人参花生药学及炮制配伍研究（可编辑）

学校代号10199学号20082703055Theresearchofpharmacognosy,processingandcompatibilityoftheginsengflower王淑敏教授论文提交日期2011年5月分类号密级UDC编号Theresearchofpharmacognosy,processingandcompatibilityoftheginsengflower敏教授(长春中医药大学)论文提交日期：2011年5月论文答辩日期：2011年6月论文作者签名指导教师签名留并向中国科学技术信息研究所送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借中文摘要1英文摘要2文献综述51.2挥发油类51.4蛋白类61.5黄酮类61.6生物碱类61.8绿原酸61.9其他类成分63.1人参花苹果汁保健饮料的研制73.2人参花蓝莓汁保健饮料的研制73.3人参花蕾在碳酸饮料中的应用73.4人参花菊花复合清凉饮料的研制73.5人参花可乐保健饮料的研制74人参花的抗氧化作用研究85人参花的炮制研究86人参花的药理作用研究86.1安全性的研究86.2抗氧化作用的研究86.3抗肿瘤作用的研究86.4抗休克作用的研究96.5抗疲劳作用的研究93小结466.6抗衰老作用的研究97发展前景9第一章人参花的生药学研究112.1人参花的显微鉴定132.2人参花中总皂苷的薄层鉴定142.3人参花花蕾、花托、花柄中皂苷的研究152.5人参花中水分的含量测定232.6人参花中灰分的含量测定232.7人参花中多糖的含量测定242.8人参花中蛋白质的含量测定262.9人参花中黄酮的含量测定272.10人参花挥发油的含量测定282.11人参花提取物总抗氧化作用的研究292.12人参花提取物对DPPH自由基清除作用的研究312.13高效液相色谱法分析人参花提取物对DPPH清除作用的研究342.14人参花提取物对超氧阴离子02-自由基清除作用的研究392.15不同溶剂提取人参花皂苷的含量测定432.16人参花提取物对急性胃溃疡的作用研究44第二章人参花的炮制研究482实验部分482.1人参花的前处理--人参花的高温高压转化482.2炮制后人参花总皂苷的薄层鉴定492.3炮制人参花总皂苷含量测定502.4RRLC分析炮制后人参花中皂苷成分的变化512.5炮制后人参花中人参皂苷的RRLC-Q-TOF分析572.6炮制后人参花中黄酮的含量测定602.7转化前后人参花中多糖的含量测定612.8转化后人参花中蛋白质的含量测定633小结64第三章人参花的配伍研究662实验部分662.1配伍前人参与人参花中皂苷的含量测定662.2配伍后人参与人参花中皂苷的含量测定682.3人参、人参花与黄芪、麦冬配伍前后皂苷的含量测定结果683人参、人参花与黄芪、麦冬配伍后药理作用研究703.1小鼠游泳实验和耐缺氧实验703.2小鼠耐高温及耐寒实验713.3实验结果724小结与讨论73目的：本文"人参花生药学及炮制配伍研究"主要对人参花生药学、炮制前后人参皂苷含量的变化以及其它化学成分含量的变化含量变化及其配伍后药ABSTRACTPurposeThesubjectofStudyonpharmacognosyprocesscompositioncontentbeforeandaftertheprocessing,compatibility.MethodweuseUltravioletspectrophotometrytodetermineinbud,handleandreceptacleofginseng.TodeterminetheginsenosidebeforeandafterginsengflowercompatibilityofmedicineswithHighandtotalantioxidabilityaneffectofginsengflowereluateinacutegastriculcer.Result:ThecontentofbasiccomponentofginsengflowerhasabigchangebeforeandafterprocantioxidabilitybutantioxiprophylaxisandtreatmenttheacuOphiopogonisdosen'timprovetheimmunityofthelittlemouseinswimmingandbear-anoxiaexperiment,butitimprovedtheimmunityofthemouseinthermostabilityandcold-resistantexperimenttoacertaindegree.Conclusion:Thepurposeofthisexperimentisstudyonpharmacognosy,processing,compatibilityandestablishofasimple,easymethodofcompositionanalysisofginsengflower,laythefoundationfordeeperstudyoftheginsengflowers.Keyword:ginsengflower,processing,chemicals,antioxidant,pharmacologyRRLCRapidResolutionLiquidChromatography高分离度快速液相色谱TimeofFlightMass高分离度快速液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱UVUltraviolet紫外可见分光光RSDRlativeStandardDeviation相对标准偏差花中的总皂苷含量比人参中总皂苷含量高许多倍，并对"人参的药用价值最高部人参皂苷是人参生理活性主要物质的基础，也是总量的37.06%,其次是硬脂酸约为17.77%[7]。人参花挥发油的化学成分主要有白质提纯的研究。经测定发现，人参中含有18%蛋白质苷0.26%~0.43%[22]。1.7脂肪酸等，其中亚油酸在不饱和脂肪酸中含量最高，而饱和脂肪酸中棕榈酸含量最高通过对人参花中绿原酸的含量测定，人参花中含有绿原酸量应不少于2人参花茶提高免疫力、美容养颜等保健作用，被世界上许多权威机构认定为"免疫保健的3.1人参花苹果汁保健饮料的研制任保国等人[25]对人参花苹果汁保健饮料的研制中，利用人参花丰富的陈长武等人[26]对人参花蓝莓汁保健饮料的研制中，利用去苦技术对人孙鸿雁等人[27]对人参花蕾在碳酸饮料中的应用研究中，经过对人参花林和兴[28]对人参花菊花复合清凉饮料的研制中，采用人参花浸提液中3.5人参花可乐保健饮料的研制分发挥了人参花的保健作用，调节改善身体亚健康状态和增进人体保持健康状4人参花的抗氧化作用研究究，其结果表明人参花对羟基自由基具有一定的清除能力，有很好的开发价值5人参花的炮制研究熟后用金属针横向刺入，浸入浓糖汁晒干后形成的糖参以及人参置蒸笼内100℃蒸制2~3小时后晒干而形成红参[31]。经药理作用研究发现，人参的不同炮制品6.1安全性的研究物90天喂养后血生化指标没有发生异常，人参花蕾提取物通过降低丙二醛MDA6.3抗肿瘤作用的研究王本祥等人[36]对人参茎叶和人参花皂苷抗肿瘤作用的研究中，其结果邢德君等人[39]在研究人参花蕾皂苷对失血性休克犬心、肝、肺组织超氧化物歧化酶SOD及5种金属元素含量影响的实验中，采用犬复制失血性休克的6.5抗疲劳作用的研究林楠等人[40]在人参花提取物抗疲劳作用的6.6抗衰老作用的研究参皂苷Rg1促智信号转导途径研究，进一步从分子基础方面解释了Rg1促智作用使G-Rg1可能通过cAMP-PKA-CREB信号通路发挥其促智作用。经过国内外学者的研究发现，人参最高部分的药用价值是人参花蕾而不实验研究花序中央的小花蕾疏掉1/3~1/2,同时将花茎上的散生花及不留种的花全部疏掉，疡发生率的增高[50-52]。因此预防胃溃疡的发生或者降低胃溃疡的发生率具有很重要的意义。有文献报道，红参70%甲醇提取物对幽门结扎性和5-羟色胺性胃溃疡发生均有抑制作用[126]。本实验以人参花不同提取液对无水乙醇所致小鼠系2008年7月花期采摘后，经长春中医药大学王淑敏教授鉴定为人参花。高效液相色谱仪(Agilent1200);METTLETOLEDO型电子天平(瑞勒-托立多公司);DZF-6050型真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司);见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);显微镜(上海天省仪器有限公司);DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱(上海-恒科学仪器有限公司);旋转薄膜蒸发仪(EYELA-OSB-2100);高速中药粉碎机(浙江省永康市溪岸五金药具厂);MilliQ超纯水器(美国Millipore公司)±20g,健康昆明小鼠，雌雄各半，体重18±5g,由吉林大学基础医学院动物实验2.1人参花的显微鉴定2.1.1人参花粉末临时装片的制备[53~54]2.1.2人参花的显微镜观察鉴别图1-2花粉粒图1-3木栓细胞图图1-4草酸钙簇晶图1-5导管图1-6树脂道2.2.1样品溶液的制备[55~63]分别称取人参花、生晒参、120℃蒸制人参、100℃蒸制人参各0.9g,粉丁醇萃取4次(每次30mL),回收正丁醇至干，用少量甲醇溶解，定容至5mL容量瓶2.2.3人参花薄层鉴别结果如图1-7图1-7人参花薄层鉴别图1-生晒参2-人参花3-西洋参花4-人参蜂花粉5-红参(120℃)6-红参通过人参花薄层图可以看出，人参花除了具有含有与生晒参相同的紫色2.3.1供试品溶液制备[64~67]人参花、人参花花蕾、人参花花托、人参花花柄样品制备样品于60℃干燥1h,碾碎，过60目筛，准确称取四分样品1.5g,分别按1:15固液人参样品制备将人参粉碎，过60目筛，准确称取人参粉末1.5g,分别按1:15固液比加对照品溶液制备醇制成每毫升溶液中分别含11.8mg、16.0mg、24.0mg、7.00mg、3.5mg、3.6mg2.3.2色谱条件乙腈B-水A;梯度洗脱(0min,20%B;0~15min,20%~35%B;15min~17min,35%B);流2.3.3RRLC色谱结果对照品色谱图如图1-8图1-8对照品RRLC色谱图供试品色谱图如图1-9图1-9样品RRLC色谱图a人参根b人参花c人参花花蕾d人参花花托e人参花花柄1.Re2.Rf3.Rb14.Rc5.Rb26.Rdr0.99902.3.4方法学考察人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rd的回归方程如表1-1。表1-16种人参皂苷标准曲线人参皂苷Rb2人参皂苷RdY262.19X+22.39Y255.45X+16.775Y304.51X-47.276r0.9990r0.9999r0.9990r0.9999精密度实验0.27%~2.46%、2.86%~4.取上述已测知含量的样品各6份，每份0.5g,精密称定，分别按相当于药材中人参皂苷Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd100%的量加入混合对照品溶液，按"供试品溶液制备"方法进行处理并测定，求得回收率平均值为98.5%~100.08%、98.9%~99.6%、98.3%~99.2%、98.5%~100.03%、98.3%~99.8%、98.9%~99.8%。测得人参皂苷Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd的RSD为3.86%~4.98%、4.28%~4.86%、2.3