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文档简介
植物叶片中色素的提取、分离和含量测定北京市广渠门中学2016年11月24日夏天植物的叶子是绿色的,为什么?分布:叶绿体类囊体膜上绿色叶片类囊体膜上是否只含有叶绿素
一、绿叶中色素的提取和分离菠菜银杏黄叶月季红叶油菜月季绿叶爬山虎红叶一、色素提取:
称量2.5g材料
剪碎叶子
加CaCO3、SiO2
移液枪加2.5ml无水乙醇迅速、充分研磨
叶片匀浆研磨要充分!层析液一定不能触及色素线!!层析液色素提取液划线二、色素分离层析(水;石油醚:丙酮=10:1)划线为什么研磨时加入酒精提取色素原理:叶绿体色素不溶于水,溶于有机溶剂为什么研磨时加入碳酸钙和二氧化硅?碳酸钙作用:防止叶绿体中色素被破坏二氧化硅作用:使研磨更充分色素线叶绿素a叶绿素b叶黄素胡萝卜素叶绿素类胡萝卜素蒸馏水层析液(丙酮石油醚)纸层析法分离色素原理?溶解度不同—扩散速度不同为什么层析液不能触及色素划线叶片中有四种色素,叶片为什么为绿色红色月季叶片红色月季叶片叶绿体中色素液泡中色素?层析液(丙酮石油醚)蒸馏水三、叶绿素浓度的测定用混合提取液(丙酮:乙醇:蒸馏水=45:45:1)浸提法测定
菠菜叶、油菜叶、月季红色叶、月季绿色叶、银杏黄色叶、爬山虎红色叶,加入10ml提取液,放入37度恒温箱中浸提24小时。读值:分光光度计分别在波长440nm、645nm和663nm处测定并记录光密度值,通过OD值计算叶绿素含量。
A440A645A663菠菜叶
月季红色叶
爬山虎红色叶
油菜叶
银杏叶
月季绿色叶
叶绿素浓度的测定根据以下公式计算叶绿素浓度:叶绿素a浓度(Ca,mg·L-1)=127×A663–269×A645叶绿素b浓度(Cb,mg·L-1)=229×A645–468×A663叶绿素ab浓度(CT,mg·L-1)=CaCb=802×A663
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