发酵对海蛇生品与生品的影响

发酵对海蛇生品与生品的影响

关于扁平海生动物：扁平海生动物（gry）。药性:味咸,性平。功能与主治:祛风湿,通络止痛,解毒。主治风湿痹痛,肌肤麻木,疥癣,皮肤湿痒,疮疖。可见海蛇有着广阔的市场潜力,但其本身含有腥味,影响进一步的开发利用。通过研究,确定了发酵去除其腥味的工艺。据文献报道,发酵去腥应用很少,且其机理不清楚,故笔者分别从性状、显微、薄层及红外扫描对其进行研究,比较海蛇发酵前后的差异,确定发酵对海蛇的影响。1材料表面1.1海蛇科平哌海蛇本品购于海南省海口市东门市场,经成都中医药大学卢先明教授鉴定为海蛇科平颏海蛇[Lapemishardwickii(Gray)]的干燥全体。其多于夏、秋季捕捉,捕得后用沸水烫死,除去内脏,烘干或鲜用。1.2海蛇段、、的制备用净海蛇段,依照如下操作,制得海蛇发酵品。①取5g酵母菌,加2﹪蔗糖液50ml敞开活化30min.②取海蛇段1kg,将①的处理液转移至海蛇药材中,并加入3000ml2﹪蔗糖液和pH=5缓冲液2000ml.充分搅拌,使液体均匀分布于海蛇体。③敞开放置在35～40℃培养箱内,发酵100min,每20min搅拌1次。④取出海蛇,尽量除去其携带的水,即得。1.3化学试剂缬氨酸(批号:24-200104)、丙氨酸(批号:624-200104),均购自中国药品生物制品检定所,其余均为分析纯。2方法和结果2.1横斑间距12海蛇生品全体长69.2～91.5cm.头较长,鼻孔向上,鼻鳞彼此相接。体侧扁,全体带有深榄色宽横斑,横斑间距1～2鳞宽,在体侧下方尖出呈三角形,有的形成完整环纹。体背鳞片菱形,呈镶嵌状排列,除去内脏的腹面,肌肉土黄色,可见排列均匀而微隆起的肋骨。质坚韧,不易折断。气腥,味咸。海蛇发酵品:海蛇干体长约0.6cm横切小段。表面橄榄黄,较生药材颜色浅,发白,无腥味,有酵母粉的淡淡清香味,味咸。2.2海蛇肉粒的结构本品粉末黄色或淡黄色,气腥,味淡。①角质鳞片淡灰色或近无色或淡黄色或红棕色,侧面观具半圆形或乳头状突起;表面观呈类圆形,分布有淡灰色或淡棕色细颗粒状物。②皮肤碎片淡黄色或近无色或近红棕色,表面密布棕色或黑色色素颗粒,常聚集成网状或分枝状,细胞界限较清楚。③横纹肌纤维较多,淡黄色或近无色,呈条状或方状,直径4～15μm,具极细的横纹,明暗相间,横纹平直或稍弯,有的边缘不平整,断面观少见。④骨碎片近无色或淡灰色,呈不规则的碎块。骨陷窝长梭形,大多同方向排列,骨小管稀而稍粗,于横、纵断面均明显可见。二者均具有基本的角质鳞片,皮肤碎片,横纹肌纤维,骨陷窝与骨小管,只是在结构上有微小差别。发酵品角质鳞片较生品少,且其淡灰色居多,无红棕色;侧面观乳头状突起不明显,表面观类圆形突起很大,未看到有棕色颗粒密布。发酵品皮肤碎片和骨碎片较多,其骨陷窝与骨小管常一起,而生品只能看到外露的骨陷窝,长梭形,大多同方向排列。可见发酵会使得海蛇结构上产生一定变化。结果见图1.2.3海蛇氨基酸成分测定海蛇(海蛇发酵品)粉末(过药典三号筛)1g,加甲醇10ml,超声处理30min,滤过,滤液水浴蒸干,加1ml甲醇溶解,作为供试品溶液。取0.001g缬氨酸,0.001g丙氨酸,分别加1ml甲醇溶解,制成1mg/ml对照品液。照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水(4︰1︰1)与显色剂(0.5%茚三酮醇液)以10︰1的混合液及正丁醇-冰醋酸-乙醇-水(5︰1︰1︰2)与显色剂同样的混合液为展开剂,展开,取出,晾干,105℃烘箱内烘至显清晰的斑点。2种展开系统供试品色谱中,生品、发酵品与对照品色谱相应的位置上均显紫红色的斑点,说明二者含有同样的化学成分,只是发酵品的含量很明显低于生品。其原因可能是在发酵处理过程中,有些成分溶于水,而损失部分含量。可见发酵未影响海蛇的氨基酸成分结构,只是含量有一定减少。结果见图2.2.4比较海蛇生产前后的红外光谱2.4.1fw-4-采用高效液相色谱法仪器:Prestige-21型红外光谱仪(岛津国际贸易上海有限公司),FW-4压片机(天津天光光学仪器有限公司),远红外灯,玛瑙研钵。试药:溴化钾分析纯。三批(090101、090102、090103)放大试验海蛇生品与发酵品粉末,过六号筛。2.4.2样品的制备取KBr粉末与药材粉末以1︰200混匀,置烘箱烘干。测定时,取适量粉末置玛瑙研钵中研细,即得(操作在红外灯下进行)。2.4.3红外光谱测定取分析纯KBr约100mg,研细,装入压片模具,用压片机加压至30MPa,维持压力2min后卸掉压力,得厚约1mm的透明KBr片进行红外光谱测定,作为空白对照。2.4.4生品与发酵品的图谱取各批次海蛇生品与发酵品样品适量.按2.4.3项下操作,进行样品红外光谱测定。绝大多数有机化合物的基频振动出现在4000～400cm-1区域。6种样品均有明显的两种吸收峰:2900～3400cm-1,1540～1660cm-1.推测090101生品与发酵品,090102生品与发酵品含有酰胺键,而090103生品与发酵品含有-CH3及-C=O.090101生品与发酵品在3000cm-1以上的吸收峰有差别,前者为3279.44cm-1,后者为3422.36cm-1.在2350cm-1处,二者亦有一定差别,前者为波峰,后者为波谷。090102生品与发酵品对比情况同090101.090103生品与发酵品图谱基本相同。可见发酵对海蛇化学成分的官能团有一定影响,结果见图3.3海蛇和海蛇降低化学成分的临床价值通过对海蛇生品与发酵品的性状、显微、薄层及红外扫