脂溶性抗肿瘤药物有机溶剂的研究进展

脂溶性抗肿瘤药物有机溶剂的研究进展

对于患有肿瘤的药物的外部筛选，应使用有机溶剂溶解已配制的脂溶性样品。溶解样品的有机溶剂应该满足一定的要求,如对样品的溶解性要好,与培养液具有良好的互溶性,在一定的体积分数内对试验细胞毒性尽可能小等。良好的溶解性才能使样品在有机溶剂中溶解后均匀地分散在培养液中,达到试验目的;溶剂的细胞毒性低才能对样品的细胞毒作用做出正确的判断。经资料检索,纪舒昱等研究了甲醇、乙酸乙酯、乙醇、乙二醇、二甲基亚砜(DMSO)、氯仿、丙酮和正丁醇等8种有机溶剂对人肺癌细胞株A549和人肝癌细胞株BeL-7402的细胞毒性11.1肿瘤细胞系统U937、95D、AGS,江苏大学生物技术研究院提供。1.2试验材料和仪器MTT,Sigma公司;DMEM,Gibco公司;新生小牛血清,杭州四季青公司;二甲亚砜(DMSO)、丙酮、甲醇、乙醇、甘油、异丙醇均为国产分析纯;二氧化碳培养箱,Heraeus公司;酶标仪,美国Bioteck公司;96孔培养板,美国Corning公司。1.3免疫消化试验采用MTT法进行测试。对于贴壁性不强的U937细胞,在试验时可直接选用对数生长期的细胞吹打计数,对于贴壁性较强的95D细胞和AGS细胞,试验时用胰酶消化液进行消化,用无血清的培养液离心洗涤两次。分别取对数生长期的U937细胞,95D细胞,AGS细胞,细胞数分别调整为4×1022.16不同体积分数的mtt细胞的毒性有机溶剂作为阴性对照对细胞的毒性不能太大,否则就会遮盖样品的细胞毒性,降低试验的可信度,从表1可以看出,不同的有机溶剂对U937细胞的毒性不同,其中丙酮的毒性最小,即使在体积分数为10%的时候也没有表现出明显的毒性,乙醇和甲醇在体积分数小于1%的时候对937细胞没有明显的细胞毒性,当体积分数大于3%时,随着体积分数的增大而进一步增大;甘油在体积分数小于0.3%的时候没有明显的细胞毒性。DMSO在体积分数<1%的时候对937细胞没有明显的毒性,>3%时候表现出较强的毒性。异丙醇在体积分数<3%时对937细胞没有明显的毒性,但是当体积分数>3%时,毒性迅速增强。对6种溶剂的体积分数与细胞毒性分析表明,在0.1%～10%的体积分数范围内,乙醇对U937细胞的毒性成线性的量效关系,线性方程为2.26mtt-lso对65d细胞的毒性95D细胞株是一株猪肺癌细胞,具有一定的贴壁性。6种有机溶剂对95D细胞株的细胞增殖的抑制作用如表2所示。从表2可以看出丙酮在体积分数<3%的时候对95D细胞没有明显的毒性,在1%体积分数时,丙酮的细胞毒性在6种细胞中是最弱的。乙醇在体积分数<1%时,对95D细胞没有明显的毒性;甲醇在0.3%体积分数以下没有明显的细胞毒性,体积分数在1%～3%时有较弱的毒性。甘油在1%体积分数以下没有明显的细胞毒性,当体积分数>3%时细胞毒性明显增强;DMSO对95D细胞在体积分数为0.1%时就表现出细胞毒性。对6种溶剂的体积分数与细胞毒性分析表明,异丙醇对95D细胞的毒性在0.1%～10%体积分数内表现出线性的量效关系2.36异丙醇和dmso对ags细胞的毒性AGS细胞株是一株人胃癌细胞,贴壁性强。表3列示了6种有机溶剂对AGS细胞株的细胞毒性。从表3可以看出,6种有机溶剂的细胞毒性比较,丙酮对AGS细胞的毒性最弱,在10%体积分数时也没有明显的细胞毒性;乙醇在0.1%体积分数时没有明显的毒性,当达到0.3%以上时就表现出明显的细胞毒性。甲醇在体积分数<1%时,对AGS细胞没有明显的细胞毒性,当>3%时毒性增强;甘油在体积分数>0.3%时就对AGS表现出明显的毒性;异丙醇和DMSO在0.3%体积分数以上具有明显的细胞毒性。对6种溶剂的体积分数与细胞毒性分析表明,异丙醇对AGS细胞在0.1%～1%的范围内细胞毒性表现出线性的量效关系,33.1积分数对细胞毒性的影响在所研究的6种有机溶剂中,丙酮对三种肿瘤供试细胞株毒性最弱,在体积分数为10%时也没有明显的细胞毒性;其次甲醇的毒性较弱,在体积分数<1%时没有明显的细胞毒性,所以在以U937细胞、95D细胞和AGS细胞为研究对象时,建议使用丙酮和甲醇作为弱极性待试药品的溶剂。3.2细胞毒性实验乙醇对U937细胞的毒性在1%体积分数时没有明显的毒性,对95D细胞在0.3%体积分数时没有明显的毒性,对AGS细胞在0.1%时已经表现出明显的细胞毒性;甲醇对U937细胞和AGS细胞的毒性在1%体积分数时没有明显的毒性,对95D细胞在0.3%体积分数时没有明显的毒性,在1%～3%时表现一定的毒性;甘油对U937细胞0.3%时没有明显的细胞毒性,对95D细胞在1%体积分数时没有明显的毒性,对AGS细胞在体积分数<0.1%时没有明显的毒性;异丙醇对U937细胞在体积分数<3%时没有明显的细胞毒性,对95D细胞在0.1%体积分数时就表现出明显的毒性,对AGS细胞在