中国胃癌HER2检测-指南解读-郑杰

中国胃癌HER2检测指南解读

〔2022版〕第一页，共四十页。概述本指南推荐IHC与FISH和〔或〕DSISH相结合的检测策略胃癌有必要进行准确的HER2检测

HER2状态检测首先选用免疫组织化学法〔IHC〕

IHC3+的病例视为HER2阳性

IHC2+的病例建议进一步行原位杂交〔ISH：FISH和或DSISH〕检测，IHC2+/ISH+的病例视为HER2阳性

IHC1+和IHC0病例，IHC2+/ISH-病例视为HER2阴性

胃癌HER2检测应在有能力的实验室进行

检测质量取决于标本的采集、处理过程、IHC/ISH检测方法和评判标准的执行第二页，共四十页。问题一1.请问您所在的医院胃癌HER2检测是否属于常规检测工程？是否不清楚第三页，共四十页。问题二请问您所在的医院，由谁决定是否做胃癌HER2免疫组化检测？病理科外科肿瘤内科消化内镜室第四页，共四十页。问题三请您对多学科合作对胃癌HER2检测的重要性打分〔0-5重要性逐渐递增〕，请按投票器选择012345第五页，共四十页。胃癌HER2检测第六页，共四十页。切片脱水包埋固定HER2检测的相关流程切片检测判读标本收取第七页，共四十页。问题四贵单位胃癌手术标本送到病理科处理的时间？A30分钟内B1小时内C2小时内D>2小时E不清楚

第八页，共四十页。问题五贵单位手术标本固定时间？不固定直接取材固定时间在8小时内固定时间在12小时左右〔过夜〕固定时间12-24小时不清楚第九页，共四十页。标本类型原发病灶的手术切除标本原发病灶的胃镜活检标本建议取6-8块，以获得足够的样本组织，多点活检对准确的检测有必要切除标本离体后20–30分钟内进行标记、切开、固定等初步处理后，及时送病理科活检标本的大小≥2x2x2mm3原发灶活检组织、手术切除组织皆有的病例，建议使用手术切除组织进行检测标本采集第十页，共四十页。问题六贵单位送检标本采用何种固定液？不用固定液，直接送病理科10%福尔马林固定液〔蒸馏水配〕10%福尔马林固定液〔中性缓冲液配〕10%甲醛固定液不清楚第十一页，共四十页。标本固定采用新鲜配制10%中性缓冲福尔马林作为固定液固定液的量应为组织的10倍手术切除标本的固定时间为8–48h(至少1h/mm组织)活检标本的固定时间不超过24h(至少1h/mm组织)不宜使用其它固定液，非10%中性缓冲福尔马林制剂可能会阻碍IHC和ISH检测的可靠性不宜用微波快速固定组织标准的标本固定是HER2检测质量的保障；保存良好的组织形态，防止细胞内蛋白和核酸的丧失标本准备第十二页，共四十页。固定1小时固定52小时固定4小时固定2周固定时间影响HER2染色结果固定22小时图片由ofAMorey,StVincent’sHospital,NSW,Australia提供第十三页，共四十页。固定较差例如：乳腺癌HER2IHC检测固定较差会导致染色结果的异质性胞质染色可能是由固定较差导致图片由WHanna提供第十四页，共四十页。固定较差例如：胃癌HER2IHC检测固定不完全会导致假阳性检查结果胞质染色可能由于使用了不恰当的固定方式图片由TargosMolecularPathology.提供第十五页，共四十页。固定较差例如：HER2ISH检测图片由Abbott/Vysis.提供固定不完全-SISH，“空核〞固定不完全导致探针信号较弱或缺失过度染色会导致持续性自发荧光探针信号可能较弱或缺失第十六页，共四十页。HER2检测HER2过表达的检测HER2扩增的检测免疫组织化学染色方法〔IHC〕自动化原位杂交方法〔ISH〕FISHDualSISH第十七页，共四十页。实验室总体要求应当在有条件的实验室进行，拥有试验所需的仪器和设备及空间条件

实验室掌握包括标本的制备、抗体的选择、抗原修复方法及其它相关技术；探针的选择、检测预处理方法及其它相关技术

实验室经过严格的内部和外部质量控制程序验证，建立完善的实验室标准操作流程〔SOP〕

实验室技术员具备相关资质及经过合格培训第十八页，共四十页。HER2检测-IHC

IHC方法

试验方法根据实验室条件可以选择手工染色、半自动染色和全自动免疫组化染色建议使用全自动染色方法建议使用我国相关部门〔SFDA〕批准的试剂盒自行组配和分装的抗体必须经过严格的内部和外部质量控制程序验证，并与权威机构批准的检测试剂盒进行比对，以保证检测结果的可靠性IHC抗体第十九页，共四十页。结果判读和分析普通光学显微镜荧光显微镜病理医生需要经过培训

IHC评分标准和乳腺癌有所不同样本：活检组织和切除组织有所不同观察：高异质性需要全面观察所有肿瘤组织沟通：结果不确定时需要与肿瘤科医生沟通第二十页，共四十页。IHC判读标准

〔参照ToGA经验，所有图片来自SCC〕0无反响或肿瘤细胞膜染色<10% 1+≥10%肿瘤细胞微弱或隐约膜染色，细胞膜仅局部区域着色2+

≥10%肿瘤细胞弱到中度的完全或细胞基底部和两侧边膜染色3+≥10%肿瘤细胞完全性或基底部和两侧边膜强染色〔对3+的病例同时说明百分率，注明是否有异质性〕IHC结果判读时应注意：细胞质着色应忽略不计，正常胃黏膜上皮细胞不应着色

HER2检测-IHC第二十一页，共四十页。原位杂交检测方法〔ISH〕荧光原位杂交〔FISH〕双色银染原位杂交〔DualSISH，DSISH〕探针建议使用我国相关部门〔SFDA〕批准的试剂盒第二十二页，共四十页。FISH，HER2红色信号增多，局部呈簇状，CEP17信号1-2个，比值7.2，有扩增〔100×〕FISH，HER2和CEP17信号各1-2个，比值1.65，无扩增〔100×〕FISH：严格按照试剂盒标准程序执行HER2检测-FISH图片来自SCC第二十三页，共四十页。DSISHHER2黑色信号扩增，呈簇状；CEP17红色信号1-2个；比值15，有扩增(100×)

DSISHHER2和CEP17信号各1-2个，比值<0.8，无扩增(100×)

DSISH：实验室应先进行严格的比照试验和程序优化

严格按照所用全自动染色仪器的优化程序和SOP执行HER2检测-DSISH图片来自SCC第二十四页，共四十页。请问贵院是否有统一的HER2检测病理报告格式？是否问题七第二十五页，共四十页。检测报告内容胃癌HER2IHC/ISH检测报告临床信息：姓名 性别年龄门诊／住院号 送检医师 联系方式

检测日期年月日标本信息：病理号/蜡块号标本类型：手术切除□活检□肿瘤部位：胃食道交界处□胃底□胃体□胃窦□幽门管□转移灶□标本固定液种类〔10％中性缓冲福尔马林〕是□ 否□标本离体至固定时间(如有记录) 分钟标本固定的时间(如有记录)分钟组织学类型/分级Laurén分型临床分期TNM第二十六页，共四十页。HER2IHC检测报告检测信息：抗体信息(克隆号／生产商)检测方法 手工/半自动□ 全自动□对照设置情况3+□0□样本量是否足够用于评估 是□ 否□具有膜着色的肿瘤细胞的百分比%着色的异质性 有□ 无□肿瘤细胞膜染色模式完整□基底和侧膜〔U-shaped)□两者皆有□判读结果： 0□ l+□ 2+□3+□ 无法判读□结论：阳性□；不确定□；阴性□；无法判读□检测人员：技术员病理医师第二十七页，共四十页。

HER2ISH检测报告

检测信息：探针信息(生产商/商品号)

检测方法

对照设置情况阳性对照□阴性对照□样本量是否足够用于评估 是□ 否□IHC检测结果 0□ l+□2+□ 3+□ 无法判读□判读结果：

用于评估的肿瘤细胞数量

HER2信号总数／CEPl7信号总数

HER2信号数平均值／细胞核

CEPl7信号数平均值／细胞核

17号染色体是否为多体 是□ 否□结论： 阳性(扩增)□ 阴性(无扩增)□ 无法判读□检测人员： 技术员病理医生

第二十八页，共四十页。实验室质量控制〔1〕HER2蛋白和基因扩增的检测均应在内、外部质量控制良好的病理实验室进行检测必须严格按照指南要求执行，以保证结果可靠不具备HER2检测条件的单位应按照指南要求，妥善处理和准备好标本，提供给有质量保证的病理实验室进行检测第二十九页，共四十页。实验室质量控制〔2〕实验室内、外部质量控制和SOP的主要要求如下准备开展GCHER2检测的实验室应选择1～2家已较好开展该项检测的实验进行25～100例标本的比照验证或通过参加有关外部质量控制活动来实现，外部质控阳性和阴性结果的一致性应到达90％以上，每年应进行1～2次从事GCHER2检测的实验室技术人员和病理医师应进行必要的培训和资格考核第三十页，共四十页。实验室质量控制〔3〕实验室应建立完善的SOP，并做好每次检测情况的记录和存档工作任何改变操作程序和试剂的行为均应重新进行严格的验证内部质控应包括同一组织不同批次染色结果的重复性分析，每次染色阳性、阴性对照的设置，如有可能还应没置包括低表达／低扩增对照检测相关的仪器和设备需定期维护、校验第三十一页，共四十页。类似乳腺癌亮视野检测方法有优势Her2检测流程样本收集镜下观察异质性高需要观察整张切片检测所需时间胃癌进展快，宜及时获得结果多学科参与结果判读与乳腺癌有所不同胃癌HER2检测：根本过程和特殊性数量、质量适宜的含有肿瘤组织的活检标本具有代表性的手术切除标本第三十二页，共四十页。多学科协作共同努力医生和技术员

知识更新和观念改变患者和医生第三十三页，共四十页。多学科协作检测HER2：临床医生之角色采样手术和胃镜活检〔6-8块组织〕固定10%中性缓冲福尔马林样本送检〔离体时间〕30分钟结果解读HER2+IHC01+2+3+HER2阳性第三十四页，共四十页。多学科协作检测HER2：病理医生之角色WolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.检测结果分析检查备检标本是否可用正确设立内部对照组依照国际评分系统进行评分检测结果报告使用标准化HER2检测结果报告表报告内容应包括标本取样，固定，检测方法及评分系统多学科检测治疗小组(MDT)会议第三十五页，共四十页。学科协作检测HER2：技术员之角色处理:防止影响检测结果之因素--最正确答案固定时间及固定方法--石蜡包埋--组织切片的合理时间(最好于HER2检测前切片)--标本脱蜡方法:使用标准化/经验证之检测步骤--IHC--ISHFISHDualSISHWolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.第三十六页，共四十页。患者病理医生技术人员肿瘤科/内科医生病理医生外科/内窥镜医生获取肿瘤组织并按照标准进行固定后转送病理科标本处理和制片病理诊断选取有代表性的组织按照标准检测结果判读和评分签发报告与临床医生沟通并作必要的解释评估检测需求、提出手术或活检以获得标本成功且及时的HER2检测需要多学科合作第三十七页，共四十页。

建议

提高检测率离体时间和固