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文档简介
#/14菌可以利用空气中的氮气作为氮源,可以在此培养基上生长,从而达到分离固氮菌的目的。【材料和器皿】⑴试剂:蛋白胨,葡萄糖,甘露醇,孟加拉红,链霉素,去氧胆酸钠,KH2PO4,MgSO4^7H2O,NaCI,CaSO4^2H2O,CaCO3,琼脂。(2)器皿:台秤,烧杯,共角烧瓶,量筒,漏斗,试管,玻棒,加压蒸汽灭菌锅等。⑶其他:药匙,pH试纸,称量纸,记号笔,棉花塞,纱布,线绳,不锈钢试管帽,牛皮纸,报纸等。【方法和步骤】.马丁氏培养基的配制(l)培养基成分:葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO4^7H2O0.5g0.1%孟加拉红溶液3.3ml琼脂16g蒸馏水1000ml自然PH2%去氧胆酸钠溶液20ml(预先灭菌,临用前加入)链霉素溶液(10000U/ml)3.3ml(临用前加入)①称量:称取培养基各成分的所需量。②溶化:在烧杯中加入约2/3所需水量,然后依次逐一加入并溶化培养基各成分,再按每1000ml培养基加入3.3ml的0.1%孟加拉红溶液。③定容:待各成分完全溶化后,补足水量至所需体积。④加琼脂:加入所需琼脂量,加热融化,补足失水。⑤分装,加塞,包扎。⑥加压蒸汽灭菌;12I℃灭菌20min。⑦临用前,加热融化培养基,待冷至60℃左右,按每1000ml培养基以无菌操作加入20ml2%去氧胆酸钠溶液及3.3ml的链霉素溶液,迅速混匀。.Ashby氏无氮培养基的配制(l)培养基成分:甘露醇10gKH2PO40.2gMgSO4^7H2O0.2gNaCl0.2mlCaSO4^2H2O0.1gCaCO35g琼脂15~20g蒸馏水1000mlpH7.2~7.4(2)配制方法:①称量:称取培养墓各成分的所需量。②溶化:在烧杯中加入约2/3所需水量,依次逐一溶化培养基各成分。③定容。④调pH至7.2一7.4。⑤加琼脂:加入所需琼脂量,加热融化,补足失水。⑥分装,加塞,包扎。:⑦加压蒸汽灭菌;121℃(0.07MPa)灭菌20min。【结果记录】记录本实验配制培养基的时问、名称和数量。【注意事项】.称药品用的牛角匙不要混用。.称完药品应及时盖紧瓶盖。.调pH时要小心操作,避免回调。【思考题】.何谓选择性培养基
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