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组织学与胚胎学的学习同学们好!9/14/20231医学课件欢迎同学们参加
组织学与胚胎学的学习同学们好!8/7/202
绪论histologyandembryology河北医大组胚教研室:李陈莉9/14/20232医学课件绪论histologyandembry一、组织学的研究内容组织学(Histology)定义:是研究正常机体的细微结构及与其机能的关系的学科,包括细胞、组织和器官系统3部分。9/14/20233医学课件一、组织学的研究内容组织学(Histology)8/7/20研究内容:包括细胞、组织、器官系统细胞是人体形态结构的基本单位,是一切生物体新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态学基础。特点:形态各异、大小不等:人体具有许多形态各异、大小不同的细胞,参与机体的各种机能活动。各种细胞在机体内相互调节、相互协同,以维持级机体的生命活动。9/14/20234医学课件研究内容:包括细胞、组织、器官系统细胞是人体形态结构的基本单组织(tissue)组成:由一些形态相似、功能相近的细胞
和细胞外基质所组成。分类:上皮组织结缔组织肌组织神经组织。9/14/20235医学课件组织(tissue)组成:由一些形态相似、功能相近的细胞基本组织—上皮组织—结缔组织—肌组织—神经组织9/14/20236医学课件基本组织—上皮组织—结缔组织—肌组织—神经组织8/7/202器官和系统(organandsystem)器官:由4大基本组织有机地组合形成器官。系统:多个器官协调配合完成一定的生理功能形成系统。如:口腔、食道、胃、肠均由不同的组织发育、分化和结合而成,具有不同的形态结构特点,但却执行着共同的功能-消化食物、吸收营养、排出糟粕。9/14/20237医学课件器官和系统(organandsystem)器官:由4大基
胚胎学(embryology)定义:是研究人体发生和生长规律的学科。研究内容:包括生殖细胞发生、受精、胚胎发育、胚胎与母体关系、先天性畸形等。9/14/20238医学课件胚胎学(embryology)定义:是研究人体发生和生长规在医学中的地位组织学与胚胎学是一门医学基础学科,与基础各个学科和临床各科都有一定联系。尤其与解剖学、病理学、生理学、生物化学、免疫学均有密切的联系。胚胎学为妇产科学、男性学、生殖工程学、儿科学等临床学科提供必要的基础知识,也是计划生育与优生学赖以发展的学科之一。9/14/20239医学课件在医学中的地位组织学与胚胎学是一门医学基础学科,与基础各个学二、组织学与胚胎学的研究方法(一)常用显微镜光学显微镜(lightmicroscope,LM):光源为普通光线荧光显微镜(fluorescencemicroscope)光源为紫外光或蓝紫光激光共聚焦扫描显微镜(confocalscanningmicroscope)光源为激光电子显微镜(electronmicroscope,EM):光源为电子束,电磁场作为透镜。电子显微镜透射电子显微镜TEM扫描电子显微镜SEM9/14/202310医学课件二、组织学与胚胎学的研究方法(一)常用显微镜8/7/2023光学显微镜基本结构:1.照明灯(Lamp)2.聚光器(Condenser)3.载物台和切片夹(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.推进器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.物镜(Objectives)6.粗细螺旋(Courseandfinefocusknob)7.目镜(Oculars)8.照相机等接口(Connectiontocamera,etc.)9/14/202311医学课件光学显微镜基本结构:8/7/202311医学课件
是一种高光敏度、高分辩率的新型生物学仪器。主要由激光光源、共聚焦成像扫描系统、光学系统和微机图像分析系统四部分组成。可以检测、识别组织或细胞内微细结构及其变化,细胞的受体移动,膜电位变化,酶活性以及物质转运,并以激光对细胞及染色体进行切割、分离、筛选等。(二)激光共焦扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscope)9/14/202312医学课件 是一种高光敏度、高分辩率的新型生物学仪器。主要由激光光激光共聚焦扫描显微镜9/14/202313医学课件激光共聚焦扫描显微镜8/7/202313医学课件透射电子显微镜(transmissionelectronmicroscope)
TEM9/14/202314医学课件透射电子显微镜(transmissionelectron透射电镜照片9/14/202315医学课件透射电镜照片8/7/202315医学课件扫描电子显微镜(scanningelectronmicroscope)SEM9/14/202316医学课件扫描电子显微镜(scanningelectronmicr9/14/202317医学课件8/7/202317医学课件9/14/202318医学课件8/7/202318医学课件普通组织标本制备技术(石蜡切片)标本的制作组织学的标本制作比较复杂,基本包括以下几个步骤:取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等。(二)常用标本的制备技术9/14/202319医学课件普通组织标本制备技术(石蜡切片)(二)常用标本的制备技术8/取材、固定:为了尽可能使所获材料的形态结构接近活体状态,故取材要迅速、准确,得到材料后应及时用固定液固定(fixation)。常用固定液为甲醛、乙醇等,它们可以使蛋白质迅速凝固,防止其分解和变性。脱水、包埋、切片:为使组织与包埋剂相融合,所获得材料需经乙醇或丙酮脱水;为便于将材料切成薄片,需将其包埋在石蜡或火棉胶内,然后再用切片机将其切成厚约5~10μm的薄片。9/14/202320医学课件取材、固定:8/7/202320医学课件9/14/202321医学课件8/7/202321医学课件染色:切片需经染色后方可在显微镜下观察。染色与封片:染色的目的是使组织内不同的结构染上不同的颜色,以增加结构间的反差。染色后在载玻片上滴加树胶,盖上盖玻片,密封保存。9/14/202322医学课件染色:8/7/202322医学课件苏木精、伊红染色常规染色-苏木精(hematoxylin)、伊红(eosin)染色(简称HE染色)技术苏木精:是蓝色的碱性染料,可将细胞核和细胞内的某些酸性物质染成蓝紫色;伊红:是红色的酸性染料,可将细胞质染成粉红色。9/14/202323医学课件苏木精、伊红染色常规染色-苏木精(hematoxylin)、嗜酸性(acidophilia):与酸性染料亲和力强的性质;嗜碱性(basophilia):与碱性染料亲和力强的性质;嗜中性(neutrophilia):对两种染料亲和力都不强。9/14/202324医学课件嗜酸性(acidophilia):与酸性染料亲和力强的HE染色标本嗜碱性嗜酸性9/14/202325医学课件HE染色标本嗜碱性嗜酸性8/7/202325医学课件甲苯胺蓝染色技术是蓝色的碱性染料。将细胞内、外的某些物质染成紫红色,这种染色现象称异染性(metachromasia)。9/14/202326医学课件甲苯胺蓝染色技术8/7/202326医学课件肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色9/14/202327医学课件肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色8/7/2硝酸银、氯化金染色技术
硝酸银、氯化金颗粒可附着在细胞结构的表面而呈棕黑色或棕黄色,常用于显示神经组织。亲银性(argentaffin):银染中,有些组织结构可直接使硝酸银还原而显色。嗜银性(argyrophilia):有些组织结构不能直接使硝酸银还原,必须加入还原剂方能显色。9/14/202328医学课件硝酸银、氯化金染色技术硝酸银、氯化金颗粒可附着在细胞结构银染标本嗜银细胞9/14/202329医学课件银染标本嗜银细胞8/7/202329医学课件冷冻切片技术(frozensectionmethod)目的:避免细胞、组织内某些物质被固定液所破坏,同时使组织变硬,快速得到切片。方法:将新鲜组织投入液氮(-196℃)或固态二氧化碳(干冰,-70℃)内快速冻结,恒冷箱切片机(cryostat)制成冷冻切片。优点:制片迅速,细胞内酶活性和脂类保存较好,常用于酶组织化学染色、免疫组织化学染色。缺点:光镜下质量较差。9/14/202330医学课件冷冻切片技术(frozensectionmethod)目冷冻切片箱9/14/202331医学课件冷冻切片箱8/7/202331医学课件其他技术涂片:血细胞、分离细胞或脱落细胞等可直接涂在玻片上;铺片:疏松结缔组织可撕成薄片铺在玻片上;磨片:牙和骨等坚硬组织可磨成薄片;以上标本再经固定染色后显微镜下观察。9/14/202332医学课件其他技术涂片:血细胞、分离细胞或脱落细胞等可直接涂在玻片上;(三)电子显微镜技术根据分辨率、放大倍数以及功能等不同可分为两种:透射电子显微镜,又称透射电镜或电镜;扫描电子显微镜,又称扫描电镜。9/14/202333医学课件(三)电子显微镜技术根据分辨率、放大倍数以及功能等不同可分为透射电子显微镜技术
光源:电子束。透镜:电磁透镜(线圈)。固定液:戍二醛、锇酸。染色:电子染色,醋酸铀或柠檬酸铅等重金属盐。切片:50-80nm的超薄切片。原理:电子束通过电磁透镜打到样品上,产生透射电子,透射电子打到荧光屏上,产生黑白像。9/14/202334医学课件透射电子显微镜技术
光源:电子束。8/7/202334医学课扫描电子显微镜技术
扫描电子显微镜技术要观察的组织表面形貌,不需制成切片。固定后的标本,在其表面喷镀金,在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构,如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。9/14/202335医学课件扫描电子显微镜技术
扫描电子显微镜技术要观察的组织表面形貌,(三)组织化学与细胞化学(histochemistrycytochemistry)是利用化学试剂与组织细胞内的某些物质呈现化学反应,反应终产物在组织原位形成有色沉淀物或重金属盐沉淀,通过显微镜进行观察。间接观察组织细胞内的化学成分进行定位、定性和定量研究。例如过碘酸希夫反应,简称为PAS反应(periodacidSchiffreaction)该方法是显示细胞内糖原或多糖的一种方法。如用PAS反应显示肝细胞内的糖原。9/14/202336医学课件(三)组织化学与细胞化学(histochemistrycy9/14/202337医学课件8/7/202337医学课件(四)免疫组织化学或免疫细胞化学(immunohistochemistry/cytochemistry)利用抗原、抗体特异性结合的原理,检测组织和细胞内多肽和蛋白质的分布。该方法先将蛋白质或多肽作为抗原,注入某种动物体内,使其体内产生与所注入抗原相应的抗体;而后自其血清中提取该抗体,并以荧光染料或铁蛋白或辣根过氧化物酶等标记;显色的地方就是抗原所在。优点:特异性强、灵敏度高。9/14/202338医学课件(四)免疫组织化学或免疫细胞化学(immunohistoch9/14/202339医学课件8/7/202339医学课件(五)原位杂交技术即核酸(DNA、RNA)的分子杂交组织化学技术,是在转录水平检测基因的活性(mRNA)和基因(DNA片断)的有无。原理:
用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细胞内待测的核酸按碱基配对的原则,进行特异性原位结合,通过对标记物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对含量。9/14
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