河北省淡水香港海鸥型菌的分布及耐药性分析

河北省淡水香港海鸥型菌的分布及耐药性分析

香港的海鸥菌(。11.1药物、试剂与仪器头孢哌酮麦康凯琼脂(麦康凯琼脂临用时按配方加入1%葡萄糖和16μg/ml头孢哌酮),MH琼脂(北京陆桥技术有限责任公司),氧化酶试剂、API20NE生化试条和VITEKGNI+鉴定卡(法国生物梅里埃公司),药敏纸片和大肠埃希菌ATCC25922购自中国药品生物制品检定所,以上均在有效期内使用。1.2农业生产品种采集本次样品共采集429份,采样地点按地理位置、城乡及养殖和天然水体分别选择石家庄78份、平山县农贸市场92份、保定市农贸市场49份、满城县集贸市场58份、白洋淀27份和衡水湖125份,采集种类按照当地主要养殖及消费品种,其中草鱼92份、鲤鱼189份、鲫鱼96份、其他52份。采样时间按照淡水鱼的生活习性及市场销售情况,选择3-11月份进行采样。1.3菌株鉴定及培养以无菌操作用棉拭子涂抹鱼肠内壁中下段,直接涂布在含头孢哌酮32μg/ml的血平板及麦康凯平板上,37℃需氧培养48h。挑取可疑菌落接种三糖铁琼脂斜面,37℃需氧培养48h。凡氧化酶及触酶试验阳性菌株进行脲酶和精氨酸双水解酶实验,二者均阳性者接种API20NE及VITEKGNI+进行生化鉴定。1.4菌株标准及验证方法按WHO推荐的K-B琼脂纸片扩散法进行,结果判定标准参照肠杆菌科标准(2005版CLSI/NCCLSM100-S15Vol.25NO.1)。以大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923作为质控菌株。22.1香港海鸥菌分布2.1.1香港海鸥型菌的生长本研究在3-11月期间对淡水鱼香港海鸥型菌进行检测,结果8株香港海鸥型菌的检出集中在7-8月份,3-5月及11月份鱼肠道涂抹物在头孢哌酮血平板上几乎无菌生长,6月份及9、10月份有菌生长但未检出香港海鸥型菌。2.1.2鱼类的阳性率本研究共采集淡水鱼429份,检出香港海鸥型菌8株,总阳性率1.86%(8/429),其中草鱼的阳性率为5.43%(5/92),鲤鱼为0.53%(1/189),鲫鱼为2.08%(2/96),其他淡水鱼未检出(0/52),草鱼的阳性率较高,差异有统计学意义(χ2.1.3阳性率本研究共检出香港海鸥型菌8株,其中石家庄(含平山县)6株,阳性率3.53%(6/170);衡水湖2株,阳性率1.60%(2/125);保定(含满城县、白洋淀)未检出(0/134)。三地区阳性率差异无统计学意义(χ2.2外粘菌素药敏检测结果显示本次分离的8株香港海鸥型菌对万古霉素、头孢哌酮、克林霉素、甲硝唑完全耐药,对多粘菌素B、红霉素、庆大霉素、阿米卡星、四环素、环丙沙星、磺胺、氯霉素、替卡西林/克拉维酸敏感。对氨苄西林、安曲南、头孢曲松、头孢噻吩、头孢呋辛钠、萘啶酸、链霉素部分耐药。见表3。3香港海鸥型菌污染风险香港海鸥型菌最先由港大医学院Teng和Woo等在一名肝硬化病人分离到,随着对该菌的深入研究,表明该菌只存在淡水鱼中,并且该菌阳性率最高的是草鱼和鳙鱼本研究结果与相关的报道基本一致,但阳性率偏低,其中草鱼的阳性率最高,为5.43%(5/92),鲫鱼为2.08%(2/96),鲤鱼为0.53%(1/189),表明在河北省的淡水鱼中存在香港海鸥型菌污染,并且香港海鸥型菌的检出高峰在腹泻病高发的7、8月份,养殖和野生鱼类均有检出,在地域分布上,石家庄和衡水均有检出,保定134份鱼未检出,但不排除香港海鸥型菌污染的潜在风险。香港海鸥型菌引起人群腹泻的途径是通过食入未经煮熟的水产品或在加工过程中交叉污染食物而引起的感染,因此香港海鸥型菌引发食源性疾病的潜在危害非常大,应引起相关部门的重视。本次研究并对8株香港海鸥型菌进行了耐药性检测,结果显示8株香港海鸥型菌对万古霉素、头孢哌酮、克林霉素、甲硝唑完全耐药,对多粘菌素B、替卡西林/克拉维酸、红霉素、庆大霉素、阿米卡星、四环素、环丙沙星、磺胺、氯霉素敏感。对安曲南、头孢曲松、头孢噻吩、头孢呋辛钠、萘啶酸、链霉素、氨苄西林部分耐药。与Lau耐药检测结果同时提示河北省分离的香港海鸥型菌对β-内酰胺类抗生素如氨苄西林以及头孢噻酚、头孢曲松、头孢呋辛等均出现不同程度耐药,由于β-内酰胺酶的产生是致革兰阴性病原