止血与血栓筛检试验

第四节血栓与止血常用筛检试验止血、凝血和纤溶机制出血（bleeding）：血管损伤后，血液自血管内溢出或流出止血（hemostasis）：自发阻止出血和维持体内血液流动的过程凝血（bloodcoagulation）：一系列凝血因子相继酶解激活，最终生成凝血酶，形成纤维蛋白凝块的过程纤溶（fibrinolyticsystem）：纤溶酶原经特异性激活物转化为纤溶酶，并降解纤维蛋白和其他蛋白质的过程止血抗凝血凝血纤溶

正常止血机制止血过程的影响因素：血管壁的结构和功能血小板的数量和质量凝血系统（抗凝血系统）纤维蛋白溶解系统止血机制血管损伤内皮下组织暴露血小板粘附初期止血血小板聚集凝血酶形成血小板释放反应止血栓形成纤维蛋白形成二期止血加固止血栓止血栓收缩血凝块形成ADP、TxA2凝血因子作用及血液凝固机制凝血因子作用及血液凝固机制：①外源性凝血途径：由组织因子启动的凝血过程称为外源性凝血途径，参与的凝血因子少（Ⅲ、Ⅶ、Ca2+），反应速度快（15秒以内）。②内源性凝血途径：内源性凝血从因子Ⅻ激活开始。参与的因子还有激肽酶原、激肽酶、高分子激肽原（HMWK）、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ca2+、PF3等。③凝血的共同途径：凝血酶原激活物使凝血酶原激活为凝血酶。凝血酶再激活纤维蛋白原为纤维蛋白，凝血即告完成。

外源凝血系统凝血因子筛选试验（1）血浆凝血酶原时间（PT）[原理]在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶（兔脑、人脑、胎盘、肺组织浸出液）和Ca2+使因子II转变为IIa，后者使Fg转变为Fb，血浆凝固的时间即为PT。PT是反映外源凝血系统较为敏感的、最常用的筛选试验手工法和仪器法

【注意事项】1．试剂由于不同来源、不同制备方法的组织凝血活酶对结果影响很大，造成结果的可比性差，特别影响判断口服抗凝剂的治疗效果。世界卫生组织(WHO)提出以人脑凝血活酶67/40批号作为标准品，并以ISI表示各种制剂与67/40之间的相互关系。67/40为原始参考品，定67/40的ISI为1.0。市场上供应的组织凝血活酶试剂应注明ISI值，选用ISI<2.0的组织凝血活酶为宜。2．标本(1)应使用对凝血因子无激活作用的塑料制品或硅化的玻璃器械收集标本，如硅化试管、硅化注射器等。所用试管必须洁净、干燥、无划痕。(2)采血要顺利，否则可激活凝血因子。静脉压迫时间过长可引起局部纤溶活化。(3)采血后应仔细检查标本有无溶血、黄疸、脂血和血凝块，任何微小的凝块都会影响测定结果，必须重新采血。溶血的血浆可导致凝血时间假性缩短。部分凝血可导致凝血时间假性延长。(4)血液与抗凝剂要充分混匀。血液与抗凝剂比例(9:1)要准确。枸椽酸盐比例过高或过低，都会影响PT测定结果的准确性。(5)采血后宜在1h内完成测定。血浆在4℃保存不应超过4h，-20℃可保存14d，-70℃可保存6个月。(6)由于每次使用的氯化钙凝血活酶活性不尽相同，测定的条件也略有变动，故每次测定均需有正常对照。(7)分离血浆时离心条件要确保。以3000r/min离心10min，以获得乏血小板的血浆；如果血浆中富含血小板，可导致凝血时间假性缩短

3．温浴水浴温度要控制在(37.0±0.5)℃，温度过高或过低都可影响测定结果。温度过高，凝血时间缩短；温度过低，凝血时间延长。4．测定(1)检测方法要规范化，尽量采用国际血