HIV快诊检测点作业指导书

凉山彝族自治州HIV快诊检测点实验室作业指导书凉山州人民政府防治艾滋病工作委员会办公室凉山州疾病防止控制中中国-默沙东艾滋病合作项目凉山办公室二0一一年七月凉山州HIV快速检测点实验室作业指导书目录前言………………（1）凉山州艾滋病快速检测样本的接受、登记与运输……………（2）凉山州艾滋病快诊检测点检测环节及规定……（3）凉山州HIV抗体快速检测流程图………………（6）凉山州HIV抗体快速检测质量控制……………（7）凉山州HIV抗体快速检测实验室消毒与污物解决……………（9）凉山州HIV抗体快速检测实验室生物安全及职业暴露………（10）凉山州HIV抗体快速检测实验统计及成果上报………………（13）凉山州HIV快诊检测实验室管理制度…………（14）凉山州HIV抗体快速检测保密程序……………（15）凉山州艾滋病检测点资格审批申请表…………（16）凉山州医疗卫生机构HIV常规检测记录表……（19）凉山州HIV快速实验原始统计表………………（20）凉山州HIV抗体筛查报告单……………………（21）凉山州艾滋病检测点HIV抗体复检检测单……（22）凉山州艾滋病检测各类试剂入库、领取使用记录表…………（23）凉山州艾滋病检测实验室仪器使用温度统计…………………（24）凉山州艾滋病检测实验室废弃物及生物垃圾解决统计表……（25）四川省艾滋病检测点审评验收状况一览表……（26）凉山州HIV抗体检测月报表……………………（27）凉山州HIV抗体检测季度报表…………………（28）前言为认真贯彻贯彻温家宝总理考察凉山州艾滋病防治工作的重要批示精神，实现国家艾滋病防治工作目的，加大艾滋病检测力度，加强对基层工作人员的技术指导，进一步规范HIV快速检测工作，提高防治工作的质量，我办委托州疾控中心，在国家艾滋病防治技术指南和规范的基础上，结合我州实际状况，制订了《凉山彝族自治州HIV快速检测点实验室作业指导书》（试行）（下列简称《指导书》）。《指导书》内容涉及“样本的接受、登记和解决”、“HIV抗体快速检测流程图”“HIV抗体快速检测质量控制”、“实验室消毒与污物解决”、“实验室生物安全及职业暴露”、“检测实验统计及成果上报”“保密程序”、“统计表格”等。为提高《指导书》科学性、权威性和可操作性，特邀请国家和省级专家共同参加了《指导书》的制订工作。在此，我办对予以指导和支持的全部单位和机构，以及为《指导书》做出奉献的有关领导和专家表达衷心的感谢。由于时间和水平等诸多因素和限制，本书难免存在疏漏、不当之处，请各使用单位和检测人员提出修改意见，我为将对《指导书》进行修订和完善。凉山州人民政府防治艾滋病工作委员会办公室8月凉山州艾滋病快速检测样本的接受、登记与运输一、标本的接受登记：对受检人群的全部信息（检测日期、编号、姓名、性别、年纪、民族、婚姻、文化、身份证号码、户籍所在地、样本类型）具体登记在艾滋病咨询检测记录表和快诊原始统计表中。二、标本的采集：采集样品应按临床采血技术规范采集指尖血或静脉血，采集标本时应注意生物安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液时操作应戴手套，避撤职业暴露。三、标本运输：阳性标本在送往县疾控进行复检时，严格按照“生物安全运输管理条例”包装。事先检查样品管有无破损和溢漏，如发现溢漏应立刻将样品移出，对样品管和盛器消毒。同时与“艾滋病检测点HIV抗体复检检查单”一并送往县疾控，双方签字验收。对所采集的血样不能及时送往县疾控中心，可短期内将样品寄存2～8℃冰箱。凉山州艾滋病快诊检测点检测环节及规定一、工作环节【环节一】对受检人群的全部信息（检测日期、编号、姓名、性别、年纪、民族、婚姻、文化、身份证号、户籍所在地、样本类型）具体登记在艾滋病咨询检测记录表和快诊原始统计表中。见附表1。【环节二】按临床采血技术规范采集指尖血或静脉血，无菌条件下采集指尖血或（静脉血3～5ml）室温静置，让血浆自然分离。（做HIV快诊等实验用）。【环节三】按照试剂盒阐明书规定，从包装盒中取出测试卡，平衡至室温并编号，精确加入血浆（或全血、稀释液）样品于测试卡的架处。30分钟内观察成果，成果鉴定见图。对照区（C）线SCTCTCTCTCT对照区（C）线SCTCTCTCTCT检测区（T检测区（T）线加样孔（S加样孔（S）线SSSSSSSS阳性阳性阴性无效无效阳性阳性阴性无效无效快诊试剂保存条件：能够保存2～30℃,有稀释液和快速试剂,建议保存在2～8℃冰箱.试剂出入库一定要有统计,涉及试剂厂家名称、规格、试剂效期、批号、接受人、使用人签名、使用日期等。见附表2。每天统计寄存试剂冰箱温度、实验温度、环境温湿度。【环节四】加入样品后，普通在15～30分钟内观察成果（根据各试剂厂家的规定）不得超出30分钟，否则无效。在质控区和反映区均出现红线，成果评定为阳性。只在质控区出现红线，反映区不出现红线，成果阴性。不出现质控带，实验无效，（实验温度保持在20～25℃）。【环节五】阳性成果做好统计，并认真填写二表二卡，同时将血浆样本一同送往县疾控中心做复检实验。初筛实验按《全国艾滋病检测规范技术》。【环节六】待确证成果返回后，一并装入个人随访档案袋中。二、筛查点实验室生物安全规定：全部使用过的采血针头、真空采血器、测试卡、一次性手套、一次性工作服必须通过严格消毒或高压消毒，焚烧解决。严禁在实验室内进食、喝水、吸烟、化妆等违反生物安全规定的行为。三、艾滋病检测实验室惯用的消毒办法：（一）物理消毒办法：1、高压蒸汽消毒，121℃，消毒15～20分钟。2、干烤消毒，140℃，消毒2～3小时。3、定点集中式焚烧，要有专人看守。（二）化学消毒办法：1、含氯消毒剂，有效含氯量～5000mg/L。2、使用75%乙醇消毒仪器表面20～30分钟。3、使用2%的戊二醛消毒仪器表面20～30分钟。四、艾滋病筛查点实验室房屋规定：（一）房屋面积：规定在16～20平方米独立的实验用房，决不允许和疫苗防止注射、配制输液液体，注射液体等无关联的工作混合使用。（二）房间内摆放一张清洁的桌子，专门用于登记统计，另外一张桌子用于采血和做快诊实验专用。摆放一种文献柜，寄存文献档案。一台消毒高压锅（有条件的单位），一种带盖的消毒桶，内装含氯量在～5000mg/L的消毒液，专门用于装被污染过的或使用过的实验耗材。另外在放置一种垃圾桶，放置无污染性垃圾。凉山州HIV抗体快速检测流程图样品样品快诊实验快诊实验阳性反映阴性反映阳性反映阴性反映将样本送筛查实验室将样本送筛查实验室复检实验复检实验均阳性反映均阴性反映一阴一阳均阳性反映均阴性反映一阴一阳送确证明验室做确证明验报告阴性送确证明验室做确证明验报告阴性凉山州HIV抗体快速检测质量控制一、目的监控每次检测的重复性和稳定性以及检查试剂盒批间差别、批间操作的重复性，验证检测成果。二、合用范畴合用于HIV-1/2抗体定性快速检测。三、作业程序（一）检测前质控：1、样品规定唯一编号，实验前认真核对，检查。2、检测人员每日检查室内温度，实验环境温湿度应在试剂盒阐明书的范畴内，试剂和样品应按规定寄存，并做好统计。3、检查与否有足够的试剂库存量，确证试剂是在使用期范畴内，严禁使用过期试剂。4、每批实验如果应用不同批号的试剂，应做好统计。（二）检测过程质控：1、准备好实验区域，摆放好必要器具。2、具体统计样品编号、姓名、地址、试剂名称及批号，操作者、复检者签名。3、核对样品编号、标记、检测、避免错号。4、实验前认真阅读试剂盒阐明书，严格按照阐明书操作。5、需要在冰箱保存的试剂，先从冰箱内取出，放置室温，平衡后在使用。剩余的试剂条应立刻放入自封袋中密封2～8℃保存，能够寄存在室温的试剂，要尽量避免高温。6、建议每一次最多做10份样品，确保试剂条和编号与标本编号精确对应，避免错号和交叉污染。7、成果鉴定时，质控带必须出现实验条带才干成立。如实验完毕后未出现质控条带，本次实验成果无效，实验需重做。8、外部质控，由国家或省疾控中心提供，或试剂厂家购置。规定在更换不同试剂批号时，更换不同厂家时，更更换不同检测人员时做外部质控。（三）检测后质控：1、实验成果进行判读时，应确保判读地点光线充足。对于难以判读的条带，最佳有2人判读。2、复核样品编号并填写实验成果。3、向实验室负责人报告检测成果。4、检查试剂库存量，根据实际需要，提前向上级实验室申请补充。5、在收到或检测时，发现试剂出现外包装盒或内容物已损伤，标签出现错误、缺失或笔迹含糊（特别是产品厂家名称、批号、生产日期或失效期），应具体统计。凉山州HIV抗体快速检测实验室消毒与污物解决按照“生物安全管理条例”对污染物品、进行有效消毒解决。一、血液标本应置于运输箱内，按照三层包装后运输，切勿污染盛器外部。如果盛器被污染，要用消毒液消毒。送检单位外面套清洁的塑料袋封口一并运输。二、多种化学消毒剂均应贴有标签，放置于适宜和位置，实验台上不放置不必要的物品。实验室环境一旦污染，限在污染区外周边倒入消毒液，逐步向中心消毒解决。并做好统计。三、实验室全部生物垃圾，涉及用过的一次性手套和工作衣，置于黄色污物袋内，经焚烧或有效消毒解决后定点深埋。污染的非一次性工作衣应先消毒后洗涤。四、全部锋利品、血样管和血液标本放置于不适宜刺破的容器内（锐器盒，带盖塑料桶），限制在实验室内消毒后在指定地点焚烧解决。五、惯用的消毒剂和消毒办法与病毒性肝炎消毒法相似。（一）锐器盒或塑料消毒桶：5000mg/L次氯酸钠。（二）生物安全柜、工作台面和仪器表面：使用75%乙醇。（三）溢出物：5000mg/L次氯酸钠。凉山州HIV抗体快速检测实验室生物安全及职业暴露一、建立安全制度（一）成立生物安全领导小组，随时自查和督导生物安全隐患。（二）实验室的设备、建筑和设施的安全必应通过专家的评审。（三）建立安全原则操作程序，该程序应合用于现有的实验条件，并与实验室其它规章制度一致。（四）无论与否发生意外事故，每年都要对安全原则操作程序及其实施状况进行检查。（五）制订意外事故解决预案，建立意外事故的登记和报告制度。出现职业暴露意外事故应及时解决，同时报告主管领导。二、人员管理和培训（一）人员管理1、新调入人员、外来合作、进修学习的人员在进入实验室前，须通过实验室主任同意。非实验室人员和非实验室物品不得进入实验室。2、实验室工作人员每年采血检测HIV、HBV、HCV、PT抗体检测，建立个人健康档案制度，血清样本应长久保存。（二）培训1、全部工作人员必须通过HIV检测技术和实验室安全培训，涉及上岗培训和复训，并接受管理人员的监督。实验室的安全负责人要对工作和环境的安全负责，全部工作人员都有责任保护自己和别人的安全。2、必须告知新上岗人员实验室工作的潜在危险，进行安全教育，直至有能力后方可单独工作。三、安全保障方法（一）个人保健和防护1、高原则的个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险。手部皮肤有开放性伤口及其它不适于工作的状况，应暂停工作。2、进实验室前要摘除首饰，修剪长的带刺的指甲，以免刺破手套。3、进入实验室应穿隔离衣、戴手套。如手套破损，立刻丢弃，洗手后换上新手套。4、离开实验室前必须脱去隔离衣、手套并洗手。5、严禁在艾滋病检测实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。（二）带入和带出实验室的物品1、对全部带入实验室的样品都应进行检查，装有测试样品的包装箱（袋）应在安全柜或其它适宜的装置内打开。2、将HIV测试样品转送到上级实验室复检时，应按照生物安全三层包装，避免对人员和环境的污染。运输样品的人应明确接受地点为和接受人，在样品接受单上双方签名，确认样品无外溢，无不合格现象。3、污染或可能造成污染的材料在带出实验室前应进行严格消毒。（三）减少利器的使用1、实验室最佳不使用玻璃器皿，应作用塑料器皿。2、尽量使用安针具采血，如蝶形真空针，自毁性针具等，以减少直接接触血液的刺伤的危险性。应将用过的针头直接放入锐器盒内，消毒解决。四、意外事故解决（一）紧急解决方法1、皮肤针刺伤或切割伤：立刻用肥皂洗和大量流水冲洗，尽量挤出损伤处的血液，用70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。2、皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适宜的消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。3、粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。4、衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒解决。5、污染物泼溅：无论发生大、小范畴污染物泼溅事故时，应立刻进行消毒解决。（二）事故登记1、统计事故发生的时间、地址及具体通过。2、统计暴露方式，受伤部位、伤口深浅、暴露程度。3、解决办法：经专家评定暴露级别和与否采用暴露后药品防止，如果是，应具体统计用药状况。4、随访检测日期：0、1、3、6、12，统计每次检测成果。（三）发生上述事件后，遵照三条原则，及时解决原则，报告原则，保密原则。凉山州HIV抗体快速检测实验统计及成果上报一、目的由于快速检测成果难以进行电子化统计，检测条无法作为原始统计长久保存，因此现场检测数据的统计和管理就变得十分重要。真实和精确的原始统计是审核检测成果报告的唯一基础性数据，统计信息不全或错误，将造成感染者无法追踪和管理。二、内容快速检测统计本用于登记日常快速检测成果，涉及的基本内容有：检测日期、检测序号、受检者姓名、年纪、性别、民族、文化、婚姻、人群来源、户籍所在地和单位住址，身份证号码或新农合号。三、规定（一）对于阳性样本，除了要统计具体地址、身份证号码或新农合号外，还规定填写二表二卡（传染病报告卡、艾滋病性病附卡、个案随访表、艾滋病感染者/病人及家眷状况记录表），用指尖血检测的的要重新采集静脉血（3～5ml），分离血浆，按规范包装好和送检单一同送往本地县疾控中心复检。（二）检测点每月将成果统计一报到县疾控中心，县疾控中心再把辖区内各个检测点数据收集汇总后，上报到凉山州疾控中心艾滋病确证明验室，凉山州疾控中心艾滋病确证明验室将全州的数据汇总后，上报省疾控中心。（详见：凉山州医疗卫生机构HIV常规检测记录表及检查原始统计）凉山州HIV快诊检测实验室管理制度一、进入本实验室的人员必须是通过上岗培训合格的人员。外来人员需经领导同意后，方可进入。二、本实验室为专用实验室，不能和其它科室共用。实验室分为清洁区和污染区，必须严格恪守生物安全管理条例。三、进入实验室前要换上一次性鞋套，口罩、工作帽，穿上本实验室专用的工作服，戴上一次性乳胶手套方可进行实验操作。四、实验结束后，要对工作台面消毒，工作台面应当用含氯消毒剂（～5000mg/L）或75%的乙醇进行消毒。五、离开实验室之前应脱去工作服、手套，严禁将实验室工作服穿出，按照原则程序彻底洗净双手。六、实验室不能放置任何玻璃器皿。清洁区桌子只能放置检测登记本和原始统计表格，实验用桌子用于采血和做快诊检测。七、遇见意外事故，应立刻解决并分别以口头和书面报告上级部门。八、每天实验前统计冰箱、孵箱温度，登记在维护统计本上。九、注意门窗、水电安全防护。十、保持实验室清洁，每天清扫地面，桌面。全部废弃物品须消毒后焚烧解决。十一、严格按照《全国艾滋病检测技术规范》（）进行操作，对全部检测成果遵行保密制度。凉山州HIV抗体快速检测保密程序一、HIV抗体检测实验室要有专人负责妥善保存多种实验统计、感染者档案，不得私自修改和销毁；严格恪守保密制度，未经省级卫生行政部门许可，不得向无关人员或单位提供任何状况。二、HIV抗体快诊检测实验室检测的阳性成果不是最后成果，应及时作进一步复检、确认。快诊检测实验室不能出具HIV抗体阳性的成果报告，不能告知无关联人员。三、HIV抗体确认实验室确认的阳性成果，以注意保密形势向送检单位出具阳性报告，送检单位接到阳性报告后，应报告本地疾控和卫生行政部门，在对阳性者告知检测成果时要先杉好法律、医学、生活等方面的咨询。四、经确认的阳性标本，应寄存在实验室走低温冰箱保存，冰箱规定上锁（双人双锁保管），不得私自解决。标本保存时间根据卫生行政部门规定。五、电脑保存的全部HIV资料应加密保存。凉山州艾滋病检测点资格审批申请表申请单位：地址：邮编：电话：联系人：E—mail：年月日填一、艾滋病检测点人员名单及基本状况：姓名性别年纪技术职称何时何时获得检测点上岗证备注二、实验室仪器、设备状况：仪器设备名称厂家型号购置时间运转状况核算者注：1.仪器、设备表格不够可另附页2.运转状况可按运转正常、需小修、需大修三档填写三、申请理由：单位（盖章）年月日四、县（区、市）卫生行政主管部门意见：单位（盖章）年月日五、市（州）级专家组验收意见：组长（签字）专家（签字）年月日六、卫生行政（或主管）部门审评成果：单位（签字）年月日凉山州医疗卫生机构HIV常规检测记录表略凉山州HIV抗体筛查报告单HIV抗体筛查报告REPORTOFHIVANTBODYSCEENINGTESTING秘密SECRET编号NO：送检单位FROM送检日期DATE送检标本SPECIMEN送检人群POPULATION姓名NAME性别SEX年纪AGE职业OCCUPATION国籍或民族NATIONALITY地址ADDRESS检测办法METHOD检测日期DATE检测成果RESULTS快速检测结论CONCLUSION检测者OPERATOR签发者HEAD报告日期DATE筛查单位或实验室（公章）INSTITUTIONORLABORATORY备注NOTE本报告仅对送检样品负责县HIV抗体筛查快诊实验原始统计实验批次：样品来源收样日期检测日期样品名称样品性状样品数量试剂名称试剂批号试剂效期室内温度检查原则《全国艾滋病检测技术规范》实验流程：取出检测卡放至室温，取样品于加样处，分钟内读取成果。在试剂盒规定成果读取时间内检测卡反映以下图：12121212TCCTTC对照区（C）线TCTCTCCTTC对照区（C）线TCTC检测区（T）线检测区（T）线加样孔（S）加样孔（S）图A（阳性）图B（阴性）图C（无效）实验编号成果描述成果判断实验编号成果描述成果判断检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符检测卡反映与图相符备注:检测人：复核人：凉山州艾滋病检测点HIV抗体复检送检单秘密编号送检单位送检日期送检标本送检人群姓名年纪性别职业国籍民族婚姻状况文化程度身份证号联系电话现住址户籍地址检测办法检测日期试剂厂家批号使用期成果检测者审核者送检单位（公章）电话邮编备注本报告