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文档简介

第一节显微镜技术

光学显微镜:观察显微结构（lightmicroscope)显微镜电子显微镜:观察亚微结构

(electronmicroscope)第二章.细胞生物学研究方法分辨率公式n=介质折射率（空气1，水1.33，香柏油1.5）θ=标本对物镜镜口张角的半角，

sinθ的最大值为1。λ=照明光源的波长，白光0.5

m。横向分辨率Rx,y=0.61λ/n·sinθ

纵向分辨率Rz=2λ/(n·sinθ)2

退出TechnologyforCellBiology首页(一)普通光学显微镜的分辨率：0.2微米一、光学显微镜技术思考：如何提高显微镜的分辨能力？人眼的分辨率：100

m不同光线的波长名

称

波

长(nm)

可见光

760-390

紫外光

390-13

X射线

13-0.05

γ射线

1-0.005

电子束:

100V

0.123

10,000V

0.0122

100,000V

0.00387

（二）普通光学显微镜的成像原理

光镜的结构

①光学部分

②照明部分

③机械部分在普通光学显微镜下，细胞结构呈半透明状，不易看清。往往将标本切片进行染色——提高可辨程度。移动臂蜡或树脂包埋的样品切片用钢刀样品切片蜡带伸展在盖玻片和载玻片之间的切片切片机染色的原理未染色已染色（三）荧光显微镜以紫外线为光源，照射被检物体发出能观察到的荧光。荧光显微镜显示同一细胞中的多种结构成分细胞核内质网细胞骨架（四）相差显微镜通过致密部分(如细胞核),速度慢

通过疏松部位(如细胞质),速度快相位差(光程差)振幅差(明暗差)相差显微镜

倒置相差显微镜载物台的上方：

光源长焦距聚光器载物台的下方：

物镜应用：直接对培养的细胞进行观察体外培养的细胞(a)：正在分裂生长的Hela细胞(b)：CHO单层细胞的培养用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描。类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成立体图像。(五)激光共聚焦显微镜信噪比

英文名称：signal-to-noiseratio;signaltonoiseratio定义：

特定参数(信号)值与非特异性参数(噪声)的比值。

如实验中样品的放射性与本底放射性强度之比；荧光在X射线底片上所造成的感光强度与非特异感光背景强度之比等二、电子显

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