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文档简介
病毒感染的检查方法
与防治原则
第24章
目的与要求了解病毒的诊断，抗病毒治疗，病毒感染的预防。第一节病毒感染的检查方法病毒感染的检查检测内容查病毒查特异性抗体病毒颗粒病毒抗原病毒核酸病毒酶类：如逆转录酶电镜直接观察光镜检查包涵体分离培养一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，但应注意：
1.标本用“双抗”或两性霉素B处理
2.低温保存，尽快送检
3.血清学诊断采双份血清二、病毒的分离与鉴定（一）病毒的分离培养
细胞培养（cell
culture）
鸡胚接种（egginoculation）
动物接种（animalinoculation）1.鸡胚培养
采用孵化9～14天的鸡胚
绒毛尿囊膜
痘苗病毒、人类疱疹病毒
尿囊腔接种部位流感病毒、腮腺炎病毒
羊膜腔
流感病毒的初次分离
卵黄囊嗜神经病毒
1、鸡胚培养优点：易管理，不带微生物，成本较低缺点：操作程序复杂
2.动物接种
应用：尚无敏感细胞的病毒培养
动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等
优点：结果易观察，可建立动物模型缺点：有饲养条件要求，费用高，动物体内常带有潜伏病毒病毒的分离培养
3.细胞培养
单层细胞培养（monolayercellculture）
分类悬浮细胞培养（suspendedcellculture）原代细胞（primarycell）细胞种类二倍体细胞（diploidcell）传代细胞系（continuouscellline）病毒的细胞培养细胞培养瓶单层细胞1．病毒增殖鉴定
(1)细胞病变效应（cytopathiceffect,
CPE）
①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等（多数病毒）；②形成多核巨细胞或称融合细胞（麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培养细胞中形成包涵体（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。（二）病毒的鉴定
①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落麻疹病毒感染细胞呼吸道合胞病毒感染细胞②形成多核巨细胞或称融合细胞(1)细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)③形成包涵体(inclusionbody)(1)细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)腮腺炎病毒感染细胞(2)红细胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋红细胞表面HA受体(3)干扰现象（interference）风疹病毒＋人胚肾细胞病毒增殖，CPE(－)埃可病毒＋人胚肾细胞病毒增殖，CPE(＋)＋人胚肾细胞风疹病毒？埃可病毒CPE(-)—风疹病毒(+)
埃可病毒(-)CPE(+)—风疹病毒(-)
埃可病毒(+)2.病毒数量与感染性测定1.蚀斑形成试验
（plaqueformationtest）
2.50％组织细胞感染量（50％tissueculture
infectiousdose,TCID50）感染性病毒量2.病毒形态学鉴定电子显微镜：设备、操作复杂，应用受限光学显微镜：可见大病毒（痘类病毒），对一般病毒检测意义不大3.病毒血清学鉴定
用已知的抗体，鉴定病毒种、型、亚型
(1)血凝抑制试验--—正粘病毒型与亚型鉴定病毒＋鸡红细胞＝凝集（血凝试验）病毒＋特异性抗体＋
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