小鼠不同组织内基因组学的比较

小鼠不同组织内基因组学的比较

在过去研究高大乔木的形状和机制之间的关系时，caial（1914）通过玻璃球囊细胞、唾液腺细胞和胰腺的外生殖器发展了高大乔木的分泌关系。nasonov（1923a，1924，1926）和parat（1928）、corel（1928）和bope（1924a，1926，1929）描述了胰细胞和副睾丸上皮细胞的分泌与高大乔木器官的关系。甘文昭等人（1927年、1928年和1929年）介绍了胃腺素、胰细胞和上腺髓的戈奇翁系统的分泌关系。Hirsch(1931h与d)曾用小鼠胰来研究細胞中分泌顆粒的形成、迁徙和排出以及綫粒体和高尔基氏器的恢复。Ludford(1925)曾述及肝、副睾上皮細胞的分泌与高尔基氏器机能的关联,幷发現副睾上皮中的高尔基氏器用古典法显示特别清晰。过去有人为高尔基氏器是液泡系(Parat,1928),后来常用体外活体染色及向体內注射活体染料来鉴别高尔基氏器(馬文昭,1928,1930;Baker,1944),晚近一些作者利用相差显微鏡在活細胞中覌察到高尔基氏器,又用电子显微鏡証明細胞內高尔基氏器的結构与用古典法金属沉淀所显出的高尔基氏器是相符合的(Dalton,1953,1954;Pollister,1957),而且借电子显微鏡結合活体染色証明了高尔基氏器不是全由类脂物組成的(Dalton,1953,1954)。我們的实驗是在小白鼠体中取一些与分泌有关的腺体(胰)和器官(副睾、小腸和腎),因这几种器官的細胞內高尔基氏器是特別明显的,用浸銀的古典法結合分泌葯品来研究其形态与分泌的相互关系。过去作者如Nassonov(1924),馬文昭(1928),Parat(1929),Hirsch(1931e)等多用匹罗卡品研究腺体分泌与高尔基氏器的关系,无对照比較;Hirsch曾注射阿托品覌察胰細胞的透过性,馬文昭亦曾用硫酸阿托品注人蟾蜍的皮下,观察到胰細胞中酶元顆粒大量增高。至于同时用硝酸匹罗卡品与硫酸阿托品与正常的腺細胞分泌进行覌察比較的,还未見有报导。高尔基氏器的名目繁多,此处所用为习俗常用的高尔基氏器(Golgiapparatus)—名詞。采集大鼠的中取身重20克左右,3—4月龄健康正常的雄性小白鼠20只,实驗前不間断飲食,飼料一致用碎米和靑菜,实驗时分小白鼠为三組,每組6—7只。第一組,正常作为对照,不用葯品注射,卽用解剖針迅速刺人心脏,杀死动物后立刻剖开腹部,剪下胰、腎、副睾头部及十二指腸取3毫米大小的小块按Aoyama(靑山氏)方法固定,卽投入氯化鎘与中性福尔馬林的混合液中,固定6小时,福尔馬林是用碳酸鈣中和的;在2%硝酸銀液中浸潤,用对苯二酚与中性福尔馬林、无水亚硫酸鈉的混合液还原。方法中所用的玻璃器均經彻底洗淨,水洗材料时用重蒸餾水。第二組、第三組在杀死动物前半至1小时分别用1毫克硝酸匹罗卡品(硝酸毛果芸香硷)水溶液和0.2毫克的硫酸阿托品水溶液皮下注入,取材后处理亦与第一組相同。切片7微米,在切片中显出之高尔基氏器呈現黑色,与浸鋨得出的形状相似。原理了解小鼠胰腺外分泌中的甲基氏器的位置第二組小白鼠受葯品硝酸匹罗卡品注射所影响,在杀死時,口、生殖道和肛門中流出大量粘液,眼泪也頻頻流出。我們覚得其兴奋分泌的效应是很强的。剪开腹腔后看見腸子上下蠕动較快,表現出副交感神經被兴奋的情况。第三組小白鼠受硫酸阿托品注射,在杀死吋見到口唇干燥,分泌粘液量少,肛門及生殖道亦显同样情况,剖开腹部不見腸子蠕动,而且腹腔中液体缺少。小白鼠副睾系取副睾头部,正常小白鼠副睾头部上皮細胞中的高尔基氏器呈圓球形,但此圆球形器中隐約地見其中具有松散顆粒組成带网状的結构,此結构多半位于核的上方,也有占据核的地位,卽围繞着核的情况存在。高尔基氏器的形状,虽然大致是圓球形,但也有很大的改变(見封三图1)。在副睾管的管腔中和細胞核与細胞游离緣之間存在着微量的小顆粒(見封三图1)。注射过硝酸匹罗卡品組小白鼠的副睾上皮細胞中的高尔基氏器,因受葯品的兴奋作用不見网織状况,而极浓黑,在浓黑的結构中隐約看見它是由多数粗顆粒集中形成的长方板或管,沿副睾管腔內緣,排列于核的上方。管腔中除含有精子外,还充滿着黑色的粗顆粒。管腔内径一般略为狹小(見封三图2)。杀死小白鼠前,用硫酸阿托品注射的副睾头部上皮細胞中的高尔基氏器一律位于核的上方,且与管腔边緣极为接近,高尔基氏器呈方块状,有时或呈扁平状,浓黑程度极深,表明高尔基氏器紧密地聚集。管腔中除原含有之精子外,极少顆粒。但管腔直径似乎較上述处理的管径要大些(見封三图3)。正常小白鼠胰腺外分泌腺泡上皮細胞中的高尔基氏器較为松散,而且不很清楚,但見它是由微小顆粒隐約地形成为网状器。其位置系位于核的上方(見封三图4)。若小白鼠胰腺外分泌部的上皮細胞內的高尔基氏器,在取材前用匹罗卡品注射刺激的話,則高尔基氏器呈淸楚浓黑色的杆状沿腺泡內腔排列。因为杆的浓深而难看見如正常时所看見的网状痕迹。从黑杆状的高尔基氏器至腺泡腔沿,以至于腺泡腔中,均呈現有較多而粗的顆粒(見封三图5)。取材前用硫酸阿托品从皮下注入,所切小白鼠胰腺外分泌部分上皮細胞內的高尔基氏器的位置,也一律呈現于細胞核上方地区中。高尔基氏器甚浓深,呈平行杆状和团块状分布于腺泡腔沿;一般看不見如正常时所看出的网状,分散的顆粒少至几乎难以看見(見封三图6)。小白鼠腎脏腎小管中的高尔基氏器以近曲小管中最为明显,其他段均远不及近曲小管中的高尔基氏器淸楚,这里描述的統限于近曲小管上皮細胞中的高尔基氏器。正常小白鼠的腎近曲小管上皮細胞中的高尔基氏器,呈弥散小顆粒状,而且顆粒的数量不多,其位置在核水平高处,有时接近于刷状緣。間或有些小顆粒分散于管腔中(見封三图7)。用硝酸匹罗卡品注射小白鼠后的腎脏近曲小管上皮細胞中的高尔基氏器,因受此种葯物的刺激兴奋而呈現粗顆粒,此种顆粒較正常情况中为粗大明显而且集中,大部分位于細胞核的上方,同时在近曲小管管腔中看見多数粗顆粒之分布,这种顆粒分布好似与葯品的兴奋有关(見封三图8)。小白鼠腎脏近曲小管上皮細胞中的高尔基氏器受硫酸阿托品的抑制分泌作用,細胞中的高尔基氏器亦多半位于核的上方,也有些是与細胞核水平同等高度。高尔基氏器呈杆状,形成柵形排列,但仔細观察仍是顆粒紧密集中形成的。顆粒的集中程度,似乎較用匹罗卡品处理后所表現的更为积极,但管腔中很少有顆粒分布,而且小管管腔亦較用上述葯处理后得出的要大些(見封三图9)。这里的腸腺是十二指腸处的Lieberkuhn腺。正常小白鼠腸腺上皮細胞中的高尔基氏器,位于細胞核的上方,接近腺泡腔处,但形状不完全是顆粒,而形成为小块状,它有分散性,故在腺泡腔中亦有少量顆粒出現(見封三图10)。注射匹罗卡品刺激之后,腸腺上皮細胞中之高尔基氏器由小块頓然分散,顆粒充滿于腺泡腔中,然尙未分散的小块,則仍留在核的上方高尔基区域中(見封三图11)。經过硫酸阿托平注射后的小白鼠腸腺上皮細胞中的高尔基氏器,在核上方出現粗大的块状器。黑块之大小較正常及用匹罗卡品处理后所出現的块为大,在腺泡腔中包含之顆粒亦較稀少(見封三图12)。物对胞的活性在細胞中的高尔基氏器的形态結构,据Golgi(1898)覌察为是网状的,Holmgren(1899)看見是管子的系統,Parat(1928)看見的是液泡系,这大概是由于各人使用的方法不同而有不同的表現。我們在本实驗中采用的是Aoyama氏浸銀法,卽Golgi原法的改变法,能看見由顆粒集中形成呈网状結构的,只有正常情况下的小白鼠副睾上皮細胞和胰腺外分泌上皮細胞中的高尔基氏器。在影响腺体分泌葯物处理下所显現的高尔基氏器的形状,均是由顆粒集中为小杆或小块状,或以顆粒状物向腺泡腔中排出。顆粒的形状,在浸銀法中,和脂滴等很难分开,从Baker(1944)等的研究中,知道高尔基氏器中是含有类脂物的,但Daltom(1954)已經証明,它幷不全由脂滴构成的。Manocha(1962)亦为綫粒体与脂滴和高尔基氏器关系不大。我們采用的古典浸銀法是Aoyama氏方法,此法已經有Lacy与Challice(1956)改变用作为电子显微鏡覌察之用,他們在研究时曾結合可見光与电子显微鏡的覌察,証明胰腺和腸子等器官中具有眞正的高尔基氏器。而且在我們使用Aoyama法所做的实驗中,看見高尔基氏器的形状,随注射影响腺体分泌葯物为兴奋或抑制而发生很大的改变,卽葯物的刺激可以控制細胞的分泌,亦卽控制着細胞中高尔基氏器形态的变化。所以我們覚得用Aoyama法所显示的高尔基氏器可能是眞实的。但形状变化不定,是遭到葯物控制的表現。葯物影响了細胞中高尔基氏器的变化,致使淀銀后产生的相也有一定的变化。Nassonov(1923a)为高尔基氏器是細胞中分泌的中心,Bowen(1924a)为是細胞中一个大的化学綜合或酶形成的中枢。由这二人的覌点知道,高尔基氏器在細胞中能起主要的作用,負有細胞中分泌物組成和排出的責任。在我們实驗中看見的情况,数种腺体上皮細胞中高尔基氏器的顆粒之集中、分散和放出于腺泡腔中,往往与高尔基氏器的膨胀和紧縮密切相关,在兴奋細胞分泌的葯物(硝酸匹罗卡品)作用之下,往往看見腺体或器官上皮細胞中的高尔基氏器特別膨大,而且也分散出一些較正常小鼠中为粗大的顆粒(分泌滴?)送往腺泡腔或管腔中去。在抑制細胞分泌葯物(硫酸阿托品)作用之下,所見腺体或器官上皮細胞中的高尔基氏器的情况刚刚与之相反,高尔基氏器特别紧縮,其周围的顆粒亦特別缺乏,使腺泡腔和管腔中极少顆粒。正常情况下細胞中的高尔基氏器是松散的,既不如兴奋時的膨大亦沒有抑制时的那么紧縮,顆粒則較兴奋情况下为少而滴亦略小。我們覚得在細胞內,高尔基氏器的膨胀和紧縮,及顆粒的涨落是与分泌的生理和葯理的情况相符合的,而且顆粒的紧、松、集、散又常影响高尔基氏器的改变。所以,我們同意Nassonov与Bowen(1924a)的主张,可能高尔基氏器是細胞中具有分泌机能之物貭。Nassonov(1924)用匹罗卡品注射动物,看見胰腺內高尔基氏器从細胞上部近核区移向腺体內腔方面。Parat(1928)看見在正常情况下,