小柴胡汤的现代实验研究

小柴胡汤的现代实验研究

小柴胡汤是东汉张仲景的《伤寒论》。这是中医与邵阳的经典方剂。《伤寒论·辨少阳证脉证并治》曰:“伤寒五六日,中风,往来寒热,胸胁苦满,默默不欲饮食,心烦喜呕,或胸中烦而不呕,或渴,或腹中痛,或胁下痞硬,或心下悸,小便不利,或不渴,身有微热,或咳者,小柴胡汤主之。”自张仲景创立小柴胡汤后,经历代应用,经久不衰。经现代实验研究证实小柴胡汤具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、保肝、抗菌等药理作用,从实验方面为小柴胡汤找到了证据。本文对近年来小柴胡汤的药理研究进展综述如下。1关于循环系统疾病的实验研究1.1对hbv的药物组方温志坚等研究提示柴胡汤提取物在体外有一定的抗HBV活性。倪勤等则通过实验研究显示小柴胡片在无体内免疫系统的参与下具有直接抗HBV活性,其中发挥作用的药物成分是柴胡、黄芩和甘草,组方在抗HBV方面较单味药更加优越。李建蓉等采用RT-PCR半定量法检测重组体PBK-HCVmRNA的表达量,进行小柴胡汤抗HCV的体外实验,结果小柴胡汤在75mg/ml是具有抗HCV作用,它不是抑制mRNA,而是通过调节机体免疫功能发挥作用。1.3小柴胡汤对大鼠肝纤维化模型的抑制作用田字彬等在探讨肝纤维化过程中组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)mRNA的表达及小柴胡汤对其表达的影响中,用体积分数0.40的四氯化碳花生油制备大鼠肝纤维化模型,并用不同剂量的小柴胡汤进行干预,结果显示,小柴胡汤能显著减轻大鼠肝纤维化程度,其可能通过抑制TIMP-1mRNA的表达来发挥抗纤维化作用。1.4指肠给药大鼠胃黏膜损伤的作用国外研究者以SD雄性大鼠为对象进行实验研究,结果小柴胡汤对应激性胃溃疡的发生有预防作用。顾海鸥等发现小柴胡汤水煎液灌胃或十二指肠给药能显著抑制大鼠胃内灌注酸化的牛磺胆酸钠和碱性上部肠液所造成的急性胃黏膜损伤,减少胃黏膜出血点和水肿,经口给药抑制大鼠幽门扩张和十二指肠液返流入胃4W、8W所造成的慢性胃炎的发生率,同时降低胃内胆酸含量。经十二指肠给药能显著抑制胃液、胃酸分泌和胃蛋白酶活性,提示小柴胡汤有较好对抗胃炎作用,其作用可能与降低胃内胆酸含量,抑制胃酸分泌和胃蛋白酶活性等机制有关。1.5改善胆脂停滞国外报道以正常大鼠制作阻塞性黄疸模型,小柴胡汤能解除胆汁瘀滞,并证明给药后的GOT及ALP、TBIL值均有显著改善。2小柴胡汤对正常小鼠免疫功能的影响李罡灿等通过研究显示IL-2(白介素)联合小柴胡汤治疗自体造血干细胞移植后患者的CD4+在移植后第3个月即恢复到移植前的水平,大大提前于对照组,Th1也在3个月基本恢复到移植前的水平,且还在以后的时间段内Th1高于移植前水平。IL-2联合小柴胡汤治疗可以达到降低复发率,提高移植疗效的目的。本结果提示自体造血干细胞移植后的免疫治疗是预防复发提高疗效的关键之一。而IL-2联合小柴胡汤方案是目前临床切实可行的方法,能够使患者的免疫功能早期得以恢复,无病生存时间延长,复发率明显降低。唐小云等研究发现灌服小柴胡汤的正常小鼠的各项指标均有所升高,但除IL-2外,其余与正常小鼠均无明显差异,而灌服小柴胡汤的免疫抑制小鼠的各项免疫指标均明显提高,几乎与正常组小鼠的水平相当(P>0.05),与免疫抑制小鼠相比较差异显著(P<0.01),尤其足TH1型细因子(IL-2和IFN-γ)浓度升高明显,表明小柴胡汤具有生物反调节的作用,可明显增强免疫抑制小鼠的免疫功能,而对正常小鼠免疫功能的增强作用不明显。孙艳等研究提示小柴胡汤对荷瘤小鼠化疗所引起的免疫功能低下有明显的恢复作用,明显促进化疗荷瘤鼠自然杀伤细胞(NK)活性和白介素-2(IL-2)的产生能力。唐小云等通过肌肉注射免疫抑制剂环磷酰胺建立了BALB/c小鼠免疫抑制模型,检测发现该免疫抑制小鼠与正常鼠比较,其T淋巴细胞增殖反应、TH1型和TH2型细胞因子的产生都显著降低,表明该免疫抑制模型已经成功建立,可模拟临床上使用免疫抑制剂治疗患者的免疫状态。进一步通过检测给予小柴胡汤的正常小鼠和免疫抑制小鼠T淋巴胞增殖能力、TH1型和TH2型细胞因子,发现小柴胡汤可明显增强免疫抑制小鼠的免疫功能,而对正常小鼠免疫功能的增强作用不明显。小柴胡汤可以作为免疫调节剂增强免疫抑制个体的免疫功能。唐小云等还发现注射环磷酰胺建立的小鼠模型的脾细胞凋亡率明显升高,这可能是环磷酰胺具有免疫抑制作用的机制之一,而其凋亡率升高可能是通过低表达凋亡抑制基因Bcl-2和NF-κB实现。与免疫抑制小鼠模型比较,给予小柴胡汤的免疫抑制小鼠其脾细胞凋亡率明显降低,同时伴随着Bcl-2和NF-κB表达增加,表明小柴胡汤可能通过促进Bcl-2和NF-κB的表达抑制细胞凋亡来调节机体的免疫功能。同时还发现小柴胡汤对正常小鼠脾细胞凋亡及Bel-2和NF-κB的表达没有明显的影响,提示小柴胡汤可能作为一个生物应答调节剂,促进免疫抑制机体免疫功能的恢复,而对正常机体的免疫功能的影响不大。王文杰和王济实验证实小柴胡汤可使实验性肝损伤小鼠血清IFN-γ含量升高,IL-4含量下降,从而使Th1/Th2免疫平衡失调得到纠正。景浩通过实验表明小柴胡汤可有效地治疗大鼠变应性鼻炎,使大鼠的鼻炎症状好转,使血中CD3升高,CD8降低,CD4/CD8的比值恢复正常,提高红细胞C3b受体花环率及IC(免疫复合物)花环率,增强红细胞黏附能力,提高免疫活性,有效地减少免疫复合物沉积。3荷瘤小鼠的生长梁靓靓等研究发现小柴胡汤能改善荷瘤小鼠的生活状况,提高荷瘤小鼠的生存质量,对肺癌细胞生长有抑制作用。张丰华等研究发现小柴胡汤具有良好的抑瘤作用,量效关系上呈现负相关趋势,中、小剂量效果好,但大剂量效果较差。3.1调节免疫功能近来年的研究表明,TNF(肿瘤坏死因子)主要通过对肿瘤区域血管的影响引起移植肿瘤的出血坏死。同时,TNF能调节免疫功能,诱导针对肿瘤的免疫应答;TNF-α还能诱导敏感细胞的凋亡。茅敏等研究发现小柴胡汤中、小剂量组可明显诱导S180荷瘤鼠单核细胞产生TNF-α,与对照组比较,P<0.05。故可以认为,小柴胡汤的抑瘤机制之一可能与其诱导产生TNF-α有关。3.2细胞免疫监视功能肿瘤发生、发展及复发转移与机体免疫功能的低下有着互为因果的关系,机体免疫系统能够识别并通过细胞免疫机制杀伤肿瘤细胞,免疫系统的监视功能是通过体内免疫活性细胞,包括T细胞、NK细胞等发挥作用。陶金成和陈振德发现柴胡汤能抑制S180瘤细胞的生长,此与其诱导肠管黏膜免疫系统T细胞及NK细胞有关。3.3肿瘤细胞凋亡茅敏等通过体内实验得出小柴胡汤抗肿瘤的作用机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡有关;另一重要作用机制是影响肿瘤细胞周期,使癌细胞阻滞于细胞周期的G0/G1期,即DNA合成期的细胞数减少,造成其增殖指数降低,从而在一定程度上控制了肿瘤的增殖。4脂质过氧化反应现代研究表明,自由基作为体内谢产物是导致机体衰老的重要物质。郑辉等通过实验在一定时间内连续注射D-半乳糖,使机体细胞内D-半乳糖浓度升高,引起细胞肿胀,代谢紊乱,破坏并消耗机体抗氧化防御系统,使自由基脂质过氧化反应加剧,过氧化脂质、脂褐素等增多,各器官系统功能减退,出现与自然衰老相似的生理生化改变。脂类极易在活性氧的攻击下产生快速氧化作用而产生丙二醛(MDA),它与蛋白质或核酸交联后就形成脂褐素(LPF)。本实验结果提示:灌服小柴胡汤后D-半乳糖所致亚急性衰老模型大鼠线粒体肿胀、嵴断裂、空泡样变,内质网肿胀、核膜模糊或核周间隙扩大,核蛋白破坏,核仁边移,脂褐素、溶酶体大小形态不规则等衰老改变明显减轻,这可能与小柴胡汤具有抗自由基损伤(提高超氧化物歧化酶活性、降低MDA及LPF含量),对活性氧的代谢产物有清除作用从而稳定神经元细胞膜系统,保持神经元内环境稳定有关,从而具有一定的抗衰老作用。5fas蛋白的表达郑辉等小柴胡汤可能通过上调内异症大鼠异位内膜腺细胞表面FAS蛋白的表达,增强异位内膜细胞凋亡水平,对异位内膜抑制,提示小柴胡汤治疗大鼠内异症的作用机制可能是通过上调FAS蛋白的表达而促进异位内膜细胞的凋亡。6抑菌环直径袁长津等研究显示小柴胡汤在体外对乙型溶血性链球菌、嗜血流感杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、大肠埃希菌有抗菌作用,抑菌环直径依次为(12.05±0.23)mm、(14.25±0.23)mm、(13.20±0.31)mm、(10.20±0.35)mm、(12.01±0.46)mm;小柴胡汤对上述5种菌的MIC依次为200.00mg/ml、100.00mg/ml、100.00mg/ml、250.00mg/ml、200.00mg/ml。7小柴胡汤的药养和活性作用机理现代实验研究从分子水平、药理学和免疫学等多领域对小柴胡汤加以研究,在多方面取得了进展,为临床应用提供了实验依据,指导临床用于治疗消化系统疾病、肿瘤、变态反应性疾病、感染性疾病和免疫力低下等疾病。但部分实验发现小柴胡汤中小剂量作用优于大剂量,应进一步研究其原因;另外,在实验研究中,找出对某种疾病有治疗作用的有效成分,并将其制成多种剂型,以方便临床应用,其实用意义更大。总之,通过对小柴胡汤所做的药理研究可以更深入的了解其药理作用的机理,从而促进小柴胡汤在临床中的应用,更好地服务于患者。王文杰和王济通过实验证实BCG(卡间苗)和LPS(脂多糖)所致的实验性肝损伤小鼠模型有明显的脾脏T、B淋巴细胞增殖能力降低和脾脏萎缩,小柴胡汤可以显著