复方地塞米松软膏的含量测定及临床应用

复方地塞米松软膏的含量测定及临床应用

虚拟阴性病变是指女性皮肤和粘膜组织发生变形和色素变化的慢性疾病。国际阴性疾病研究协会（cmd）称之为慢性阴性营养不良（chromadystonphy）。以往多采用外阴单纯切除术,以缓解症状和防止癌变,但手术后易复发。目前大都主张采用非手术疗法,曾使用外用制剂治疗该病并不理想。根据白色病变病理,经查阅、参考有关资料,与有关科室合作,我们制备出一种复方地塞米松软膏。经临床应用,对改善局部病变、防止其发生癌变有较好的效果,并能控制外阴瘙痒,临床疗效较明显。现介绍如下。1联合用药松补助的开发1.1己烯成虫醋酸地塞米松(浙江嘉兴南湖制药有限公司,批号04102500)、己烯雌酚(上海新谊康捷有限公司,批号050101)、VitE(江苏无锡第二制药厂,批号20030701)。1.2羟苯乙酯乳化剂处方:醋酸地塞米松0.8g、己烯雌酚0.5g、VitE25.0g,十六醇100g,白凡士林150.0g,液体石蜡100.0g,羟苯乙酯1.0g,甘油50.0g,乳化剂OP25.0g,蒸馏水适量。制备:取乳化剂OP、甘油、羟苯乙酯溶于适量蒸馏水中,加热至60℃,加入醋酸地塞米松使之溶解,再加入蒸馏水至全量,加热至75℃(水相);另取十六醇、白凡士林、液体石蜡于水浴上加热全部溶解待温于75℃,依次加入己烯雌酚和VitE,搅拌使溶解(油相)。将油相缓缓加入到水相中,边加边按同一方向搅拌,继续搅至冷凝,即得。2质量控制2.1断裂白色均匀,质地细腻,黏度适中的O/W型软膏。2.2识别标记2.2.1自烯雌性酚取本品2mg,加硫酸2ml,振摇溶解,5min内显淡红色,加水10ml混匀,颜色消失。2.2.2醋酸地塞米松取本品2mg,加硫酸2ml,振摇溶解,5min内显淡红棕色,加水10ml混匀,颜色消失。2.2.3维生素e取本品约30mg,加无水乙醇10ml溶解后,加硝酸2ml,摇匀,在75℃下加热约15min,溶液显橙红色。2.3重量测定2.3.1地塞米松霜标准液u3000e精密称取干燥恒重的醋酸地塞米松对照品适量,用无水乙醇配置成0.8mg·ml-1的标准液。精密称取醋酸地塞米松霜及基质各3g(约相当于含醋酸地塞米松2.4mg)。于基质中精密量取标准液3.0ml,分别加适量无水乙醇加热溶解,冷后置50ml容量瓶中,加无水乙醇定容,摇匀。2.3.2最大吸收波长的确定精密吸取上述溶液10.0ml,置于具塞试管中,以无水乙醇10.0ml,作空白,分别精密加入氯化三苯四氮唑试液1.0ml,振摇,加氢氧化四甲基胺试液1.0ml,充分振摇,在暗处放置40min,精密加入醋酸无水乙醇(10%)1.0ml,摇匀。在400～600nm波长范围内测定,并绘制吸收曲线,结果在484.5nm处有最大吸收波长。故选定测定波长为484.5nm。2.3.3吸收度测定方法精密吸取醋酸地塞米松标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml,分别置于3g基质中,按2.3.2项下方法操作,再在484.5nm波长处测定吸收度。经计算得回归方程:A=0.00516C-0.01000,r=0.9995(n=5)。结果表明,在16～96μg·ml-1范围内具有良好的线性关系。2.3.4标准溶液配制精密称取空白基质3.0g共5份,分别精确加入标准溶液适量,混匀。按“标准曲线制备”项下方法操作,在484.5nm波长处测定吸收度,计算即得(表1)。2.3.5加样回收率试验精密吸取标准溶液和供试液各10.0ml,按“加样回收率试验”项下方法操作。在484.5nm波长处测定其吸收度,计算含量,结果见表2。2.4ph值取本品5g,加热,蒸馏水(70℃)30ml,搅拌溶解,过滤,滤液pH值应为6～8。2.5微生物限制按中国药典二部附录IVA生物限度检查法检验:霉菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、细菌总数均符合规定。2.6颜色无改变无腐败将样品置-15℃冰箱内存放24h,结果油水无分层,颜色无改变无腐败;离心法:将样品10g装入带刻度得离心管中,经转速2500r·min-1的离心机上离心30min,观察霜剂无分层乳析现象,表明制剂稳定。2.7乳膏基质涂膜取家兔6只,脊柱两侧脱毛5cm×2cm,分为受试区和对照区,待剪毛刺激反应消失后,受试区涂乳膏基质,bid,共7d。7d后观察并与对照区比较,结果受试区均未见红肿、糜烂,表明本制剂刺激性较小,则认为供试品局部刺激符合规定。2.8皮肤、肌肉及重要脏器的异常变化取健康大鼠25只,雌雄各半,体重248±19g。于给药前24h将背部脊柱两侧去毛约4.0cm2,将大鼠分5个组,将4、5组豚鼠皮肤刺破(以渗血为度)作为破损皮肤组;实验时将乳膏均匀涂于豚鼠背部脱毛区或脱毛破损皮肤区。对照组涂空白基质0.2g/只,其余4组分别涂以不同浓度的复方地塞米松软膏。24h后,用温水除去残留药物,于去药后1h、24h、48h、72h至第7d,每日观察并记录大鼠毛发、眼、黏膜、呼吸、中枢神经系统、四肢活动及其他变化情况。结果4个实验组与对照组比较,动物的毛发、眼、黏膜、体征及体重均无异常变化,实验结束时各组动物健康存活,解剖观察皮肤、黏膜及心、肝、脾、肺、肾等重要脏器未发现异常变化。实验表明,本试验剂量的复方地塞米松软膏对大鼠完整皮肤和破损皮肤未发现毒性反应(表3)。3临床应用3.1临床数据3.1.1营养不良类型分类按照1987年国际外阴疾病研究学会(ISSVD)制定的标准,对外阴皮肤和黏膜上皮内非瘤样病变,根据其病变特征进行分类,分为增生型营养不良、硬化苔癣型营养不良、混合型营养不良。根据外阴皮肤出现界限分明的发白区,但表面光滑润泽,质地正常,恰无任何自觉症状,排除其外阴白癜风,外阴皮肤增厚,并伴有瘙痒且阴道分泌物增多者,应首先排除念珠菌、滴虫感染所致的阴道炎和外阴炎。3.1.25岁按照诊断标准入选的病例142例,随机分为复方地塞米松软膏治疗组和氟氢松软膏对照组。治疗组73例中,20～45岁36例,45～55岁18例,55～70岁16例,70岁以上3例;平均年龄为43.8岁。对照组69例中,22～46岁28例,46～56岁22例,56～68岁13例,70岁以上6例,平均年龄为38.9岁。两组患者在年龄、性别、病种等方面经统计学处理无显著性差异。3.2u3000常见重复用药治疗期间停止服用一切药物,将患处清洁后,以本软膏适量涂于患处,并用手指稍加按摩2～3次/d,疗程为8周,用药痊愈后继续巩固2～3周。少数患者重复1～2个疗程,未愈或病情有复发者可重复用药。除局部应用复方地塞米松软膏外,还适当给予镇静药(安定)、脱敏药(扑尔敏)以加强疗效。治疗期间两组均不使用其他抗生素。3.3皮肤长期多次烧试验疗效结果治愈:瘙痒症状消失,表皮层软化、有弹性,色泽恢复正常。显效:皮损及皮炎症消退80%以上,瘙痒症状明显减轻,表皮层软化,色泽由白色转变为粉红色。好转:皮损和炎症部分消退,瘙痒症状有所缓解,色泽有一定程度的改变。无效:治疗后无明显改变。3.4临床治疗效果观察临床疗效见表3。4复方地塞米松唇膏对醋酸地塞米松的含量测定,文献采用二价导数光谱法,文献采用紫外分光光度法。我们设计处方中含有己烯雌酚,对紫外光有吸收,干扰严重。故采用比色法测定醋酸地塞米松的含量,是根据肾上腺皮质激素在碱性条件下与氯化三苯四氮唑氧化还原反应的原理来测定的。处方中的维生素E和基质成分与试剂不显示,故对测定无干扰。慢性外阴营养不良是以女性外阴病变部位的皮肤和黏膜呈现白色,上皮增生和外阴瘙痒为特点的一种慢性疾病。复方地塞米松软膏中的主要成分地塞米松为肾上腺皮质激素类药,具有抗炎、免疫抑制、抗病毒作用,可用于肾上腺皮质功能减退症、皮炎等过敏性疾病,并对缓解外阴皮肤瘙痒有较强的作用。本软膏中的维生素E能营养皮肤,恢复局部组织的弹性,促使局部易透皮吸收,并具有抗炎作用。己烯雌酚有促进上皮细胞的生理功能。故对增生性营养不良、黏膜硬化性苔藓营养不良和混合性营养不良均有良好的治疗作用。根据患者的临床体征和病理特征,入选3种病理类型的标准如下:增生性营养不良,以外阴瘙痒为主要症状,主要组织表皮层角化,角化过度部位呈现白色,由于长期搔抓和摩擦,导致皮损及皮肤增厚似皮革,皮肤纹理突出,出现苔藓样变;外阴硬化苔藓,是一种外阴及肛周皮肤萎缩变薄为主的皮肤病,病变早期真皮乳头层水肿,血管扩大充血,典型的病理特征为表皮层角化和