示波极谱仪测定食品中合成色素赤藓红

示波极谱仪测定食品中合成色素赤藓红

红茶是合成色素的一种，具有显著的色泽。常用于食品加工产品和饮料，以改善其感官。但大量使用会对人体健康产生危害。我国GB2760-1996规定其使用限量为小于0.05g/Kg。目前,测定方法有:薄层色谱法、高效液相色谱法、阴离子交换色谱法等。但测定速度慢,操作烦琐,不适于大量样品的测定。本文根据示波极谱法具操作简便,灵敏度高等特点,建立了示波极谱法测定食品中赤藓红的分析方法。该法灵敏准确,简便快速,样品加标回收率为:85.4%～102.0%,方法精密度RSD在0.31%～2.60%之间,结果令人满意。1实验部分1.1样品前处理1.1.1JP-303型示波极谱仪成都仪器厂1.1.2三电极系统滴汞电极、饱和甘汞电极、铂电极1.1.3底液0.25mol/L乙酸钠-1.40mol/L乙酸(pH3.6)缓冲液。1.1.4盐酸、三正辛胺、正丁醇、正己烷、乙酸1.1.7赤藓红标准溶液(1mg/mL)国家标准制剂厂以上所用试剂均为分析纯,使用去离子水。1.2.1饮料、配制酒类取5.00～10.00mL,放入250mL烧杯内,含CO2、乙醇的样品需加热驱除。硬糖、蜜饯类,淀粉、软糖类:取5.00～10.00g粉碎样品,放入250mL小烧杯中,加水30mL,温热溶解,用醋酸调至4.0左右。巧克力豆及着色糖衣制品:取5.00～10.00g放入250小烧杯中,用水反复洗涤至样品无色为止,合并色素漂洗溶液为样品溶液。1.2.2液-液分配法提取色素将制备好的样品溶液放入分液漏斗中,加2mLHCl、三正交胺、正丁醇溶液(5%,V/V)10～20mL,振摇提取,分取有机相,重复提取至有机相无色,合并有机相,用饱和硫酸钠溶液洗2次,每次10mL,分取有机相,放入蒸发皿中,水浴加热浓缩至10mL,转移至分液漏斗中,加60mL正己烷,混匀。加氨水(2%,V/V)提取2～3次,每次5mL,合并氨水溶液层,正己烷洗2次,氨水层加乙酸调至中性,水浴蒸干,加水定容至5mL。1.3.1极谱条件:取适量上述样品提取液0.10～1.00mL于10mL具塞比色管中,加入底液至10.0mL,混匀,倒入电解池中测定。三电极系统,阴极二阶导数扫描,超始电位-350mv,于-570mv记录极谱导数波高。1.3.2标准曲线制备取赤藓红标准0.00,0.50,1.00,2.50,5.00,10.0,20.0,50.0ug于10mL比色管中,按1.3.1进行测定。2提取方法的确定对初步处理后的样品溶液,实验4种提取方法:羊毛绒染色法、聚酰胺吸附法、氧化铝吸附法和液-液分配法。结果表明:由于赤藓红为水溶性酸性色素,不能用酸水洗涤,故前3种提取方法提取效率低,干扰严重。而后者回避了酸液洗涤问题,提取效果好。2.2po4-1缓冲液体系实验了3种底液(1)0.01mol/LNH4OH-NH4Cl(pH8-9);(2)0.06mol/LKH2PO4-0.005mol/LKH2PO4(15.8);(3)0.25mol/L-1.40mol/L乙酸(pH3.6)缓冲液。发现前两种缓冲体系中赤藓红均不出峰,但在第3种体系中,赤藓红可于-568mv～-570mv处产生灵敏极谱波,峰形、峰高良好,见图1。故选定0.25mol/L乙酸钠-1.40mol/L乙酸(pH3.6)作底液。2.3其他色素的干扰测定0.5ug/mL赤藓红标液时,于其中加入4倍日落黄、柠檬黄、笕菜红、胭脂红、亮蓝标液,前4种色素在该底液中均不出峰,无干扰。亮蓝在此底液中会产生灵敏极谱波,但其峰电位为-770mv～-776mv左右,见图2,故无干扰。加入100ppm苯甲酸、糖精、山梨酸、维生素C、柠檬酸、蔗糖,均无干扰。由于样品经过液-液分配提取,使用有机试剂和去离子水,故可不考虑金属离子的干扰。2.4非线性区域和精度按1.3.2作标准曲线得直线回归方程y=7.23x+4.961,r=0.9999,线形范围为0～5mg/kg。精密度见表1。2.5方法的检出限和测定下限以0.05ug/mL赤藓红标准溶液,在不同时间内重复测定21次峰电流值为4.5392nA,标准差(Sb)为0.04543,按IUPAC规定,以L=3·Sb/b(斜率)计算,本法检出限为0.01862u