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文档简介

2023/9/129:551初代培养外植体选择外植体灭菌外植体的类型2023/9/129:552顶芽和腋芽叶片花蕾变态茎芽2023/9/129:553◆⑴选择优良的种质(一)外植体的选择◆⑶在生长开始的季节选取◆⑷选择生理状态良好的材料

◆⑸选择合适的外植体大小◆⑹材料生长健壮、无病虫害◆⑵确定合适的取材部位2023/9/129:554★半木质化枝条2023/9/129:555★刚长出的嫩叶◆未张开的花蕾2023/9/129:556外植体消毒灭菌技术⑴

流水冲洗;

在超净工作台上用70%~75%的酒精浸泡数秒,具体时间因外植体的部位和年龄而定,一般30~60s左右;⑶

用灭菌剂进行灭菌,时间一般8~10min;常用的灭菌剂有0.1%的升汞(氯化汞)

、2%次氯酸钠和10%次氯酸钙。⑷

用无菌水冲洗3~4次。2023/9/129:557材料表面消毒灭菌①70%酒精浸泡10~30s②消毒剂处理③无菌水冲洗3~4次

灭菌原则:杀死材料表面的全部微生物,又不损伤或只轻微损伤植物材料。

材料浸没灭菌液中茎段剪成1~2个茎节大小,要将上部及基部各切下一部分,按其生长方向插入培养基中。2023/9/129:558①茎段培养②叶片培养叶片修剪成1cm×1cm大小,并要在叶片周围划出伤口,叶面朝上平铺在培养基上2023/9/129:559※

如何提高外植体的灭菌效果?⑴外植体的预处理:①室内培养②喷杀菌剂③套袋和修剪④催芽

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