临床生化检测系统建立及相关影响因素分析

1临床生化检测系统建立及相关影响因素分析2临床生化检测系统的建立一、检测系统定义二、检测系统的完善和基本要求三、检测系统对于质量管理的重要意义四、基质效应、检测结果溯源性及标准化五、临床生化检测系统的建立六、检测系统性能证实或评价3一、检测系统的定义完成一个项目检测涉及的仪器、试剂、校准品、操作程序、质量控制、保养计划等的组合为检测系统。若是手工操作，则还必须包括具体操作人员。为了保证达到质量要求，提高检测效率，如果从更广义上来看也可以包括真空标本采集管、检测用水、配套离心机等也纳入检测系统。4临床生化检测系统示意图检测项目赋值检测结果仪器试剂校准品操作程序保养计划质量控制手工操作人员消耗品真空标本采集管检测用水配套离心机须注意的，这里的检测系统指的是每个检验项目的。因此，仪器上能同时做多少检验项目，就有每个项目的检测系统。5二、检测系统的完善和基本要求一）检测系统的形式1、厂商提供的完整检测系统2、实验室自建检测系统

二）国外对检测系统的管理要求三）我国对检测系统的管理要求6一）检测系统的形式1、厂商提供的完整检测系统

生产厂商提供检测仪器及配套试剂和校准品，也规定了相应的操作程序。对这系列服务具有的性能作了完整的评价，所建立的检测系统。注：在向美国联邦药品和食品管理局（FDA）申报产品许可时，并不是一台仪器的被认可，而是对整个系统的认可。注：目前，国内的监督机构对仪器或试剂的审批，开始重视检测系统的概念。

2、实验室自建检测系统

由实验室按照自己的意愿，选择需要的仪器、试剂（一般没有校准品，有标准液）、操作程序等组合的检测系统，以此完成患者标本的检验项目。7二）国外对检测系统的管理要求1．完整检测系统产品使用的要求

在向美国联邦药品和食品管理局（FDA）申报产品许可时，并不是一台仪器的被认可，而是对整个系统的认可。生产厂商从提供仪器，配套试剂和校准品，也规定了操作程序。对厂商提供完整的检测系统这系列服务具有的性能作了完整的评价。8二）国外对检测系统的管理要求1．完整检测系统产品使用的要求

实验室在使用这样的系统时，欧美国家还有检验的管理法规如美国临床实验室改进法案（CLIA’88）明确指出：实验室收取病人标本，进行检验、发出报告的项目必须要有具体数据和资料。欧共体98/79/EC体外诊断医疗器材指令

(IVDD指令)均有明确要求。9CLIA’88要求说明如下：1）开展该项目检验使用什么牌号、型号的仪器，使用什么公司的试剂（包括产品号）；什么校准品（来源，产品号）；具体操作程序（另有详细规定）；质量控制（另有详细规定）；仪器保养计划等。2）项目的操作分析性能。在上述检测系统下，经具体实验说明它的a)不精密度（总不精密度）；b)不准确度（方法学比较结果）；c)病人结果可报告范围；d)分析灵敏度（检测限）；e)分析特异性；f)参考范围；g)其他须说明的性能。10CLIA’88要求说明如下：3）经有关行政管理部门核实，认可该检验科开展的一些项目在性能上符合要求，行政同意该检验科可对认可的项目开展收费检验。4）在开展检验期间，实验室不可对上报内容所属范围作任意变动或修改。如若：调换试剂厂商产品，或者不同型号产品；变换校准品；操作程序作调整。如：样品用量减小，试剂用量变化，或迟缓时间缩短，或计算方式变动等。凡出现任一变动的，将视为新的系统。检验科必须变动后，进行详细实验，再次提供上述7方面性能资料，证明可靠性，并上报行政管理部门。经核实后，方可正式启用。否则将被行政取消开展该项目的资格。11“免检”的检测系统在美国，当前按CLIA’88规定，实验室使用的检测系统若得到FDA认可，用户完全按照厂商要求，使用相应配套试剂、校准品，按操作程序作检验，开展质量控制，定期保养，则该系统各项目的操作分析性能完全由厂商提供，承担责任。行政部门对这些项目在检验科中的使用属“免检”。

但若用户换用其他型号、牌号的试剂和/或校准品，更换操作程序等，原被认可性能无效。行政部门要求实验室必须重作评估，上报材料。122004年美国的“临床实验室改进法案的最终法规”（CLIA’88finalrule）明确要求：1）每个进行非简易项目检测的实验室，必须符合检测系统的要求。实验室必须监视和评价检测系统的所有质量。

（1）检测系统由实验室选择。但必须按照厂商的说明进行操作。保证每个检测系统提供的患者标本检测结果符合厂商建立和确认性能指标内。132004年美国的“临床实验室改进法案的最终法规”（CLIA’88finalrule）明确要求：（2）实验室必须为试剂和标本的完整保存、准确和可靠的检测系统的操作、和检测结果报告等确定质量指标。指标必须和厂商的说明一致。水质、温度、湿度和预防因电流的故障或中断，使设备和仪器影响患者检测结果和检测报告等条件必须被监视、和文件记录。142004年美国的“临床实验室改进法案的最终法规”（CLIA’88finalrule）明确要求：2）每个实验室在引入未作修改的、FDA认可或批准的检测系统，在报告患者检测结果前，必须作性能指标的确认。经核实，实验室得到的准确度、精密度、可报告范围、和证实厂商的参考区间（正常值）适合于实验室患者的群体等性能指标，和厂商确定的性能具有可比性。152004年美国的“临床实验室改进法案的最终法规”（CLIA’88finalrule）明确要求：2．自建检测系统的要求

修改了FDA-认可或批准的检测系统、或引入的检测系统未经FDA认可或批准的（包括自行发展的方法和标准方法，如：教科书方法，或使用不是由厂商提供性能指标的检测系统）的每个实验室，在报告患者检测结果前，必须确定每个检测系统的准确度、精密度、可报告范围、分析灵敏度、分析特异性（包括干扰物）等性能特性的指标。还必须确定检测系统校准和控制方法。16欧共体98/79/EC体外诊断医疗器材指令

(IVDD指令)在今后的推广和服务中，厂商必须做到：告诉用户，只有使用公司提供的系列产品，方能保证得到审批认可的可靠结果。明确要求：17二）我国对检测系统的管理要求第二十四条

医疗机构临床实验室应当保证检测系统的完整性和有效性，对需要校准的检验仪器、检验项目和对临床检验结果有影响的辅助设备定期进行校准。第二十九条医疗机构临床实验室参加室间质量评价应当按照常规临床检验方法与临床检验标本同时进行，不得另选检测系统，保证检验结果的真实性。医疗机构临床实验室对于室间质量评价不合格的项目，应当及时查找原因，采取纠正措施。------------《医疗机构临床实验室管理办法》

2006年6月1日起施行

18《医疗机构临床实验室管理办法》配套文件实验室室内质量控制、校准和内部比对要求一、临床化学实验室1、室内质控2、相同检验项目检验结果的比对3、系统的完整性和有效性193、系统的完整性和有效性配套试剂和校准品可以接受非配套试剂和校准品：应提供准确性的实验证明利用室间质量评价结果进行评估20葡萄糖配套检测系统现状

----（2008年第一次全国常规化学室间质量评价）

检测系统组合实验室数

检测系统组合实验室数

检测系统组合实验室数Hitachi(仪器）254缺省组1109Olympus仪器257Roche（试剂）120Beckman(仪器）127Olympus试剂55Roche(校准物）297Beckman(试剂）108Olympus校准物101Hitachi(仪器+Roche试剂）25Beckman(校准物）149Olympus(仪器+试剂）55Hitachi(仪器+Roche校准物）109Beckman(仪器+试剂）90Olympus(仪器+试剂+校准物）48Hitachi(仪器+Roche试剂+校准物）25Beckman(仪器+校准物）107Olympus(仪器+Randox校准物）66Hitachi(仪器+Randox校准物）52Beckman(仪器+试剂+校准物）84Dade仪器21Hitachi(仪器+Randox试剂+校准物）5Beckman(仪器+Roche校准物）2Dade校准物19Hitachi(仪器+Beckman校准物）5Beckman(仪器+Randox校准物）5Dade(仪器+试剂+校准物）1721体外诊断试剂注册管理办法（试行）

国家食品药品监督管理局自2007年6月1日起施行第二十条产品性能评估是指对体外诊断试剂分析性能和临床性能的评估。

分析性能主要包括分析灵敏度、分析特异性、测定范围、测定准确性、批内不精密度、批间不精密度等。

临床性能主要包括临床灵敏度、临床特异性等。22体外诊断试剂注册管理办法（试行）附件：1．首次注册申报资料要求及说明

……二、申报资料说明9．分析性能评估资料

（1）一般情况下，分析性能评估包括分析灵敏度、分析特异性、检测范围、测定准确性、批内不精密度、批间不精密度等项目。

……

如注册申请中包括不同的包装规格，或该产品适用不同机型，则需要采用每个包装规格产品，或在不同机型上进行上述项目评估的试验资料。23三、检测系统对于质量管理的重要意义1．追求质量—让检验结果最好地符合病人实际情况；检验结果可靠、及时、有价值。2.检验结果在对病人的诊断和治疗中应有可比性。追求检验结果具可比性，是最实在的质量。质量管理的目标：不管病人在世界上什么地方，同一病人同一项目的检验结果是一样的。24三、检测系统对于质量管理的重要意义3．所有的仪器、试剂、方法的发明和研究，都是用来作病人新鲜标本检验的。因此各个检测系统对同一份标本的同一项目结果，相互间应具有可比性。这是所有生产厂商为之努力的方向。4．长期实践说明，只有形成一个固定组合的检测系统，才能在世界上任何地方，所有检验结果间具可比性。否则就没有可比性。5．大量资料证明，全世界的同一检测系统（同一公司，同一型号）数千套遍布世界，它们的室间评估成绩变异系数已很小。充分说明检测系统的必要性、可行性和有效性。25自建检测系统的问题1、自建检测系统指的是：由实验室按照自己的意愿，选择需要的仪器、试剂、操作程序（一般没有校准品，有标准液）等组合的检测系统，以此完成患者标本的检验。2、使用自建检测系统时：量值溯源可以提高患者标本检测结果的准确性,提高不同实验室检测结果的可比性,是衡量检验质量的重要手段.检验结果的溯源性是临床实验室的工作和检验试剂生产的重要质量指标。国内大量的实验室自行建立的检测系统，应该怎样寻找检测结果可靠性和溯源性，是一个极大的现实问题。26几十年来对基体效应的认识逐渐深化。为了克服标准液和标本间的基体差异，引出了校准品。近几年来，从室间评估的结果揭示了：病人结果在各系统间的可比性远优于室间评估样品间的可比性。说明存在着新鲜样品和“处理过”的样品间的基体差异。因此，当使用“处理过”的样品作校准品时，它的校准值只适用于指定的检测系统。以往强调仪器和试剂的配套

现在更强调校准品的配套这又是为什么？四、基质效应、检测结果溯源性及标准化27四、基质效应、检测结果溯源性及标准化一）基质效应二）临床检验量值溯源

三）标准化校准品试剂仪器病人标本检验结果校准检测28四、基质效应、检测结果溯源性及标准化一）基质效应：是指检测系统在分析样品中的分析物时，处于分析物周围的所有非分析物质（基质）对分析物测定结果的影响，称为基质效应。二）临床检验量值溯源：简单理解就是应用参考系统，即用参考测量程序或参考物质建立或验证常规检验结果的准确性。参考系统除包括参考测量程序和参考物质外，还包括从事参考测量的实验室。对临床实验室来说,我国国家标准GB/T15481-2000“检测和校准实验室能力的通用要求”和国家实验室认可委员会CNACL201-2001“实验室认可准则”和ISO/FDIS15189“医学实验室质量管理”

也都对临床检验结果的溯源性作出明确要求。29四、基质效应、检测结果溯源性及标准化三）标准化

和临床检验的实践和需求结合起来，可以简单理解为：

为了实现临床检验结果的溯源性，检测系统的生产厂商和临床实验室的所有努力，进行有序的特定活动所制定并实施各项规则的过程为标准化。30标准化涉及的内容严格的质量管理；训练有素的人员；良好的必要设备和环境要求；所有开发、研制、生产的每个步骤都有具体明确的规程，并严格实施；有详细记录；每个产品有完整文件资料，证实产品的性能、溯源性、使用要求、产品生产工艺、产品许可、包装和说明、技术支持、质量评估等。31五、临床生化检测系统的建立一）解决自建检测系统可靠性的先决条件和基本认识

1．仪器的完善保养2．选择性能良好的试剂盒3．确定实验室溯源性的目标4．基质效应及新鲜标本使用二）实现自建检测系统溯源性的大致步骤32一）解决自建检测系统可靠性的先决条件和基本认识1．仪器的完善保养重视仪器的定期保养和维护。是实现溯源性的前提之一。形成制度，并且将仪器定期保养和维护的费用列入必须开支。

实验室不重视仪器的定期保养和维护，无法保证仪器一直处于良好状态，严重影响检验质量。电极、管道、比色杯、样品针、试剂针等的清洗效果不良具有积累效应。建议：使用仪器原配的清洗液、保养液等！33一）解决自建检测系统可靠性的先决条件和基本认识2．选择性能良好的试剂盒。

检验结果的质量和分析性能是检测系统的，不是仪器或试剂的。实验室应该在获得批准的试剂盒厂商中，挑选适合自己仪器的产品。并且，一定要经过使用和实验，有精密度、可报告范围、和其它试剂或其他实验室实际标本对照的数据资料，初步说明分析性能可以接受。被选择后的试剂盒，在正式用于临床检测患者标本前，实验室应书写完整和详细的操作规程。经选择后，必须长期稳定，不任意变换其他公司的产品、或同公司的其他规格的产品。否则，在建立溯源性上变得毫无意义。34一）解决自建检测系统可靠性的先决条件和基本认识3．确定实验室溯源性的目标。实验室准备使患者标本的检测结果向哪个公司的系统靠拢？建议：实验室校准的目标向原检测系统靠拢。若实验室具有日立系列的仪器，就以罗氏系统为目标；具有Beckman仪器的，就以Beckman原系统为目标。如果实验室使用的仪器原先就没有原检测系统的，可以选择在实验室附近的医院实验室内，具有国际上知名的、他们正使用原检测系统进行检验的系统为目标。35一）解决自建检测系统可靠性的先决条件和基本认识4．基质效应及新鲜标本使用在实现溯源性的目标过程中，必须以患者的新鲜标本为实验对象、必须以方法学比较实验方式为验证手段。所有各种测定方法、仪器、试剂、检测系统等都是设计用来作新鲜病人标本检验的，对病人标本检验具有可靠性，但是不一定对各种处理过的材料的检测提供可靠数据。衡量某一方法或试剂的准确可靠，唯一可信的是使用人新鲜标本的方法学比较结果，仅以控制品测定值相似或等于定值，不足以说明方法的准确度。36二）实现自建检测系统溯源性的大致步骤1．溯源性的目标确定2．仪器完整保养3．分析过程质量控制4．精密度实验5．可报告范围的评估6．进行初步的方法学比较7．自建系统的校准8．建立“自建检测系统”的稳定校准品37二）实现自建检测系统溯源性的大致步骤以下以日立仪器实现溯源性为例。

1．溯源性的目标确定：

实验室以罗氏系统为溯源性目标。要准备充分的罗氏试剂盒、校准品。另外，实验室也要准备充分的自建检测系统中的试剂盒。每个试剂盒和校准品都应该是同批号的。

2．仪器完整保养：

对日立仪器进行一次完整的保养，确认仪器处于良好状态。确保用于仪器上的水质优良。

3．分析过程质量控制：所有实验过程都必须有分析过程的质量控制。确认同批实验的质量控制结果在控的前提下，采用实验数据。38二）实现自建检测系统溯源性的大致步骤4．精密度实验：使用自选试剂盒，在日立仪器上进行精密度实验。如果实验室已经使用该试剂盒有一段时间了，实验室积累了多月的天间质量控制结果，能够说明精密度的水平。可以不做。判断精密度