基础毒性2012硕士

外源化学物质的基础毒性2023/10/81毒理学概念传统的毒理学定义为“研究化学物对机体（主要是人体）毒作用及其毒作用机制的一门学科”现代毒理学（moderntoxicology）是研究化学、物理、生物因素等对生物体的毒作用及其机理2023/10/82毒性作用基础（一般）毒性特殊毒性急性毒性亚慢性毒性慢性毒性致突变作用致畸作用(生殖和发育毒性)致癌作用2023/10/83毒理学研究方法

实验研究主要体内试验（哺乳动物体内试验，也称整体动物实验)**体外试验（利用游离器官，培养的细胞、细胞器以及利用微生物等进行毒性研究）人群调查急慢性中毒患者药物的临床试验研究出现的病人

2023/10/84外源化学物质的基础毒性第一节基础毒性研究的实验基础基础毒性研究的实验设计实验毒物的染毒方法第二节外源化学物质的基础毒性急性毒性及其评价亚慢性和慢性毒性及其评价2023/10/85第一节一般毒性研究的实验基础毒理学实验设计要求合理的毒理学实验设计是获得准确、客观、全面实验结果的前提体内毒理学实验设计2023/10/86一、体内毒理学实验设计1.剂量分组

高剂量组应出现明显的有害效应，或已经达到染毒的极限剂量（如大小鼠灌胃或注射的最大容量）中剂量组介于高剂量组和低剂量组之间，应出现轻微的毒性效应（相当于LOAEL）低剂量组不出现任何可观察到的毒性作用（相当于NOAEL）组距按等比或等差设计2023/10/872.

对照阴性对照（溶剂/赋形剂）对照

是以受试物制备和染毒时所用的溶剂或赋形剂作为对照。

阳性对照用某种已知能产生阳性效应的物质作为对照，其产生效应的数据与受试物数据进行比较，并作为评价测试系统可靠性的依据。2023/10/88空白对照（未处理对照组）不加溶剂/赋形剂和受试物，以此来确定测试系统真正的背景水平，目的是获得该实验的基础数据，以便对实验组数据和溶剂/赋形剂组的数据作出解释。历史对照收集过去同类研究的对照数据加以汇总，再与实验组数据进行比较。对于某些类型的尤其是涉及小样本的研究有一定意义。2023/10/893.实验动物及数量确定实验动物的种类物种和品系等级普通级、清洁级、SPF级、无菌动物

个体的选择确定实验动物的数量结果的变异性显著性水平实验把握度小鼠、大鼠等小动物每组10-30只；家兔、豚鼠等中等动物每组8-20只；猫、狗、猴等大动物每组5-15只（随机分组)2023/10/8104.实验期限

急性毒性实验期限一般7天或14天亚急性、亚慢性毒性研究，持续染毒约长达动物生命周期的10%，如小鼠、大鼠为1-3个月，狗为1或2年长期毒性研究，受试动物的终生或至少一半以上的生命期内反复染毒，如小鼠18个月，大鼠24个月，狗和猴9-10年2023/10/811二、实验动物的染毒1.染毒前的准备实验前进行5-7天的检疫；随机分组；雌雄动物分笼喂养2023/10/8122.染毒途径（毒物进入动物体内或与动物接触，这一过程叫染毒）呼吸道染毒消化道染毒皮肤染毒注射染毒2023/10/813静式吸入染毒动式吸入染毒（一）经呼吸道染毒

气管内注入吸入染毒2023/10/814静式吸入染毒方法：一定体积的密闭容器，加入易挥发的液态或气态受试物染毒柜体积、动物数、时间，依据实验动物最低需气量计算优点：简单、方便、受试物消耗少，适合于小鼠缺点：氧气减少，浓度不稳定，经皮吸收，不适合较长时间染毒2023/10/815动式吸入染毒概念将实验动物处于有空气流动的染毒柜中，新鲜空气不断流入，污染空气不断流出。温度、湿度、氧及二氧化碳分压相对恒定，并有随时补充受试物，维持浓度稳定。可采样监测受试物浓度，可持续接触受试物，无时间限制。

2023/10/816动式吸入染毒装置的组成染毒柜机械通风系统配气系统2023/10/817动式吸入染毒设备2023/10/818动式染毒柜2023/10/819动式吸入染毒优缺点优点：受试物浓度和氧分压比较稳定缺点：设备要求高，消耗受试物量很大，操作比较复杂，费时费工2023/10/820（二）经口（胃肠道）染毒灌胃：溶液或混悬液，以注射器经导管注入胃内，等容量灌胃法喂饲：将受试物掺入动物饲料或饮水中供实验动物自行摄入吞咽胶囊：将受试物装入胶囊中，放至舌后部，迫使动物咽下。犬、猴2023/10/821灌胃法在急性实验中,多采用灌胃法。此法剂量准确。灌胃法是用灌胃器将所应投给动物的药灌到动物胃内。灌胃针头2023/10/822鼠类的灌胃法：用左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的口腔插入，压迫鼠的头部，使口腔与食道成一直线,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道，可感到轻微的阻力,此时可略改变一下灌胃针方向，以刺激引起吞咽动作，顺势将药液注入。一般灌胃针插入小鼠深度为3～4cm，大鼠或豚鼠为4～6cm。常用灌胃量小鼠为0.1ml/10g，大鼠1ml/100g2023/10/823（三）经皮肤染毒农药、化妆品、工业、环境、外用药物常用大鼠、家兔、豚鼠染毒方式：脱毛：化学或机械法脱毛（体表面积的10%）染毒：局部涂敷或大鼠、小鼠浸尾法2023/10/824

（四）经注射途径染毒注射药品、机制研究、毒物代谢动力学分类：腹腔注射耳缘静脉注射尾静脉注射2023/10/825

基础（一般）毒性（basic/generaltoxicity）实验动物单次、多次或长期染毒所产生的总体毒性综合效应。与特殊毒性（致畸、致突变和致癌）相对而言。

第二节外源化学物质的基础毒性2023/10/826按接触毒物时间的长短急性毒性亚慢性毒性慢性毒性急性毒性试验亚慢性毒性试验慢性毒性试验2023/10/827基础毒性研究目的：安全性评价和危险性评价的重要组成部分，为制订卫生标准和进行卫生决策提供依据；毒作用机制和靶器官毒性研究提供线索2023/10/828第一节急性毒性及其评价2023/10/829机体一次或24h内多次接触外源化学物后在短期内（最长14天）所产生的毒性效应，包括一般行为和外观改变、大体形态变化以及死亡效应一、急性毒性的概念急性毒性（acutetoxicity）2023/10/830二、急性毒性试验的目的评价化学物质对机体的急性毒性的大小、毒效应的特征和剂量-反应(效应)关系，并根据LD50值进行急性毒性分级，是外源性化学物质安全性评价和危险度评定的重要资料。为其他毒理试验提供接触剂量和选择观察指标的依据为毒理学机制研究提供线索2023/10/831急性毒性的参数半数致死剂量：LD50引起一群个体50％死亡所需的剂量。LD50数值越小，表示外源性化学物质的毒性越强；反之LD50数值越大，则毒性越低。比较不同化学物质急性毒性的重要参数是一个统计值，它本身具有一定的波动性仅是表示实验动物一半死亡，一半存活的一个剂量界点值，不能很好的反映急性中毒的特征

2023/10/832三、急性毒性试验的设计要点（一）经典的急性毒性试验（二）急性毒性替代试验2023/10/833总体原则（一）经典的急性毒性试验实验动物染毒途径染毒剂量观察周期观察指标的选择、计算方法和评价2023/10/834急性毒性反应与人近似易于饲养、操作方便繁殖力较强价格较低，易于获得1.实验动物的选择和要求主要原则（一）经典的急性毒性试验2023/10/835实验动物的物种和品系

啮齿类（rodentspecies）

非啮齿类（nonrodentspecies）小鼠：昆明种、NIH、ICR大鼠：Sprague-Dawley（SD）、Wistar犬或猴2023/10/836根据接触途径选择实验动物急性经口和吸入毒性试验大鼠、小鼠急性经皮毒性试验成年大鼠、豚鼠、家兔2023/10/837实验动物的年龄和体重刚成年、健康、未曾交配和受孕的动物小动物根据体重大鼠体重180～240g、小鼠18～25g、家兔2～2.5kg、豚鼠200～250g、狗10～15kg。同一次试验同一批实验动物体重变异范围不应超过平均体重的20%2023/10/838实验动物的性别雌雄各半如雌、雄动物毒效应有明显差异，应分别并求出雌性和雄性动物的LD50值特殊的试验研究可仅作单一性别的急性毒性试验2023/10/839实验动物分组与数量根据所选择的求LD50不同的计算方法设计剂量和分组。LD50，一般为4-6组大、小鼠每组10只，犬类6只严格遵循随机化的原则2023/10/8402.染毒方法模拟实际接触的途径和方式受试物的性质和用途2023/10/841经消化道染毒：多用灌胃法而少用喂饲法

灌胃体积为1ml/100g体重

禁食经呼吸道染毒：多采用静式吸入染毒法

静式染毒柜的体积应与放置的动物数和染毒时间相适应经皮染毒：常用的大鼠、豚鼠和家兔统一使用动物的背部皮肤

染毒途径消化道、呼吸道、皮肤2023/10/8423.剂量选择参考相关资料先用少量动物，以较大的剂量间隔染毒，找出10%-90%（或0%-100%）的致死剂量范围，然后设计正式实验的剂量和分组毒性很小的化学物质，直接做最大耐受量试验

根据试验所选的LD50计算方法确定剂量组数2023/10/843全面观察动物的各种反应和变化，仔细分析实验动物在染毒后出现的中毒表现、剂量效应、时间分布。观察记录的内容：中毒体征及发生过程死亡情况和时间分布体重病理形态学变化4.毒性作用观察2023/10/844中毒症状及发生过程详细观察和记录动物出现的中毒症状发生时间症状发展的经过死亡前的特征以及死亡的时间等2023/10/845死亡情况和时间分布实验动物的死亡数对