临床微生物学检验：实验十七 尿液标本的细菌学检测(一)_第1页
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文档简介

实验十七尿液标本的细菌学检测(一)目的要求：1.熟悉尿液标本细菌学检测的基本程序；2.掌握尿液标本细菌定量检测的方法和临床意义；3.掌握尿液标本细菌分离培养鉴定的方法和临床意义。实验内容：1.制备普通琼脂平板（小组作，每人一个）2.含金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的“尿液”标本直接涂片染色镜检（每人作）3.尿液标本细菌定量培养（接种环法）（每人作）尿液标本的鉴定程序

清洁中段尿或膀胱穿刺留尿标本；及时送检接种（室温不超过2小时，4°C不超过8小时但除外淋病奈瑟菌；最常见的细菌为革兰阴性菌（80%)，尤其是大肠埃希菌;其次变形杆菌、铜绿假单胞菌，克雷伯杆菌…;革兰阳性菌以肠球菌、葡萄球菌、粪链球菌、MTB等数量：G-b小于10000/ml为污染，10000-100000/ml为可疑需要复查，大于等于100000/ml为感染；G+C大于等于10000/ml即为感染。尿标本革兰染色镜检接种血平板、巧克力平板、麦康凯平板、ss或EMB，……接种厌氧培养基生化鉴定：KIA、MIU，触酶试验，氧化酶试验、凝固酶试验、O/F试验，微量生化管接种，……血清学鉴定细菌的属和种菌落计数药敏试验检验报告尿液细菌（菌落）计数方法介绍：1.直接计数法：尿液1ul涂在玻片上革兰染色，油镜观察计数。2.定量接种：3.倾注培养法：操作步骤：倒普通琼脂平板（小组作，每人一个）注意点：培养基冷却温度、无菌操作含金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的“尿液”标本(分别以1,2,3,4号管盲标）直接涂片染色镜检（每人作）

细菌革兰染色镜检结果金黄色葡萄球菌革兰阳性球菌，葡萄状排列表皮葡萄球菌大肠埃希菌革兰阴性杆菌，散在排列铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）革兰阴性杆菌，长短不一，杆状或球杆状，散在排列3.尿液标本细菌定量培养（接种环法）（每人作）方法：（1）将制备好的平皿做好标记！

（2）每4人1组，接种4种菌（每人接种其中1种并做好标记），实验报告要写4种菌。（3）用桌上特定的接种环(每环约10ul含菌液体)接种细菌1环进行培养基划线接种；（4）37°C孵育24-48小时观察菌落数量及鉴定。注意：无菌操作！临床意义：泌尿系感染是指大量微生物在尿路中生长繁殖而引起的尿路炎症。可分为上尿路感染、下尿路感染。女性多于男性。临床表现主要为尿频、尿急、尿痛、排尿困难和腰痛。最常见的细菌为革兰阴性菌大肠埃希菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌，克雷伯杆菌，肠杆菌等;革兰阳性菌以

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