临床常见细菌的鉴定程序和思路 (NXPOWERLITE)

临床常见细菌的鉴定程序和思路

包括药敏实验没有好的标本就没有好的检验结果。我们的工作都是从接收到标本开始，那么保证标本质量为其首要。所以对于标本的处理要严格按照标本处理手册来进行。包括标本的质量审定（是否合格），接种合适的培养基，选择适当的培养条件（如温度，气体环境等等）。对于手册上要求作Gram染色的标本要作染色，以对标本作出一个初步的评价。对于镜下见有较多脓细胞的标本要尽量找出细菌，除了Gram染色还可考虑吖啶橙、抗酸和Jimsa等染色。对于这类细胞多的标本作Gram染色时最好用传统的Gram染液

充分考虑标本的潜在病原菌，对照标本接种手册，选择适合的培养基接种，选择适当的气体环境放入孵箱内培养。细菌的分析鉴定

观察培养基中生长的菌落特点：

菌落的大小，是否光滑，菌落边缘是否整齐，菌落的颜色——如无色似水滴状、白色、灰色、黄色、以及色泽的深浅，是否透光及透光的强弱，菌落产生光泽，等等；菌落产生的溶血环的情况——α溶血、β溶血、水溶性溶血、脂溶性溶血和其他的溶血特点；细菌产生的气味——如铜绿假单胞菌的“生姜”味，酵母菌的酵母味，芳香黄杆菌的水果糖芳香味等等；筛选出有意义的细菌。对待与体表相通部位的标本，排除常居菌和正常菌群的“背景噪音”干扰，以便有效地进行下一步实验。对于这一点，要求我们对致病菌、潜在病原菌、正常菌群和条件致病菌以及正常菌群地分布及临床价值要熟练掌握。没意义的细菌得出的结果没有意义，会对临床产生误导作用。浪费试验室的人力物力。有害而无利。对培养出细菌的评价

考虑是否有污染；结合标本的评价，评价细菌的临床价值；结合标本的采集部位；无菌部位标本所生长细菌，要排除污染的可能性；考虑临床危急程度，掌握及时报告的尺度。

Gram染色

G+球菌

葡萄球菌链球菌观察溶血情况观察菌落的大小、特点Gram染色的形态特点血平板的溶血特点触酶阳性触酶（-）、胆汁七叶苷、6.5%NaCL按照葡萄球菌的进行进一步鉴定学会使用胶乳试剂快速检测金黄色葡萄球菌和MRSA要求掌握葡萄球菌凝固酶的试管法测定实验α溶血掌握MRSA、MRSCoN及其筛选和确认试验首先考虑肺炎链球菌掌握MRS的耐药机理和耐药性特点注意菌落形态和染色特点做OPT试验等，注意PRP的问题β溶血等链球菌①考虑A群乙型链球菌，作BAC试验或Latex分群特别考虑标本来源……②考虑B群乙型链球菌，做CAMP试验或Latex分群特别考虑标本来源……③根据染色特点、菌落在血平板上的溶血特点和菌落大小等考虑——肠球菌进一步作胆汁七叶苷、6.5%NaCL要求掌握肠球菌的耐药性特点④其他特征不明显的链球菌就用板条或Latex分群作系统试验鉴定G-杆菌

路标：O-F试验OX

++------±+++肠杆菌科非发酵菌弧菌科板条系统鉴定板条系统鉴定板条系统鉴定

慨然法G-杆菌的特殊耐药性

ESBLsAmpC酶嗜麦芽嗜血杆菌（苛养菌）

分离培养基：流感嗜血杆菌分离平板（巧克力）；菌落形态——无色或浅灰色似水滴；G-细小杆菌或初代分离时为G-细长杆菌。作卫星试验，鉴定是否为流感嗜血杆菌；掌握药敏试验方法和步骤。测定Beta内酰胺酶的方法和临床意义。充分了解新版NCCLS药敏试验执行标准，将其贯彻于试验工作之中。其中包含了抗生素药敏试验的纸片法和稀释法执行标准。其中对细菌特殊耐药性作了明确解释并对其耐药性的确认试验也做出了执行标准。特殊细菌耐药的特点MRS的耐药特点：严格按照NCCLS的执行标准来筛选和确证葡萄球菌是否为MRS。要能区分MRSCoP和MRSCoN确证试验中的差别。了解MRS的耐药机理是什么？它的耐药特点什么？对其结果的