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制作者：陈清健1/222/221．蛋白质工程与基因工程比较3/224/225/22请依据上述材料回答以下问题：(1)用于培育绿色荧光小鼠基因表示载体组成必须有开启子、________、________和________等。图中过程②惯用方法是________；过程③利用生物技术是________；在进行过程④前，利用________能够取得数目更多且基因型相同绿色荧光小鼠。(2)GFP基因与目标基因一起构建到载体上不影响目标基因表示，也不影响由目标基因控制合成蛋白质结构与功效，且对细胞无毒性，所以GFP基因能够作为基因表示载体上________。(3)当前科学家们经过________工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程是直接改造GFP分子，还是改造GFP基因？________。该工程基本流程是____________________________。6/22解析：基因表示载体由4部分组成，分别是目标基因、开启子、终止子、标识基因。把目标基因导入动物受体细胞惯用方法是显微注射技术。由受精卵培养得到早期胚胎，这属于细胞培养技术，能够利用胚胎分割技术由一个胚胎取得多个胚胎。CFP基因不影响目标基因控制合成蛋白质结构与功效，且对细胞无毒性，又能够发出荧光，所以能够作为标识基因。蛋白质工程是指经过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，取得各种各样自然界中没有蛋白质。蛋白质工程基本流程：预期蛋白质功效→设计预期蛋白质结构→推测应用氨基酸序列→找到相对应基因脱氧核苷酸序列→修饰(合成)对应基因→表示出对应蛋白质。7/22答案：(1)GFP基因终止子标识基因显微注射法早期胚胎培养技术(细胞培养技术)胚胎分割(2)标识基因(3)蛋白质CFP基因(绿色荧光蛋白基因)预期蛋白质功效→设计预期蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到相对应基因脱氧核苷酸序列→修饰(合成)对应基因→表示出对应蛋白质8/222．单克隆抗体制备中两次筛选(1)第一次筛选是将未融合B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及B­B融合细胞、瘤­瘤融合细胞经过选择培养基淘汰，筛选出B­瘤融合细胞。(2)第二次筛选是将能产生特定抗体B­瘤细胞经过细胞培养用对应抗原检测方法筛选出来。因为从体内取免疫过B淋巴细胞有很各种，形成杂交瘤细胞有很各种，所以需筛选出能产生特定抗体杂交瘤细胞。9/222．阅读《抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)说明书》部分内容，请据此回答以下问题：抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)说明书[组成与性状]本品系用产生抗A、抗B抗体杂交瘤细胞培育上清液配制而成，专供判定人ABO血型用。[使用方法]将本品与受检红细胞盐水混合，按照有没有凝集判定结果。抗A试剂能和A型血、AB型血凝集，抗B试剂能和B型血、AB型血凝集……(略)。[注意事项](略)[保留及年限]使用期一年，保留于2～8℃10/22(1)该定型试剂(单克隆抗体)是经过________技术制备。制备过程中，首先要利用A型血红细胞或者B型血红细胞作为________重复注射给试验动物，一段时间后从试验动物体内提取出________细胞，并诱导其与骨髓瘤细胞融合，通常采取生物诱导剂是_____。之后还需要经过屡次________、________和培养，才能取得足够用于生产单克隆抗体杂交瘤细胞。(2)传统工艺中抗A血型定型试剂是从B型血血清中提取，与传统工艺生产抗A血型定型试剂相比，本试剂突出优点是_______。(3)该试剂保留温度条件苟刻，主要是防止_________________。11/22(4)某中学兴趣小组进行“ABO血型系统基本类型判定”，设计了以下表格，完成表头中a、b设计。血型判定表12/22解析：单克隆抗体制备属于动物细胞工程中细胞融合技术。要取得抗体就要有对应抗原刺激机体免疫系统，这么才会得到所需能分泌特定抗体浆细胞。动物细胞融合普通是采取灭活病毒来诱导。在诱导融合之后要经过屡次筛选和抗体检测才能够得到所需杂种细胞。单克隆抗体优点就是特异性强、灵敏度高。单克隆抗体成份是蛋白质，高温轻易造成蛋白质失活，使抗体失效。依据表中内容就能够推出表头。答案：(1)动物细胞融合(细胞工程)抗原(能产生抗A或抗B抗体)浆灭活病毒筛选抗体检测(2)特异性强、灵敏度高(3)因温度过高造成蛋白蛋分子变性失活(4)a.与抗B血型定型试剂反应(现象)b．血型13/223．与胚胎移植相关几条规律(1)该过程中两次使用促性腺激素，第一次对受、供体进行同期发情处理；第二次用于供体超数排卵。(2)该过程中两次检验：第一次对搜集胚胎进行检验；第二次对受体母牛是否妊娠进行检验。(3)产下犊牛性状取决于所用公牛和供体牛，性别取决于公牛提供何种类型精子，二者与受体牛没相关系。(4)冲卵含义是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子。14/224．怎样区分试管动物与克隆动物15/225.分析克隆动物与供核亲本是否是100%复制？克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少许DNA，即线粒体中DNA是来自于受体卵母细胞。所以，用教材中所述方法克隆动物不是对供核动物完全相同复制。另外，即便动物遗传基础完全相同，但动物一些行为、习性形成与所处环境有很大关系，克隆动物生活环境与供核动物所生活环境不会完全相同，其形成行为、习性也不可能和供核体动物完全相同。另外，在个体发育过程中有可能发生基因突变，产生供体动物没有性状。基于上述三个方面原因，克隆动物不会是供体动物100%复制。

16/226．生物工程技术应用组合(1)转基因植物培育：基因工程＋植物组织培养；(2)转基因动物培育：基因工程＋动物细胞培养＋胚胎移植；(3)核移植(克隆)动物培育：核移植＋动物细胞培养＋胚胎移植；(4)胚胎移植：有性生殖＋动物细胞培养＋胚胎移植；(5)植物体细胞杂交：酶工程＋体细胞融合＋植物组织培养；(6)试管婴儿：体外受精＋动物细胞培养＋胚胎移植。17/223．阅读以下材料并回答相关问题：ω­3脂肪酸是深海“鱼油”主要成份，它对风湿性关节炎以及糖尿病等有很好预防和辅助治疗作用。当前，人们主要经过食用深海鱼肉摄取ω­3脂肪酸，这造成人们过分捕杀深海鱼而严重破坏了海洋生态系统。因为ω­3脂肪酸去饱和酶可在普通猪体内将其富含ω­6饱和脂肪酸转变成ω­3脂肪酸，于是，科学家从一个线虫中提取出ω­3脂肪酸去饱和酶基因，然后将该基因导入猪胚胎干细胞，再将这种胚胎干细胞在体外培养一段时间后植入正常猪子宫，以期得到富含ω­3脂肪酸转基因猪。当前还不知道这些转基因猪肉能不能吃，也不清楚这些小猪长大以后能否保持较高水平ω­3脂肪酸。18/22(1)从线虫中提取目标基因需要特定________酶，此酶特点是__________________________________。(2)构建基因表示载体中，开启子是_______，它位于基因首端，是______酶识别和结合部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。(3)请列举培育富含ω­3脂肪酸转基因猪需利用到三种当代生物技术：_______________________________。(4)用于培养胚胎干细胞培养基中________(成份)通常是用于培养植物细胞培养基所没有。(5)你对培育这种转基因猪有何评价？________________________________。(6)建造海底人工鱼礁是实现海洋渔业可连续发展举措之一，这表示了生态工程所遵照________原理。19/22解析：本题考查基因工程、动物细胞工程、胚胎工程、生态工程以及生物技术安全性关键概念、原理及主要观点。限制性核酸内切酶作用是识别特定核苷酸序列并在特定位点切割DNA分子。从题干可知，培育该转基因猪过程中包括转基因技术、胚胎培养技术、胚胎移植技术。答案：(1)限制性核酸内切(或限制)能识别特定核苷酸序列并能在特定位点切割(双链)DNA分子(