感染性疾病及免疫学检测

常见病毒性传染病及其

免疫学检测平顶山市妇幼保健院传染病：是病原体以某种方式进入到人体后，并在人体内生长繁殖，释放毒素或导致机体内微生态平衡失调，给人体的组织和器官造成一定的损伤而引起的疾病。病原体易感人群免疫学检验主要用于：辅助诊断及鉴别诊断判断疗效及预后流行病学调查常用的免疫学检测方法酶联免疫吸附试验（ELISA）金标法（试纸条、试纸板）化学发光法1.电化学发光（罗氏）2.微粒子化学发光（雅培）免疫印迹法(Westernblotting)

凝集反应（梅毒检测)酶联免疫吸附试验ELISA（enzymelinkedimmunosorbentassay）

是一类常用的免疫酶技术。是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行。常用的酶：辣根过氧化物酶(HRP)

碱性磷酸酶（AP）。基本步骤包被封闭孵育洗涤显色结果测定

缺点：1只是诊断的辅助手段，特异性和灵敏性有待提高。

2操作过程有些繁琐，反应时间过长，不能一蹴而就。金标法原理：金标层析法采用双抗原夹心法免疫测定原理，选择经纯化的基因工程制备的抗原，分别作为包被抗原和胶体金结合抗原。由于层析作用反应复合物沿硝酸纤维膜向前移动，当遇到包被抗原时，形成红色沉淀线。在包被膜上还有一条质控线对照，故当有两条红线时判为阳性，只有一条红线时，判为阴性。免疫印迹法免疫印迹法(Westernblotting)是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法。（病毒学检测主要用于检测HIV抗原确证试验）凝集反应

凝集反应是指颗粒抗原与相应抗体结合反应出现的可见性现象。颗粒抗原如完整的细菌、红细胞等与相应抗体相混合，在一定条件下出现凝集。化学发光免疫分析

chemiluminescenceimmunoassay（CLIA）CLIA是将化学发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。这种方法兼有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性。CLIA优越性高度敏感，可达pg／ml或pmol水平；特异性强，重复性好，CV＜5％。测定范围宽，可达7个数量级。试剂稳定，无毒害，无污染，有效期长，达数月甚至数年。操作简单，耗时短，易于自动化。在对环保很重视的国家，CLIA成了取代RIA的首选方法。常见术前检测甲型肝炎抗体（抗HAVIgM）乙肝五项丙型肝炎抗体（抗HCV)梅毒螺旋体抗体人类免疫缺陷病毒抗体（抗HIV）病毒性肝炎

ViralHepatitis是由一组嗜肝病毒引起的，以肝脏炎症和坏死病变为主的一种传染病。主要表现为明显的消化道症状、全身疲乏无力，肝脏肿大。肝功能异常，部分病例出现黄疸。甲型病毒性肝炎（HAV）HAV属小RNA病毒，为正单链RNA病毒。HAV主要经粪-口途径传播。潜伏期平均28天。HAV抵抗力较强，60℃加热10-12h后仍具有感染性，85℃加热立即灭活，对乙醚、氯仿及PH为3的酸性环境有抵抗力。HAVIgM：近期感染HAV,发病2周后阳性率为100%，3个月后转阴。早期诊断。IgG：急性感染后6个月达高峰，然后逐渐下降，可终身存在。既往感染HAVRNA：早期诊断的特异性指标HBV(hepatitisBvirus）乙型肝炎病毒我国流行现状现有HBV感染者约1.6亿HBV颗粒管型小球型大球型HBV特点HBsAg与HBsAbHBeAg与HBeAbHBcAg与HBcAb有包膜双股DNA病毒三组Ag-Ab系统：HBs-Ag是感染的标志见于体液和分泌物中，也可见于唾液、精液、乳汁中介导病毒结合肝细胞HBs-Ab3-6个月产生有抵抗力的标志阻断病毒结合肝细胞HBeAg病毒复制的标志，传染性强病毒合成后释放到血液中治疗的参考指标HBeAb病毒复制减少的标志，传染性弱要先于HBsAb出现HBcAg存在于病毒核心，不释放至血液抗原性强HBcAb出现早，消退晚IgM:近期感染HBVIgG:既往感染HBV临床组合模式模式HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBc临床意义1+-+-+俗称“大三阳”。急性或慢性乙肝；病毒在复制，传染性强。2+--++俗称“小三阳”。急性或慢性乙肝；传染性低。这种模式在慢性无症状携带者以及急性感染人群中较常见，病毒复制可能仍在进行。3+---+急性或慢性乙肝感染，有传染性4---++既往感染5----+处于HBsAg和HBeAg消失与Anti-HBe和Anti-HBs出现之间的一个缺口时期；既往感染6-+--+感染恢复期；既往感染，有免疫力7-+-++感染恢复期；既往感染8-+---主动免疫9-----未感染HBV,属易感者10++-++少见的模式11+----12+-+--13-++-+14+-+++模式HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBc临床意义乙肝五项少见模式分析单一HBsAg：

主要见于急性HBV感染的最早期，一般随之出现HBeAg和IgM的Anti-HBc。通常的慢性HBV感染中，HBsAg和Anti-HBc并存者约占95%，HBV慢性感染中不出现Anti-HBc是少见的。单一的HBsAg的异常表现主要由于Anti-HBc的缺失。HBsAg和Anti-HBs并存：在HBV感染恢复期中约有3%的个例可同时检出HBsAg和Anti-HBs,然后HBsAg消失而Anti-HBs水平逐渐升高。在慢性HBV感染者中约3%-5%两者共存，出现Anti-HBs并不表明HBsAg的清除和感染的恢复，可能由于：1.前后感染两种亚型HBV，或HBsAg与其抗体之间仅有低亲和性反应；2.S基因变异，其编码的HBsAg抗原性改变，原型Anti-HBs不能将其清除；3.α干扰素治疗中出现Anti-HBs血清转换，也因S基因的变异，而未能清除HBsAg。4.HBV疫苗接种者中也有少数个例虽有正常的Anti-HBs应答，但仍能感染α决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而出现与HBsAg共存的现象。HBeAg和Anti-HBe并存：一般是处于乙肝e抗原和e抗体转换时期，e抗原和e抗体以抗原抗体复合物的状态共存。Anti-HBe试剂检测时，血样中的抗原抗体复合物同样可以结合至包被板上，起到了竞争效果。呈世界性分布极易慢性化，与肝硬化、原发性肝癌关系密切HCV（hepatitisCvirus）丙型肝炎病毒HCV特点有包膜的单股正链RNA病毒抗HCV抗体非保护性抗体输血和非肠道途径传播主要检测IgG丙型病毒性肝炎(HCV)临床意义HCV是输血后肝炎和散发性非甲非乙型肝炎的主要病原。HCV感染后可导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌等多种肝脏疾病。抗HCV阳性而血清中没有HCVRNA提示既往感染。检测方法

常用检测方法为ELISA法，金标记免疫层析法和化学发光法。检测方法：ELISA化学发光HIV(HumanImmunodeficiencyVirus)

人获得性免疫缺陷病毒我国历年艾滋病病毒感染者和病人数HIV的结构特点HIV-1和H