢及兔头。3.剪去家兔颈前部兔毛,正中剪开皮肤5~6厘米,用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉,暴露气管及与气管平行的右血管神经鞘,用玻璃分针细心分离出右侧鞘膜内的迷走神经,在神经下穿线备用。4.从耻骨联合向上沿中线作长约4厘米的切口,沿腹白线打开腹腔,找到膀胱,用镊子小心将膀胱轻拉至腹壁外。辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位,用三把止血钳提起膀胱前壁,选择血管较少处,剪一纵行小口,插入膀胱插管后用线固定,尿液从膀胱插管中流出。用线结扎膀胱颈部以阻断膀胱同尿道的通路。使插管的引流管出口处低于膀胱水平,用培养皿盛接由引流管流出的尿液。手术完毕后,用纱布拭去腹部内的血,并用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口,用止血钳关闭腹腔。5.开启微机生物信号采集处理系统,与上一次实验相同。6.(1)在注射药物之前记录1min正常排尿量。快速注射37℃生理盐水20ml,记录5min内每分钟的排尿量。(2)间隔2~3min,记录1min正常排尿量。快速静脉注射20%葡萄糖5ml,记录5min内每分钟的排尿量。(3)间隔2~3min,记录1min正常排尿量。静脉注射1:10000去甲肾上腺素0.3ml,记录5min内每分钟的排尿量。(4)间隔2~3min,记录1min正常排尿量。电刺激右侧迷走神经。用保护电极以中等强度和频率的连续脉冲(定时刺激,持续时间20s,波宽5ms,强度2.0V,频率25Hz)刺激迷走神经,记录5min内每分钟的排尿量。(5)间隔2~3min,记录1min正常排尿量。静脉注射呋塞米10mg,记录5min内每分钟的排尿量。(6)间隔2~3min,记录1min正常排尿量。缓慢静脉注射垂体后叶素2单位即0.3ml,记录5min内每分钟的排尿量。实验结果:1、本组实验结果:实验项目对照(实验前)实验组1min2min3min4min5min生理盐水20ml01136420%葡萄糖5ml132212去甲肾上腺素0.3ml212122电刺激右侧迷走神经111112呋塞米5mg/kg1514263629垂体后叶素0.3ml222970012、班级实验结果:组别对照(给药前)第一分钟第二分钟第三分钟第四分钟第五分钟生理盐水20ml0.670.4132.762.331.032.171.17

2.171.9421.26P值0.090.009**0.024*0.120.05*20%葡萄糖5ml0.90.495.80.378.26.197.23.205.63.275.82.25P值0.02*0.005**0.02*0.004**去甲肾上腺素0.3ml2.51.0520.8921.412.51.393.332.162.832.48P值0.04*0.02*0.005**0.02*0.004**刺激迷走神经1.750.842.250.7521.1043.83

9.513.3210.2513.97P值0.180.400.300.370.34呋塞米5mg/kg6.8314.2922.6724.4722.6714.3323.510.4224.839.5823.337.15P值0.210.08 0.05*0.03**0.04*垂体后叶素18.758.488.0411.453.027.691.219.270.016.960.217.42P值0.220.02*0.02*0.006**0.009**备注:P**<0.01,有明显差异;P*<0.05,有差异;P>0.05,无统计学意义。五、小组讨论1.生理盐水中的Na、Cl离子被肾小管和集合管完全重吸收了,同时有一些水分也被重吸收,所以尿液生成量增大,但增大幅度不是太大。2.注射的葡萄糖溶液直接进入血液循环,增大了肾血管的血流量,而肾小管和集合管在机体不缺水时又只重吸收葡萄糖,所以葡萄糖溶液的水分全部渗过肾小管,形成尿液。3.去甲肾上腺素可使入球小动脉和出球小动脉收缩,但前者收缩比后者更明显,使肾小球毛细血管血浆流量减少,肾小球毛细血管血压下降,肾小球的有效滤过压下降,尿生成减少。4.迷走神经兴奋可对心脏产生负性变时、变力和变传导作用,同时也可使部分受副交感支配的外周血管舒张,从而导致动脉血压降低。动脉血压降低至超过肾血流的自身调节能力时,可使肾小球毛细血管压降低,有效滤过率降低,尿生成减少。5.速尿可与髓袢升支粗段的Na+-K+-2Cl-共同转运系统可逆性结合,抑制其转运能力,使NaCl重吸收减少,降低了肾脏的稀释功能,同时使髓质间隙渗透压降低,也降低了肾脏的浓缩功能,从而产生迅速而强大的利尿作用,排出大量等渗尿。6.垂体后叶素包括催产素和ADH,ADH可与远曲小管和集合管上皮细胞管周膜上的V2受体结合,通过兴奋性G蛋白激活腺苷酸环化酶,使胞内cAMP生成增多,最终增加管腔膜上的水通道,从而提高远曲小管和集合管上皮对水的通透性,增加水的重吸收而使尿量减少。六、实验结论由我组实验数据看出,静脉注射生理盐水可使尿量增多。静脉注射葡萄糖、去甲肾上腺素和间断电刺激右迷走神经后,尿量无明显变化。静脉注射呋塞米可使尿量逐渐增加。静脉注射垂体后叶素可使尿量显著减少。由班级实验数据可以看出

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