临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件

临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习46、寓形宇内复几时，曷不委心任去留。47、采菊东篱下，悠然见南山。48、啸傲东轩下，聊复得此生。49、勤学如春起之苗，不见其增，日有所长。50、环堵萧然，不蔽风日；短褐穿结，箪瓢屡空，晏如也。临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习46、寓形宇内复几时，曷不委心任去留。47、采菊东篱下，悠然见南山。48、啸傲东轩下，聊复得此生。49、勤学如春起之苗，不见其增，日有所长。50、环堵萧然，不蔽风日；短褐穿结，箪瓢屡空，晏如也。临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法江西省肿瘤医院陈文学检验误差的发生率1997年,一位意大利著名检验专家对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示,约有68.2%的检验误差发生在检验前期,而来自检验中期和检验后期的误差率分别为133%和18.5%。2007年,这位专家又进行了类似的统计,结果显示,检验前期的误差发生率仍高达61.9%我们经常会遇到这种情形：花费大量功夫制作了精美的课件，设计了形式多变的习题，授课时特别注意语言的精炼表达，自认为课堂环节会较为顺利。然而在实际教学中，却事与愿违，达不到预期的效果：学生反应迟缓，进度拖慢，课堂教学成了教师的个人秀。课后认真地分析和反思，才发现失败在于课前没有考虑到学生的学习感受，一味地按照自己的教学思路和设计好的教学程序进行。作为新课改下的新型教师，如何把自己从独占课堂的角色中转换过来，与学生展开平等、民主的对话，使我们的课堂变得更加精彩呢？一、教师是课堂的引导者课堂教学中，师生共同参与，平等互动，教师仅仅是组织者而已，教学是一个灵动、变化的过程。教师要为学生提供自主学习和合作交流的空间与时间，如“个别学习、小组学习、同桌交流”等。教师要随时洞察和把握学生的思维情境，及时调整教学导向。在一次观摩数学示范课“一次函数的图象”的教学中，教师详细认真地讲述着作图象的步骤以及每一步的注意事项，面面俱到。原以为学生会很快地作出指定的函数图象，便一下子叫上四个学生板演，学生们循规蹈矩按照老师教的方法一步一步进行，速度很慢，其活动早已超出了预计的时间，看得出老师很是着急，尽管老师与学生一起参与，活动的场面还是有些混乱，学生的速度还是提不上来，而且作出的图象中出现很多的问题，如坐标轴不是直线、没有单位长度、不标原点，等等。这些细节问题老师根本没时间去发现，最后本节课的重点知识没有突出，难点也没有突破，教学任务草草结束。倘若老师事先让一个学生板演，发现问题，提出问题，解决问题，运用“两点之间有且只有一条直线”这一性质作出函数的图象，并由此获得一次函数图象的性质，节省了时间的同时还使教学得以升华。其实这部分知识学生在七年级时已有认知，教师完全可以交给学生自主学习。在此期间教师要积极主动地创设氛围，发挥学生的主动性、积极性和创造性。教师的“引导”能通过恰当的问题激起学生的好奇心；通过恰当的归纳和示范，使学生理解知识、掌握技能、积累经验、感悟思想；关注学生的差异，引导每个学生都能积极参与学习活动，提高教学活动的针对性和有效性。二、创设适宜的教学情境，为有效课堂营造氛围创设问题情境，活跃学生思维。教师创设情境讲解教学，往往达不到预期的效果，原因是：情境脱离学生的生活实际；情境脱离教学内容；情境只是为了渲染课堂氛围，没有考虑学生的心理需求。因此，如何创设适宜的学习情境，是课堂教学中的一个疑难问题。兴趣是最好的老师。课堂上教师可以用灵活多样的导入方法，创设情境激发学生的学习兴趣。在七年级上册“线段、射线、直线”一节中，教师运用了猜谜语的导入方式：“请同学们猜个谜语，谜底是打一数学术语，‘有始有终’。”，话音刚落，便有学生抢答：“线段。”老师紧接着说出另外的谜语：“有始无终？无始无终？”一下子调动了所有学生的积极性与好奇性，自然地引出了新的课题“线段、射线、直线”，学生们在轻松愉悦的情境下学到了知识。看来适宜的学习情境能够与学生的情感产生强烈的共鸣，使教学达到较好的效果。三、关注课堂生成生成性资源是在教学过程中动态生成的，如师生交流及生生交流过程中产生的新情境、新问题、新思路、新方法等。一个不会教学的老师是给人真理，一个会教学的老师则教人发现真理。面对课堂上新的“生成”资源，作为教师就应该尊重孩子的智慧，呵护孩子的思维火花，让“知识超越教材”，让“教学超越课堂”，从而让教学更加充满活力，课堂变得更精彩。在“一次函数与正比例函数”一课中，老师讲完“一次函数”的一般表达形式：y=kx+b（k、b是常数，k≠0）时，一个学生举起手来，大胆地提问：“老师，为什么k≠0呢？”当时的情景完全出乎老师的意料，在他的预设中没有想到学生提出这样的问题，情急之下这样回答学生：“当k=0时，函数表达式就变成了y=b，在函数的王国里根本就没有它，所以k不能等于0。”所有听课的老师傻眼了，起了争议。课堂应是向未来方向挺进的旅程，随时都可能出现有通道以外的通道和美丽的园景。课堂要动态生成，少不了学生将所想的、所要说的说出来，否则则成了无源之水。然而学生所想，有时是基于独特且富有创造的精彩见解，有时是一种错误理解或是一种暂时难辨真伪的模糊表征，怎么办？教师首先要承认学生思路的合理性，激励学生将这些思路展示出来，让学生感受到成功的喜悦。前者很容易得到教师的激励评价，但对于后者来说，教师倾向于采用否定的简单处理方式。其实，学生错误或模糊的思路，正是反映了他们当前认知上的冲突，或知识迁移上的障碍所在，教师完全可以将其作为洞察、开发学生发展潜能的有效手段，找出某些错误的“合理性”，以满腔热情，殷切期望，及时给予肯定，让学生在由冲突走向和谐的过程中，获得认知上的飞跃，情感上的体验，为课堂营造一个轻松、活泼，充满激情的学习氛围。一、问题提出幼儿心理健康发展的需要：“心理健康”作为一种现代观念是从属于“健康”范畴的一个重要因素。早在30年代美国健康教育学专家鲍尔（W.W.Bauer）就指出：“健康是人们身体方面都自觉良好、活力充沛的状态。”1948年世界卫生组织（WorldHealthOrganization，WHO）在宪章中指出：“健康不仅是免于疾病的虚弱，而且是保持身体、精神上和社会适应方面的完美状态。”这一概念改变了以往健康仅指无生理功能异常，免于疾病的单一概念，明确、概括地指出人的生命活动过程中生理、心理、社会活动等多方面的要求。幼儿期是儿童个性开始形成的时期，因为这个时期个性的各种心理结构成分开始发展，同时，各种心理活动不仅已经结合成为整体，而且表现出明显的稳定的倾向性，形成各人的独特性。现代发展心理学的研究表明，幼儿期是人生历程中生理、心理发展速度最快的时期，一个人心理发展的许多关键期都处于这一阶段。因此，对幼儿实施心理健康教育，不仅有益于形成健康的心理，而且对他们未来的方方面面都将产生很大的影响。据全国22个城市的调查发现，儿童心理行为问题的检出率为：12.97%。上海精神卫生中心对上海市3000名4～6岁儿童的心理调查发现：88%的儿童有不良行为，11%的儿童情绪抑郁、自卑，8.5%的儿童忧郁、紧张。儿童的心理行为问题不仅影响其生长发育和社会化程度，还可能导致其成人期适应不良、违法犯罪和精神障碍。幼儿心理的健康发展与教育环境密不可分，因为这种环境能影响一个人一生的价值定向和爱的方式的生成，然而现实教育本身却越来越缺乏爱心，以至于不是以爱的活动――而是以机械的、冷冰冰的、僵死的方式去从事教育工作。爱的理解是师生双方价值升华的一个因素，但实现它的途径如今似乎已经不是教育，因为现行教育的运用恰恰阻碍了爱的交流。因此，儿童的身心健康和发育成长，已经成为当代教育关注的焦点，为其创设健康、积极、民主的幼儿园教育环境具有十分重要的意义。二、具体实施1.在教学活动中，创设益于幼儿心理健康的教育环境教学环境一个是社会心理环境，一个是物质环境。从心理环境来说在课堂上我们要采取一切手段来形成一种对学生没有心理上压抑、威胁的心理安全的环境，这是进行创新活动的一个前提。另外就是在课堂座位的布置，秧田式的编排方式，横成排竖成行，这种方式最容易突出老师的权威地位，会给学生形成一种相对来说比较大的压力，但是变换一种方式，比如说是马蹄形的，或者是圆形的，也可以是小组型的，四五张桌子围在一起。这种空间形态就决定了人与人之间的平等感在不断加强，教师对幼儿的威胁感大大的降低了。2.抓住契机，创设教育环境教育环境有预设的也有生成的，预设的教育环境创设往往是我们有计划、有目的的，也知道会给幼儿带来怎样的教育效果；而生成的教育环境创设，需要的是教师要有敏锐的洞察力、判断力、果断力、丰富的知识、丰富的教育经验，知道这个教育环境创设将给孩子带来的是什么，会给幼儿留下什么，该不该将这样的活动继续下去，也就是要抓住契机，创设最利于幼儿心理健康发展的教育环境。3.“爱心”――给幼儿创设一种“家”的教育环境从幼儿入园的第一天起，教师就要为他们营造一种尊重、关爱、亲密、快乐的精神氛围。爱孩子，只有爱孩子，才能给幼儿安全感、亲近感，使幼儿保持积极愉快的情绪。教师在与幼儿的接触的过程中，通过微笑、点头、拥抱、抚摸等等方式，使幼儿沐浴在一个如同“家”的氛围中，从而减轻或消除幼儿的惧怕心理和焦虑感。4.给“问题儿童”一个利于其心理健康发展的教育环境在幼儿园，我们经常会遇到一些“与众不同”的孩子，他们有的多动、有的自闭、有的具有“攻击”行为、有的在智力或社会性发展上相对滞后等等，我们经常把这种孩子称为“问题儿童”。孩子是单纯的，孩子又是一个谜，他们有自己独特的理解世界的方式。揭开幼儿行为背后的面纱需要教师在任何时候都要多一点耐心、多一分等待、多一些思考。三、实施后现存的问题1.重视干预、治疗心理问题环境的创设社会的发展，社会生活环境的变化，给幼儿的心理发展带来了巨大的影响，使幼儿心理问题越来越多。现在中小学校已建立了心理咨询室，而且有专人负责，相对来说幼儿园在这方面就欠缺，虽然我国对幼儿的心理健康教育也越来越重视，但还不够，还需要我们创设干预和治疗心理问题的环境。幼儿园要对儿童的发展负责，要本着心理问题早发现、早治疗的原则，不要在小学问题暴露出来再进行干预和治疗。所以教师在进行环境创设时，就要考虑到这些发展上不足或不良的弱势群体，为其提供一个改善他们自身心理素质的环境，如指定专门负责心理健康教育的教师。给有知觉――动作缺陷、感觉统合失调、注意缺陷、记忆缺陷的儿童分别创设适合的环境，进行专门的训练和辅导，以改善提高这些方面的素质，例如：根据沙箱疗法的理论，在幼儿园可以设置一个用于心理治疗的活动室。2.重视家庭教育环境的创设和谐的家庭氛围有利于形成最佳的亲情关系，并促进儿童的心理健康。一个健康的家庭，需要用爱来营造。作为父母，需努力给孩子营造爱的氛围。良好的家庭氛围可使孩子形成活泼好奇、开朗大方、诚实谦虚的品格。家庭成员相互尊重、理解、信任和关心是治家、教子的基本条件。有责任感的家长为了家庭幸福和子女成材，有必要认真研究家庭教育环境与儿童心理健康的知识，创设良好的家庭教育环境以促进幼儿的心理健康。例如：①民主的家庭作风：作为父母要尊重儿童的独立人格，作风民主、和蔼可亲，这对幼儿身心的健康成长将产生极为有利而深刻的影响。②务实的家庭行为：儿童对于一种家庭教育环境的心理承受能力，表现在它对家庭成员形象的适应和接受，父母在家庭生活中扮演的角色最直接地影响着儿童的心理健康。③乐观的家庭情趣：父母乐观、镇静、愉快的情绪对孩子可以产生巨大的感染力，父母要以乐观向上的精神风貌让孩子感到家庭是温馨安全的。目前有些家长对家庭陈设、衣着服饰、吃喝娱乐等很重视，对孩子的身心健康却漠然处之，这是万万不可。3.重视教师心理健康环境的创设随着社会压力的增大，不少人都存在不同程度的心理问题。目前我国正常人群心理障碍的发病率在20%左右。然而，据国家中小学生心理健康教育课题组对我国部分省份168所中小学的2292名教师进行核测结果表明，中小学教师心理障碍发生率竟高达48%！教师作为特殊群体，承担着教书育人的社会责任，如果教师存在较为严重的心理问题，势必会对他们的工作产生诸多消极影响，不仅影响其传道、授业、解惑作用的发挥，而且可能给孩子带来伤害。美国学者Witty指出：教师的病态人格将严重影响儿童的心理健康，教师情绪不稳定的，会导致“问题儿童”人数的增多。因而，教师的心理健康更值得社会广泛的重视。因此，除了教师应加强自我的心理卫生保健，提高自身的心理素质，同时，还应该给教师营造利于教师心理健康发展的环境，要从政策、管理等方面尽可能地为老师创造宽松、愉快的工作环境和生活环境。临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习46、1临床PCR检验标本的采集、处理、保存及核酸提取方法江西省肿瘤医院陈文学临床PCR检验标本的采集、处2检验误差的发生率1997年,一位意大利著名检验专家对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示,约有68.2%的检验误差发生在检验前期,而来自检验中期和检验后期的误差率分别为133%和18.5%。2007年,这位专家又进行了类似的统计,结果显示,检验前期的误差发生率仍高达61.9%检验误差的发生率3正确采集、运送、保存临床标本的重要性质量保证关键性环节■解决涉及实验室检验的医患纠纷的方法之正确采集、运送、保存临床标本4核酸提取的重要性核酸提取是临床PCR检验最为关键的部分■核酸提取的成败关系到临床PCR检验的正确与否临床PQR检验操作中最易出问题的环节核酸提取的重要性5标本采集标本采集时间对扩增检测结果的影响《过早或过晚都可能会出现假阴性结果)标本采集部位的准备适度消毒)■标本的类型和采集量(衣原体上皮细胞)采样质量的评价(评价方法:内眼观察、显微镜下观察和化学分析)采样及运输容器(一次性无菌器材,防腐剂,抗凝剂)■标本采集中的防污染(一次性无菌容器,防止混入操作者头发,表皮等,如玻璃容器要高压灭菌)标本采集6标本运送■样本一经采集,则应尽可能快的送至检测验室■样本中如加入了适当的稳定剂,如用于RNA测定加入GITC的血清(浆样本和用于DNA测定的EDTA抗凝血等则可在室温下运送或邮寄■实验室应根据待测靶核酸的特性,对各种临床样本的运送条件作出相应的规定。标本运送7临床标本的处理和保存血清(浆)全血外周血单个核细胞痰棉拭子脓液体液乳汁组织临床标本的处理和保存8血清(浆)DNA测定,可按照一般的血清标本处理程序,对测定影响不大。■RNA测定,标本的获取和保存方式对测定结果,可能有决定性影响。最好是使用EDTA抗凝严禁使用肝素,因其对PCR扩增有抑制,且很难在核酸提取过程中完全去除全血标本,抗凝后6小时内分离血浆,如使用血清标本需尽快(2小时内)分离血清,标本的短期1~2周)保存可在-20℃下,较长期保存应在70℃下血清(浆)9全血■以全血作为待测标本时必须注意抗凝剂的选择,一般使用EDA-Na或枸椽酸钠,不可使用肝素。全血样本如用于DNA提取检测可4℃下短期保存如用于RNA检测,则应在取血后,尽快提取RNA。全血10外周血单个核细胞外周血单个核细胞可从抗凝全血制备,主要有两条途径,一是使用淋巴细胞分离液分离制备;二是使用红细胞裂解液,裂解全血中的红细胞,经生理盐水数次洗涤,即可得到单个核细胞。■外周血单个核细胞如暂不提取核酸可保存于-70℃C下外周血单个核细胞11临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件12临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件13临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件14临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件15临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件16临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件17临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件18临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件19临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件20临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件21临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件22临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件23临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件24临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件25临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件26临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件27临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件28临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件29临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件30临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件31临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件32临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件33临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件34临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件35临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件36临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件37临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件38临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件39临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件40临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件41临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件42临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件43临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件44临床PCR检验标本的采集处理保存及核酸提取方法讲解学习课件4