小柴胡汤抗不可切除的肝癌的实验研究

小柴胡汤抗不可切除的肝癌的实验研究

小柴胡汤起源于“伤寒论”。这是中医经典方剂之一。对后代广泛用于医学疾病的治疗效果也很好。小柴胡汤为日本正式认定的处方药,也是应用最广的中药之一,国内外学者对该方进行了大量的实验和临床研究,发现该方具有预防和治疗肿瘤的作用。HonsoUSA公司已开展小柴胡汤制剂治疗“不可切除的肝癌”的Ⅱ期临床试验。笔者就近年来的研究进展,作一综述。1和解少阳证组成:柴胡、黄芩、人参、半夏、甘草、生姜和大枣。功用:和解少阳。主治:(1)伤寒少阳症;(2)妇人伤寒,热入血室,以及疟疾、黄疸与内伤杂病而见少阳症者。2肿瘤相互作用机制2.1生物反应调节剂小柴胡汤可通过刺激免疫器官增殖,提高免疫功能等而达到抑瘤作用。董氏认为小柴胡汤为一种生物反应调节剂。其通过对免疫效应细胞的影响,诱导干扰素的产生,及肿瘤坏死因子(TNF)生成,是其防治肝癌的机制。2.1.1小柴胡汤免疫调节作用和泉茂(日)对小鼠示腹腔内给予小柴胡汤后,发现可提高活体内激活巨噬细胞生成NO的能力,提示小柴胡汤具有明显的免疫调节功能。相关实验证明其能激活巨噬细胞、淋巴细胞和补体,能增强巨噬细胞的吞噬功能和抗肿瘤效应,可诱导末稍血淋巴细胞产生干扰素,还能增加肿瘤坏死因子的生成。2.1.2细胞相关的问题陶金成等发现小柴胡汤抑制S180瘤细胞的生长的机理,与其诱导肠管黏膜免疫系统T细胞及NK细胞有关。用小柴胡汤提取物对荷瘤小鼠S180灌胃10d,结果发现小柴胡汤对S180荷瘤鼠三批实验均有显著抑制作用,高剂量抑瘤率42.51%~45.29%,其机理可能与小柴胡汤能诱导荷瘤小鼠肠黏膜T细胞及小肠NK细胞的活性,使大肠的T细胞及,NK细胞显著增加。2.1.3生长生物强化小柴胡汤已被证实是一种有效的免疫调节物。体外研究证实小柴胡汤能增加白介素1β、白介素6、γ-干扰素的生成。山铺昌由观察到小柴胡汤能明显提高癌症患者末梢血单核细胞IL-1B、IL-6及GM-GSF(粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子)的生成,从而提高机体防御功能,这对晚期癌症大有裨益。周真通过对小柴胡汤与TNF、干扰素、细胞白介素关系的研究,认为已经证实的小柴胡汤的抗肝癌作用,与其能够诱导肿瘤坏死因子的产生有着密切关系。而Yamashiki等也发现在体外小柴胡汤可诱导肝癌患者末梢血单核细胞产生肿瘤坏死因子α和粒细胞集落刺激因子,提示肿瘤坏死因子在小柴胡汤的抗肝癌中发挥重要的角色。2.2直接肿瘤抑制作用2.2.1中、小剂量对s期细胞数、s180细胞增殖指数的影响茅敏等通过体内实验发现各剂量组小柴胡汤均可诱导荷瘤鼠S180细胞凋亡,中、小剂量组S期细胞数明显减少,G0/G1期细胞数明显增加,S180细胞增殖指数明显下降。认为小柴胡汤对小鼠肉瘤S180的生长具有抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡及抑制痛细胞增殖周期有关。2.2.2小柴胡汤对大鼠肝胰腺组织中型心理变化的抑制作用小柴胡汤与其有效成分黄芩苷能诱导肿瘤细胞凋亡,松崎佑子(日)认为小柴胡汤有激活肿瘤免疫和直接作用于肿瘤细胞抑制癌细胞增殖作用,其有效成分柴胡皂苷、黄芩苷元、黄芩苷、甘草甜素均有抑制癌细胞增殖的作用。对大鼠肝部分切除前给予300~600mg黄芩苷元,结果证明黄芩苷元组正常肝细胞增殖能力明显增强,表明其具有促进肝再生的作用,对正常细胞和癌细胞有正负双向作用。由于小柴胡汤及其成分与抗癌药同样具有抑制拓扑异构酶的作用,所以认为小柴胡汤可诱导细胞凋亡。神田正道(日)认为小柴胡汤抗肿瘤作用的机制有两个方面①免疫调节作用:能激活巨噬细胞,促进IL21的产生,增强NK细胞的活性,产生抗肿瘤效果;②对肝癌培养细胞增殖的抑制效果:小柴胡汤能诱导肝癌细胞形态改变,并使癌细胞停滞于细胞周期的静止期,而且小柴胡汤全方对肝癌细胞增殖的抑制效果比各种药效成分单独使用时强。2.2.3小柴胡汤浸膏对小鼠血浆et、内皮素的影响内皮素(ET)是由血管内皮细胞等合成的一种活性多肽,最近发现它作为生长因子可以旁分泌和自分泌作用,刺激细胞的异常增生,与肿瘤的发生、发展有关。杨惠玲等通过体内实验,观察到不同浓度小柴胡汤浸膏对小鼠肉瘤S180的明显抑制作用,用小柴胡汤浸膏治疗后小鼠血浆内皮素水平明显降低,达到正常或低于正常水平。提示其作用机制可能与降低荷瘤鼠血浆ET水平有关。张丰华等则发现小剂量小柴胡汤能降低S180荷瘤小鼠肿瘤微血管密度(MVD),不同剂量小柴胡汤能明显抑制VEGF,且存在负相关量效关系,有较明显的剂量依赖性,小柴胡汤小剂量组效果优于其它治疗组,提示适当浓度的小柴胡汤能抑制肿瘤血管的形成。2.2.4细胞癌多药耐药盖晓东等选用对VCR天然耐药肝癌细胞株Be127402为对象来研究柴胡逆转MDR效果与相关的机制,结果表明柴胡具有逆转肝细胞癌多药耐药作用,并与抗癌药VCR有协同作用。柴胡对人肝癌Bel27402细胞株具有多药耐药逆转作用,提高了耐药细胞内的VCR含量,增加了VCR对细胞G2期阻滞作用,抑制了P2170糖蛋白的表达,抑制MDR1ömRNA的表达,提高了TopoÊA的mRNA水平,增加Bel27402细胞内VCR的累计和VCR药效,加强VCR在G2M期的细胞阻滞作用。2.2.5小柴胡汤的机制82羟基22′2脱氧鸟苷(820HdG),是一种通过活化氧的方式形成的DNA加合物,被公认是反映肝癌生成危险性的指标,在用二甲基亚硝胺诱生大鼠肝癌的模型中,小柴胡汤通过抑制820HdG的形成而预防肝癌的生成。3临床应用3.1种预防小柴胡汤致病性的研究种种的研究表明,小柴胡汤在预防肝炎肝硬化患者进展为肝癌方面有一定的作用。OkaH进行的共随访了5年的观察表明,小柴胡汤能使肝硬化患者的肝细胞癌发生率较对照组下降1/3,死亡率下降40%。冈博子的长达5年的前瞻性研究,也发现小柴胡汤具有防止肝硬化向肝癌转化的作用,特别是能降低非乙型肝炎肝硬化的肝癌发生率。Hiroko等对260例肝硬化患者进行配对分组,并观察34个月,结果提示小柴胡汤具有预防或延缓肝硬化患者潜在HCC的发生。在一项小柴胡汤治疗丙型肝炎相关的临床试验中,80例对干扰素耐药的丙型肝炎患者,被分别给予小柴胡汤加非特异性的常规药物或单用常规药物治疗,患者被随访了7年,对照组中有5名患者进展成肝细胞癌,而小柴胡汤组仅1例进展为肝癌。小柴胡汤预防肝癌的发生方面机制尚不明确,可能与其影响机体免疫功能、细胞因子等多环节有关。3.2肺癌病例临床指标赵红鹰进行的研究表明,加用小柴胡汤治疗后的原发性肝癌病例,各项指标优于单用放疗、化疗患者。李世杰进行的前瞻性双盲研究发现,已行肝癌根治术患者用小柴胡片后,肝癌复发率及第二肝癌发生率,均低于安慰剂治疗患者。4副作用在日本,小柴胡汤作为肝硬化和肝纤维化的对症方,在临床上一直广泛应用,然而,小柴胡汤的副作用的确是不争事实。4.1小柴胡汤治疗慢性嘴唇炎“间质性肺炎”是日本单用小柴胡汤及与干扰素并用治疗丙肝后出现过的严重副作用”,并因此引起业界的反思与慎用。在日本,临床医生常用小柴胡汤治疗慢性肝炎,在使用中多不考虑或甚少考虑患者的体质,基本不遵循中医的辨证施治原则而滥用小柴胡汤,而且小柴胡汤一服便是几个月。据报道,小柴胡汤的药物性肺炎多发生在服药两个月以上的患者。因此,应当在中医理论指导下合理地使用小柴胡汤,以策安全。4.2患者自身原因用小柴胡汤治疗肝损害反而引起肝功能恶化的目前已有零星的报道,病例以中老年患者为多,其引起毒副作用的原因可能与患者免疫力低下及一个处方服用时间过程过长有关。5小柴胡汤的临床应用综上所述,小柴胡汤用来治疗肝癌取得满意的临床疗效,显示了中医药临床治病的优势。从分子水平、药理学、免疫学、成分分析等多领域对小柴胡汤加以研究,发现其主要通过机体的免疫功能,从而达到抑制和杀死肿瘤细胞