丙泊酚对下丘脑室旁核去甲肾上腺素的影响

丙泊酚对下丘脑室旁核去甲肾上腺素的影响

所有麻醉和维持过程中都会发生变化，以改变周期功能。近年来的研究表明其作用效应是多方面的,既有全麻药物对自主神经的作用,也有对心肌和血管的直接作用。下丘脑在自主神经活动中起到了相当重要的作用,其影响主要表现在交感神经反应(神经反应)和神经内分泌反应(体液反应)两个方面。无论何者都与脑内的神经递质有密切的关系。但关于全麻药对下丘脑中单胺类递质的影响报道较少。本研究比较三种药物对去甲肾上腺素的影响。动物分组、药物试剂和统计学处理研究对象选用成年雄性新西兰兔36只,体重2.0~2.5kg。实验前3~5d转入实验室喂养以适应环境。动物模型制备动物以氯胺酮15~20mg/kg肌肉注射进行麻醉。放置于立体神经定位仪上(SCHAUBLIN公司,瑞士)。以双耳乳突内置棒和门齿支架三点进行头部固定,切开皮肤显露骨缝,校正动物头部位置,使前后囟门在同一水平位。选取下丘脑室旁核(PVN)为穿刺核团,参照兔脑神经定位图谱,在前囟头侧1mm,中缝左侧旁开0.5mm,垂直进针13mm。留置双套灌流管并缝合皮肤。动物苏醒后继续饲养3d。实验步骤动物在清醒安静状态下放置在实验台上,并开放耳缘静脉。在双套灌流管内用37℃人工脑脊液以0.1ml/min流速持续灌流洗脱。洗脱液经0℃冰水浴收集在塑料管中,样品以-80℃保存。动物分组:动物随机分为三组,每组12只。A组,丙泊酚2mg/kg;B组,咪唑安定0.2mg/kg;C组,依托咪酯0.2mg/kg;各组药物均在30s内静脉推注完毕。动物实验完毕清醒后,饲养24h后同组动物再次实验,A组,丙泊酚150μg·kg-1·min-1;B组,咪唑安定15μg·kg-1·min-1;C组,依托咪酯15μg·kg-1·min-1;药物均以微量输液泵连续静脉推注。各组均先平衡20min,然后收集样品1ml为基础对照。注药后再平衡10min后收集测定组样品。实验结束后处死动物经灌流双套管注入美兰染色后开颅,取脑组织进行冰冻切片以确定穿刺点的准确性。样品检测:以高效液相色谱分析法(HPLC)定量测定样品中去甲肾上腺素(NE)的含量。NE为儿茶酚胺合成过程中的最终产物,其体外化学特性稳定,在深低温下保存不易分解,HPLC层析柱孔径为20μm,样品经25000rpm4℃高速离心后直接进样。实验过程中未出现层析柱堵塞。统计分析数据以SPSS10统计软件进行分析。组间比较采用单因素完全随机方差分析法,组内比较采用成对t检验。P<0.05为有显著性差异。不同单次静脉推注和连续静脉输注时pvn含量的变化各组动物经脑组织冰冻切片证实双套灌流管均留置在PVN。各组基础值之间无显著性差异(P>0.05)。丙泊酚在2mg/kg单次静脉推注以及150μg·kg-1·min-1连续静脉输注时PVN中的NE均较基础值有显著降低(P<0.05),其中单次静脉推注较连续静脉输注有显著降低(P<0.05)。咪唑安定在0.2mg/kg单次静脉推注和15μg·kg-1·min-1连续静脉输注时PVN中NE均较基础有显著降低(P<0.05)。但单次静脉推注与连续静脉输注相比无显著性差异(P>0.05)。依托咪酯在0.2mg/kg单次静脉推注和15μg·kg-1·min-1连续静脉输注时PVN中NE均与基础值无明显降低(P>0.05)。PVN中NE含量单次静脉推注丙泊酚2mg/kg和咪唑安定0.2kg/kg均较依托咪酯0.2mg/kg有显著降低(P<0.05)。丙泊酚较咪唑安定有显著降低(P<0.05)。连续输注咪唑安定较连续输注丙泊酚及依托咪酯PVN中的NE浓度也有显著降低(P<0.05)。但连续输注丙泊酚与连续输注依托咪酯比较无显著性差异(P>0.05)(表1)。不同药物治疗pvn的活性特定脑区中儿茶酚胺浓度的测定及其与药物之间的相互关系是一个较为客观地评定药物对于中枢性自主神经功能影响的指标。本研究采用HPLC、立体神经定位穿刺和微量灌流技术,探讨三种全麻药物不同给药方法对PVN中NE浓度的影响。中枢交感系统中PVN不仅介导了交感神经与高级中枢的信号传导,同时也介导了交感神经兴奋所引起的神经内分泌,其神经元的兴奋可以直接影响下丘脑-垂体-肾上腺轴而产生生理作用。PVN是主要合成促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)以及促肾上腺皮质激素(ACTH)的场所,与神经内分泌有密切联系。近年的研究发现在PVN中也存在有γ-氨基丁酸(GABA)受体。PVN中较为丰富的NE突触神经元,其NE释放量与ACTH和CRH的合成及释放呈现正相关。本研究发现,咪唑安定能明显地抑制PVN中的NE释放,提示咪唑安定对中枢性的交感神经张力有一定的影响。其作用可能是通过GABA受体产生神经元抑制,通过突触联系抑制了PVN中NE细胞的兴奋性,从而产生交感抑制。但是单次较大剂量单次静脉推注与较小剂量连续静脉输注比较,并未发现有显著性差异,提示咪唑安定在临床剂量下,对于PVN中NE的释放不呈现剂量相关。丙泊酚可能与其他麻醉药物相似,与GABA受体复合物产生相互作用而产生麻醉作用。本研究发现单次推注丙泊酚对于中枢交感神经系统有明显的抑制作用,其程度较咪唑安定和依托咪酯强烈。但是在小剂量连续静脉输注时对于交感神经系统抑制较小。有报道称,在大鼠实验中监测脑电图和循环动脉压以及血浆浓度后认为,丙泊酚有血浆“阈”浓度(1.7~1.8mg/L),在阈浓度下,对于中枢及循环系统影响轻微。这与本研究的结论是相符合的。此外