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磷酸化TMT蛋白组学的具体步骤及方法磷酸化是生物体内重要的蛋白质修饰种类,与酶活性、信号传导等多种极为重要的生物过程相关。因为含量很低,磷酸化信号大规模分析前一般需要先将其富集出来。目前磷酸化肽段的富集方式有很多种,TiO2是其中最成熟的一种。磷酸化TMT是将TMT技术以及TiO2对磷酸化肽段的强亲和力联合起来,对磷酸化肽段进行定量分析。技术流程E?rr^7-3骑nipl朋TreatKIs^AtoS«mpl时■4 _2_二^3?wunwuOrnaUiEi,RBdkKILAlkyfalQ&TrypatOkQCltIreai„PrecessrUri2Sruntmkri?tmp-imJTfctF*liiJnVnTMT扁JnJMV-331WJPhosphopeptidesenrichment55Ez'.二7Z0技术原理1.TiO2在酸性条件下与磷酸化肽段具有强亲和力,碱性条件下又可将磷酸化肽段洗脱,从而通过调节PH而将磷酸化肽段富集并洗脱下来;2.TMT定量原理见TMT宣传页面。
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