渗透树脂和粘接剂在早期洪泽县书中的渗透能力比较

渗透树脂和粘接剂在早期洪泽县书中的渗透能力比较

早期苯基钻的临床症状是白色亚甲基。其典型的病理破坏是，陶瓷表面相对完整，表面层下的矿质明显脱矿。目前,临床上对于这类病损的治疗方案是利用氟化物促进再矿化、口腔卫生宣教和合理的饮食控制等。但是,对于依从性较差的患者,在龋病进展期及邻面的病损,治疗效果不佳。早期釉质龋存在着釉质结构的破坏,其微观结构是多孔的,从表到内有许多微小通道,它有利于有机酸的扩散和矿物质的进出。龋损渗透技术就是利用低黏度的渗透树脂进入这些微孔,堵塞、封闭这些通道,阻止龋损的进展。渗透树脂是一种新型的材料,可永久性地堵塞早期龋表层的微孔。有报道粘接剂也可部分渗入人工龋损中,减少进一步脱矿。但是对于自然形成的龋损,渗透树脂和粘接剂进入龋损的能力有无差异,哪种材料的渗透力更强,目前未见相关报道。本研究利用激光扫描共聚焦显微镜(confocallaserscanningmicroscopy,CLSM)在双荧光模式下进行观察,比较渗透树脂和粘接剂进入恒牙邻面自然形成的早期龋损的能力,以期指导临床操作。1材料和方法1.1染料、荧光素钠染料、实时荧光定量染料Icon渗透树脂:包括酸蚀剂Icon-Etch和渗透剂Icon-Infiltrant(DMG公司,德国),树脂粘接剂AdperSinglebond2(3M公司,美国),罗丹明B染料、荧光素钠染料(Sigma公司,美国),体视显微镜、CLSM(Olympus公司,日本)。1.2非洞早期社会诊断和评估系统第二系统中第三支规定取新鲜拔除的恒磨牙和前磨牙36颗,邻面显示有白垩色斑的非洞早期龋,标准符合国际龋病检测和评估系统第二类。体视显微镜20倍下进行观察,排除有洞的和被损坏的标本。仔细清理软组织,牙齿保存在0.1%的麝香草酚溶液中备用。1.3渗透树脂和粘接剂为复合酸蚀面的试验样本在釉牙骨质界处去除牙根,垂直于龋损表面将牙齿一切为二,提供两半病损。随后,在20倍体视显微镜下观察牙切面,并进行病损的组织学分级,具体如下。C1:龋损位于釉质的外1/2;C2:龋损延伸至釉质的内1/2;C3:龋损延伸至牙本质的外1/2;C4:龋损延伸至牙本质的内1/2。C4被排除实验;相应的两半龋损要显示相同的组织学分级水平(C1~C3),如果两半龋损的分级不同,则排除。两半龋损分别用渗透树脂和粘接剂进行如下处理。用耐酸指甲油涂布牙切面后,使用15%的盐酸凝胶(Icon-Etch)酸蚀两半病损表面2min,用水枪彻底冲洗30s,无油压缩空气吹干。将标本放入0.1%的罗丹明B乙醇溶液里染色12h,让红色荧光染料充分标记龋损的微孔。用压缩空气吹干样本牙10s,把渗透树脂(IconInfiltrant)和粘接剂分别涂抹到相应的两半病损面,静置5min,用棉卷擦掉多余的材料后,光固化60s。把试件放入30%的过氧化氢溶液中,静置于37℃恒温箱12h,将未被渗透树脂或粘接剂封闭的罗丹明B染料漂白,随后用水枪冲洗样本60s。去除吸附在样本切面上的指甲油,将样本牙用慢速砂片平行于牙切面切成约3mm的试件,用不同表面粒度的砂纸由粗到细依次打磨、抛光,直至试件透光。为了标记没有被树脂渗透的病损的微孔结构,将样本置于含有100μmol·L-1荧光素钠的50%乙醇溶液中浸泡3min,用去离子水冲洗10s。随即进行CLSM观察。1.4图像病损深度及渗透深度图像ld图像罗丹明B激发波长为568nm,发射波长为590nm;荧光素钠激发波长为488nm,发射波长为525nm。在6个CLSM图像指定点上测量病损深度(LD)和渗透深度(PD)(根据病损的大小,用100μm的格子做标识)。PD和LD为从样本表面分别到红色和绿色荧光最深点的距离,并计算渗透百分数(PP),公式为:PP=PD/LD×100。1.5本秩和检验kruskalperfirs采用SPSS13.0统计学软件对数据进行分析。正态性检验,数据非正态,故采用中位数(四分位数间距)表示。渗透树脂和粘接剂在LD、PD及PP的不同,使用配对符号秩和检验(Wilcoxonsignedranktest)进行分析。在不同的组织学病损分级(C1~C3)中,PD和PP的比较采用多样本秩和检验(Kruskal-WallisHtest)。检验水准为0.05。2结果2.1两种材料的clsd观察树脂渗入的部位显示为红色,而病损剩余的微孔被荧光素钠染成绿色。没有微孔的健康釉质或表层呈现黑色,牙本质呈现绿色(图1)。2.2渗透剂对pd、pp间关系的影响在相同的病损组织学分级中渗透树脂组和粘接剂组间LD的差异无统计学意义(P>0.05);PD、PP间差异有统计学意义(P<0.01),渗透树脂组明显高于粘接剂组(表1)。在不同的组织学分级中,渗透树脂组PD间的差异有统计学意义(P<0.01),即随着病损分级增加,PD增大;但是PP间的差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。3讨论3.1渗透树脂治疗树脂渗透技术是一种阻止龋病发展的新技术,它用微创的方法治疗早期龋,避免了因手术治疗造成龋损周围健康硬组织不必要的损失。早期龋形成时,相对完整的牙齿表层存在着釉质结构的破坏,其微观结构为许多微小孔隙。这种晶体间的小孔隙对有机酸的扩散、矿物质的进出提供了通道。龋损渗透的目的就是利用低黏度的光固化树脂,通过毛细作用力渗入到病损微孔内,堵塞和充填微孔,替代因脱矿丢失的硬组织,在龋损内形成屏障,阻止釉质表面崩解。树脂渗透技术产生的屏障在病损内部,而传统的窝沟封闭产生的屏障在釉质表面。早期龋相对完整的釉质表层由于矿物质的沉积,比表层下病损的微孔孔隙更小,这种屏障阻止了树脂的有效渗入。利用酸蚀技术在表层上打孔,甚至完全去除表层,充分暴露病损部,旨在使树脂尽可能多地渗入病损微孔中。实验证明:在自然龋损中利用15%的盐酸酸蚀2min,可以基本去除釉质表层,使得树脂渗透深度更深。有研究表明:粘接剂和窝洞封闭剂能够渗入到相对表浅的人工龋损中,堵塞孔隙,阻止龋病的进展。而对于较深的自然龋损只能渗入表层,不能有效阻止龋病的进展。这是因为人工龋和自然龋的结构有着本质不同,自然龋损的表层更厚、矿化程度更高。本实验在同一病损组织学分级中显示:渗透树脂的渗透能力明显高于粘接剂,且随着病损深度增加,渗透树脂的渗透深度也在增加。这与MeyerLueckel等的实验结果是一致的。本实验还发现:随着病损深度的增加,粘接剂的渗透深度也略有增加,这与Meyer-Lueckel等的实验结果即粘接剂只能到达自然龋损的表层有所不同,这可能与粘接剂不同有关。有实验将6种粘接剂用于人工龋的渗透,发现用乙醇做溶剂的粘接剂渗透能力强,而用丙酮做溶剂的渗透能力差。本实验使用的粘接剂是3M公司的AdperSinglebond2,是以乙醇和水做溶剂的。另有研究表明:将渗透树脂渗入到早期龋损后,再将其置入高致龋环境中,渗透树脂能够有效地阻止龋损脱矿。本实验也发现渗透树脂有时只是部分渗入病损部,在病损的深部仍存在一些微孔,病损是否进一步发展尚不明确,尚待进一步研究。渗透树脂治疗存在诸多优点:它能永久性地堵塞早期龋表层的微孔和龋洞,有效阻止龋病的进展,降低再患龋的风险,推迟修复性治疗的时间;没有术后敏感和牙髓炎的患病风险;可有效降低牙龈炎和牙周炎的发生;增强唇面脱矿病损(如正畸后的白垩斑块)的美观度;治疗简便、不需麻醉和机械磨除,患者易于接受。3.2荧光素衍生物在clsm中的释放和发射CLSM已被广泛应用于龋病学、口腔微生物学等研究中。因不同荧光染料(罗丹明和荧光素的衍生物)有不同的激发和发射波长,在CLSM下呈现不同色调的荧光。本实验在CLSM的双荧光模式下,观察早期龋损的多孔结构和树脂的渗透深度,渗透树脂被罗丹明B染成红色,而剩余的孔隙被荧光素钠标记为绿色。3.3间染色法与直接染色的比较有研究表明:在人工龋损和自然龋损中,用荧光染料直接标记树脂存在一定的局限性。直接染色技术是将染料溶于树脂中,由于缺少化学结合基团,不能产生牢固的化学结合,易造成树脂基质浸出,导致对树脂渗透能力过高的评估。但是,Pari等应用CLSM在双荧光模式下对直接染色和间接染色技术进行比较,却发现直接染色技