实验四小鼠精子畸形试验课件

RIM食品专地3经口急性毒性实验实验且的食品李学安实验内容实验材料实验步骤实验结果院系:生化环院结果分析任课老师:吴雨龙任课班级:09食品、行09食品上一张下一张照顾习开始衷〓南京庄学院RIM1宗验唧小鼠羲子形试RIM实验且的实验内容精子畸形试验是检测受试化学毒物能实验材料否破坏哺乳动物精子正常形态的实验方法。实验步骤实验结果通过实验,学习和掌握小鼠精子畸形试验结果分析的原理和步骤。上一张下一张照照顾开始衷〓南京庄学院宗验唧小鼠羲子形试2RIM3求经口急性毒性实验精子畸形是指精子的形状异常和异常精子数量的增多。生殖系统对化学毒物的实验且的实验内容作用十分敏感,在其他系统还未出现毒性卖验材料反应前,生殖系统可能已出现了损害作用实验步星正常情况下,哺乳动物的精液中也存在少实验结果结暴分新量的畸形精子,但在某些化学毒物的作用下,特别是在可引起生殖细胞遗传性损伤K的化学毒物作用下,哺乳动物睾丸产生的上一张下一张畸形精子数量可大量增加。因此,可以用照顾习开始衷〓南京庄学院RIM3RIM3求经口急性毒性实验检查雄性动物接触化学毒物后精子畸形率的高低,来反映该化学毒物的生殖毒性和实验且的对生殖细胞潜在的致突变性。实验内容实验材料化学毒物引起精子畸形的机制尚未完卖验步全清楚。正常情况下,精子的成熟和正常数果分形态发生过程受多种基因调控,一旦这些基因中的一个或多个在化学毒物的作用下国发生突变,就会导致畸形精子数量的大量上一张下一张增加。一般认为,常染色体上的基因控制照顾习开始衷〓南京庄学院RIM4RIM3求经口急性毒性实验精子畸形,Y-性连锁基因控制畸形精子的表现。某些特异的染色体重排,如性、常实验且的实验内容染色体易位,是化学毒物诱发哺乳动物畸实验材料形率增高的主要机制实验步骤由于精子畸形有可能影响生殖。因此,实验结果结果分析当受检物引起精子畸形率增高,即使不定是化合物诱发生殖细胞突变的结果,但也表明受试物直接或间接损害精子,从而上一张下一张可能影响生殖。照顾习开始衷〓南京庄学院RIM5RIM3)经共经口急性毒性实验实验动物:体重18-22g小鼠。实验且的验内>实验景材:实验材料灌胃针、注射器5套、眼科剪、眼实验步骤实验结果科镊、显微镜、饲养笼等结果分析实验试剂:磷酸盐缓冲液、生理盐水、无水乙上一张下一张醇、2%伊红水溶液、甲基磺酸甲酯照顾习或甲基磺酸乙酸或环磷酰胺开始衷〓南京庄学院RIM6RIM3去步康经口急性毒性1.动物选择成熟的大鼠、小鼠均可使用。由于实验小鼠较为经济,且有大量实验证实小鼠在该试验系统中对化学毒物最为敏感,故一般采用雄实验且的性小鼠,年龄宜在6-8周实验内容2.剂量与分组试验至少应设3个以上剂量组,并实验材料同时设立阳性对照组和阴性对照组。接触化学实验步骤实验结果毒物后每组至少应存活5只动物。最高剂量组5d结果分析总剂量应能使部分动物死亡。一般可采用LD50的2-4倍剂量,或预先给予化学毒物的LD50,以求得最高总剂量,然后以它的上张下一张1/2(或1/5、1/10)作为下一剂量组的接触剂量,依此类推。开始衷〓南京庄学院RIM7RIM3)实验经口急性毒性阳性对照可用环碎酰胺20mg/kg或甲基磺酸甲酯实验75mg/kg或甲基磺酸乙酯60mg/kg,进行腹腔注射,每天一次,连续5d。阴性对照选用给予相实验且的同体积的溶剂。实验内容3.染毒与采样可采用一次或每天一次连续5d的实验材料实验步骤方法进行染毒。染毒途径多用腹腔注射,也可实验结果采用与人体实际接触化学毒物相同的途径,如结果分析经口、吸入和皮肤接触等一般认为精原细胞后期或初级精母细胞早期对化学诱变剂较为敏感,在接触化学毒物后4上-张下张5周精子畸形率最高,故选择在第一次染毒后第HH35进行采样,也可在染毒后第1、第4和第10周开始结束二南京庄学院RIM8经口急性毒性分三次采样,或者在染毒后每周采样一次,连续实验进行动态观察,直至精子形态恢复正常。实验且的4.制片用颈椎脱臼法处死小鼠,剪开腹腔,分实验内容离并摘取双侧附睾,将附睾放入盛有约3m1磷酸实验材料盐缓冲液或生理盐水的小平皿中,以眼科剪将实验步骤附睾尾剪成小块,用吸管将悬浮液轻轻吹打5实验结果6次,静置3-5min,用四层擦镜纸滤除组织碎结果分析片,吸取此精子悬液滴于清洁載玻片上,均匀推片,待玻片晾千后用甲醇固定5min,干燥后即可镜检观察精子形态。也可用2%的伊红水溶上一张下一张液染色1-2h后再作镜检照顾习开始衷〓南京庄学院经口急性毒性分三次采样,或者在染毒后每周采样一次,连续9经口急性毒性5.阅片在高倍镜下检查精子形态,可加上蓝色或实验绿色滤光片。每只小鼠检查完整的精子200-500个,每个剂量组至少检查1000个精子。精子畸形实验且的主要表现在精子的头部,可分为:无钩、香蕉形、实验内容无定形、双头、双尾、尾折叠及胖头等形态实验材料实验步骤头部重叠或全部重叠的精子、无尾精子不进行实验结果计数。结果分析上一张下一张照顾习开始衷