凝胶渗透色谱(GPC)、凝胶色谱安全操作保养规定_第1页
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文档简介

凝胶渗透色谱(GPC)凝胶渗透色谱(GelPermeationChromatography,GPC)是一种可用于分离不同分子量的聚合物、蛋白质等大分子量生物大分子的技术。GPC技术很大程度上提高了生物医药和化学材料中高分子量物质的研究难度。GPC技术主要基于分子量不同的生物大分子通过列装固定流动相的树脂柱，随着分子量的增加，进而通过弥散和流动物质的进入粒子内部而进行分离。在GPC操作中，固定相吸附有SIZEEX凝胶，凝胶内存在三种不同孔径的树脂，分别是SDV、SDVB、和SDVBG，用于分离不同分子量的生物大分子。GPC实验原理GPC实验涉及可进行分离和定量所测试分子的纯化分离，需要先利用某种气体或流体作为载流相，在不同孔径尺寸的固定流动相中穿行。由于不同分子的大小不同，在穿行不同树脂柱时将会发生吸附行为，使得颗粒径向内部随其树脂中所需开启的具有特定功能键的孔径匹配固定相互作用，从而逐渐分离成分子量不同的组分。GPC实验流程根据实验设定用所需柱或不同种类的孔径尺寸进行装柱和准备固定相包装物，固定流动相的选择通常有三种固定相可以选择，分别是SDV、SDVB、和SDVBG，用于分离不同分子量的生物大分子;等到固定相吸附完全后，用一定的速度和压力进行载流相的穿行;激活洗涤剂，并用洗涤液将固定物彻底清洗干净;化合物经过固定流动相孔径进入其中而分离出不同分子量的生物大分子组分;最后通过检测不同的分子量计算出不同分子量的生物大分子的百分比浓度。GPC实验注意事项在使用GPC进行实验时，需要注意以下事项：安装稳定：进行好的GPC实验需要具有相应的稳定性，并不易受到外界干扰，固定流动相必须牢固安装且固定良好;样品的使用：样品应该与载流相处于相同温度下并与固定流动相匹配;流速的设定：流速的设定在GPC实验过程中非常重要，在调整时避免出现工艺偏差和误差;测试方法：实验进行的过程中需要合理的进行检测方法选择，常用的检测方法包括UV、CD、NMR、MS等。凝胶色谱安全操作保养规定分子生物实验室必须组织专人对GPC仪器的维护保养，通常情况下每周进行一次，各个部分的问题需要及时反馈到维护人员，确保仪器良好工作;在使用GPC仪器进行实验时，应该严格按照学校或机构的安全操作规定进行相关操作，所有相关使用者也必须遵守使用规定操作;在操作中应该注意安全和防范措施，避免造成二次污染和伤害等安全事故;在使用仪器过程中注意对仪器的耗材和固定流动相的替换，保持稳定突袭。总之，在进行GPC实验时，需要

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