肠杆菌科课件

医学微生物学(MedicalMicrobiology)第一篇细菌学第九章肠杆菌科Enterobacteriaceae医学微生物学(MedicalMicrobiolo掌握：肠杆菌科的共同生物学特性。大肠杆菌、痢疾杆菌、沙门氏菌的致病物质、所致疾病。熟悉：大肠杆菌、痢疾杆菌、沙门氏菌的生化反应特点。微生物学检查及防治原则。教

学

目

标掌握：教

学

目

标思考：感染性疾病呈现的特征与什么密切相关？肠杆菌的鉴别为何需要使用生化反应？血清学诊断中为何要双份血清？思考：感染性疾病呈现的特征与什么密切相关？伤寒玛丽（TyphoidMary）本名玛丽·马伦（MaryMallon），爱尔兰人，是美国第一位被发现的伤寒健康带原者。玛丽是一个厨师，并因此造成53人感染、3人死亡。但她坚决否认这项事实，也拒绝停止下厨，因此两度遭公共卫生的主管机关隔离，最后于隔离期间去世。伤寒玛丽（TyphoidMary）概念：是一大群生物学性状相似的G-杆菌分布：常寄居在人和动物的肠道内，

亦存在于土壤、水和腐物中。种类：目前已有44个属，170多个种，

其中大多数是肠道的正常菌群，

能引起人类感染的菌种不足20个。概述概念：是一大群生物学性状相似的G-杆菌概述医学上的三种表现①致病菌：少数。如伤寒沙门菌等；②机会致病菌：正常菌群如大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等

③由正常菌群转变而来的致病菌：

由于获得位于质粒、噬菌体或毒力岛的毒力因子基因后而成为致病菌。如引起胃肠炎的大肠埃希菌，医学上的三种表现①致病菌：少数。如伤寒沙门菌等；

沙门菌

福氏志贺菌

埃希菌属沙门菌福氏志贺菌埃希菌属肠杆菌科课件共同生物学特性1.形态与结构

中等大小G－杆菌。大多有菌毛，多数有周鞭毛，（志贺菌除外）少数有荚膜共同生物学特性1.形态与结构2.培养

兼性厌氧或需氧。营养要求一般肉汤培养基均匀混浊2.培养3.生化反应活泼

区别不同菌属和菌种的重要依据之一乳糖发酵试验---是重要鉴别试验

初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌触酶阳性、硝酸盐还原试验阳性、氧化酶阴性

3.生化反应活泼致病菌：不分解乳糖无色小菌落非致病菌：分解乳糖红色菌落致病菌：非致病菌：4.抗原结构

区分属、种和型的重要依据主要有O抗原、H抗原、荚膜抗原具有属、种特异性。

多糖性质，能阻止O凝集现象。具型特异性

4.抗原结构区分属、种和型的重要依据具有属、种特异性。5.抵抗力对理化因素抵抗力不强。

胆盐、煌绿等染料对肠道非致病菌有选择抑制作用。6.变异

易出现变异菌株，其中最常见的是耐药性变异。5.抵抗力6.变异女，21岁，持续3d尿频、尿痛。尿有异味。无发热、腹痛及皮疹。离心尿标本做显微镜检查每个高倍视野见10-15个白细胞和大量革兰阴性杆菌。问题：1）该患者可能感染了何种病原体？2）此病原菌可能源于何处？3）此菌进入尿道的最有可能途径是怎样的？女，21岁，持续3d尿频、尿痛。尿有异味。无发热、腹痛及皮疹

6个种，E.coli最常见最重要

多数是人类肠道中的正常菌群

可成为条件致病菌，引起肠道外化脓性感染

部分血清型，可直接引起肠道感染

重要的模式生物卫生学上的检测指标第一节埃希菌属（Escherichiaspp.）6个种，E.coli最常见最重要第一节埃希菌属（Esc一、生物学性状

G-，短杆菌，有菌毛，不形成芽胞，多数有鞭毛一、生物学性状其他特性：兼性厌氧，营养要求不高生化反应活泼，鉴别肠道细菌的重要依据;乳糖分解试验有鉴别意义

IMViC试验结果为“++--”抗原构造有O、K、H抗原其他特性：+产酸产气不产酸产气（-）+产酸产气不产酸产气（一）致病物质

1.黏附素（adhesin）作用的特异性高二、致病性与免疫性4)紧密粘附素（intimin）EPEC2)集聚黏附菌毛Ⅰ和Ⅲ1)定植因子抗原Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ。ETEC6)I型菌毛（其受体含有D-甘露糖）3)束形成菌毛（Bfp）EPEC5)P菌毛和Dr菌毛7)侵袭质粒抗原蛋白（Ipa）EIEC（一）致病物质二、致病性与免疫性4)紧密粘附素（inti2.外毒素：志贺毒素（Stx）;耐热肠毒素（ST）：激活鸟苷环化酶;不耐热肠毒素（LT）：作用于腺苷环化酶溶血素A（HlyA);内毒素、荚膜、载铁蛋白、Ⅲ型分泌系统等2.外毒素：1.肠道外感染

内源性感染、医源性感染最常见：（1）化脓性感染;泌尿道感染（上行性）（2）败血症：（3）新生儿脑膜炎：外源性感染2.胃肠炎外源性感染。

（二）所致疾病1.肠道外感染内源性感染、医源性感染（二）所致疾病ETECEnterotoxigeincE.coli

致病物质肠毒素粘附素定植因子所致疾病婴幼儿和旅游者腹泻严重者表现为霍乱样腹泻传播污染水源和食物传播人与人不传播ETECEnterotoxigeincE.coli肠杆菌科课件肠杆菌科课件EIECEnteroinvasiveE.coli

致病物质不产生肠毒素侵袭结肠粘膜上皮细胞并释放内毒素所致疾病主要侵犯较大儿童和成人表现为脓血便、里急后重的症状

水样便，继以少量血便可与痢疾区分EIECEnteroinvasiveE.coli水样EPECEnteropathogenicE.coli

致病物质不产生肠毒素及其他外毒素无侵袭力。在粘膜表面生长繁殖导致功能受损所致疾病婴幼儿腹泻的主要致病菌

严重水样便，恶心，呕吐，发热EPECEnteropathogenicE.coliEHECEnterohemorrhagicE.coli

出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体（主要为O157：H7）致病物质菌毛Vero毒素、内毒素和溶血素所致疾病血性腹泻

EHECEnterohemorrhagicE.col一幼儿园的幼儿食入从某店购进的汉堡包后有十多名五岁左右儿童发生发热、腹痛、腹泻、血样便，并有数人出现溶血性尿毒症、肾功能衰竭。讨论：１．最可能的诊断是什么？依据何在？２．怎样明确病原学诊断？一幼儿园的幼儿食入从某店购进的汉堡包后有十多名五岁左右儿童发EAECEnteroaggregativeE.coli

致病物质菌毛肠集聚耐热毒素和溶血素所致疾病婴幼儿持续腹泻、脱水、偶有血便EAECEnteroaggregativeE.col（一）标本

中段尿、血液、脓液、脑脊液、粪便三、微生物学检查法（二）分离培养与鉴定（1）肠外感染。

①涂片染色检查：

②分离培养：（2）肠内感染

（一）标本三、微生物学检查法（二）分离培养与鉴定（1）肠外感（三）卫生细菌学检查大肠菌群数

我国卫生标准规定，大肠菌群在每100ml饮用水中不得检出

大肠菌群不代表某一个或某一属细菌，而是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌。其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的G-无芽胞杆菌。（三）卫生细菌学检查大肠菌群数我国卫生标准规定，大预防加强水和食品、环境的卫生细菌学监测，注意饮食卫生进行诊疗技术时应严格无菌操作隔离治疗腹泻病人，切断传染源治疗抗生素治疗应在药物敏感试验的指导下进行四、防治原则预防四、防治原则女，21岁，持续3d尿频、尿痛。尿有异味。无发热、腹痛及皮疹。离心尿标本做显微镜检查每个高倍视野见10-15个白细胞和大量革兰阴性杆菌。问题：1）该患者可能感染了何种病原体？2）此病原菌可能源于何处？3）此菌进入尿道的最有可能途径是怎样的？女，21岁，持续3d尿频、尿痛。尿有异味。无发热、腹痛及皮疹秋季一病人发热、腹痛、腹泻、脓血便，有明显的里急后重感。血白细胞1.3万／mm3，中性８９％。讨论：１．可能的诊断是什么？如何明确病原学诊断？２．对该例病人应如何处置？秋季一病人发热、腹痛、腹泻、脓血便，有明显的里急后重感。血白九月份，一患儿急起高热，突然昏迷。血白细胞9800／mm3，中性８７％。无腹痛、腹泻。肛拭子细菌分离培养发现志贺痢疾杆菌。讨论：１．最可能的诊断是什么？依据是什么？２．患儿昏迷的原因及病理机制是什么？九月份，一患儿急起高热，突然昏迷。血白细胞9800／mm3，第二节志贺菌属（Shigella）

俗称痢疾杆菌（dysenterybacterium）1、形态结构

G－短小杆菌、有菌毛、无鞭毛2、培养特性营养要求不高

SS培养基上，呈无色半透明菌落动力阴性，硫化氢阴性。一、生物学性状第二节志贺菌属（Shigella）俗称痢疾杆菌（dyse肠杆菌科课件5、抵抗力弱，对酸非常敏感，故粪便标本应迅速送检。4、分类志贺菌属细菌有O和K两种抗原依据O抗原将志贺菌属分为4群和40余血清型（包括亚型）痢疾志贺菌（S.dysenteriae）;福氏志贺菌（S.flexneri）;鲍氏志贺菌（S.boydii）;宋内志贺菌（S.sonnei）5、抵抗力弱，对酸非常敏感，故粪便标本应迅速送检。4（一）致病物质1、侵袭力

2、内毒素

3、外毒素二、致病性与免疫性菌毛、分泌系统、Ipa志贺毒素，由A群菌株产生,神经毒，细胞毒，肠毒性1.致机体发热、神智不清甚至休克2.破坏肠粘膜，出现典型的脓血粘液便3.作用于肠壁自主神经，腹痛，里急后重（一）致病物质二、致病性与免疫性菌毛、分泌系统、Ipa志贺毒

细菌性痢疾是一种常见病，主要流行于发展中国家，全世界年病例数超过2亿，年死亡病例达65万。自2003年以来，根据我国卫生部公布的报告传染病发病率数和死亡数排序，其发病数总在前五位，死亡数在前十位。（二）所致疾病细菌性痢疾（菌痢）细菌性痢疾是一种常见病，主要流行于发展中国家，全世界年临床类型：急性细菌性痢疾慢性细菌性痢疾急性中毒性痢疾传染源：病人和带菌者传播途径：粪-口途径，感染局限于肠道症状：突然发病，常有发热腹痛、脓血黏液便，伴有里急后重多见小儿，消化道症状不明显临床类型：传染源：病人和带菌者传播途径：粪-口途径，1、粘膜局部抗感染免疫分泌型IgA（sIgA）；2、病后免疫期短暂，也不巩固。原因：①细菌仅侵入肠壁组织

②菌属内型别多（三）免疫性1、粘膜局部抗感染免疫（三）免疫性（一）标本采集注意事项：取粪便脓血或黏液部分，避免与尿混合；在使用抗生素前采样；标本应新鲜；标本若不能及时送检，宜将标本保存于30％甘油缓冲盐水或专门送检的培养基内。中毒性痢疾者可取肛拭。三、微生物学检查法（一）标本三、微生物学检查法（四）快速诊断法免疫染色法；免疫荧光菌球法；协同凝集试验；胶乳凝集试验；PCR技术、基因探针（二）分离培养与鉴定（三）毒力试验：Senery试验：受试菌菌悬液→豚鼠眼结膜囊内→角膜结膜炎，表明受试菌有侵袭力。（四）快速诊断法（二）分离培养与鉴定（三）毒力试验：Sene四、防治原则非特异性预防：卫生学监测，垃圾处理和灭蝇；隔离病人和消毒排泄物；发现亚临床病例和带菌者；特异性预防：致力于活疫苗的研究减毒链霉素依赖株；杂交株治疗：药敏试验选择临床用药四、防治原则非特异性预防：秋季一病人发热、腹痛、腹泻、脓血便，有明显的里急后重感。血白细胞1.3万／mm3，中性８９％。讨论：１．可能的诊断是什么？如何明确病原学诊断？２．对该例病人应如何处置？秋季一病人发热、腹痛、腹泻、脓血便，有明显的里急后重感。血白九月份，一患儿急起高热，突然昏迷。血白细胞9800／mm3，中性８７％。无腹痛、腹泻。肛拭子细菌分离培养发现志贺痢疾杆菌。讨论：１．最可能的诊断是什么？依据是什么？２．患儿昏迷的原因及病理机制是什么？九月份，一患儿急起高热，突然昏迷。血白细胞9800／mm3，一病人高热二周，胸腹部有散在的玫瑰疹，肝脾肿大。肥达反应：Ｈ：１∶４０，Ｏ：１∶８０，ＴＡ：１∶３２０，ＴＢ：１∶２０。讨论：１．最可能的诊断是什么？依据是什么？２．如何明确诊断？一病人高热二周，胸腹部有散在的玫瑰疹，肝脾肿大。肥达反应：Ｈ一病人持续高热３周，日前体温有所下降，但出现腹泻、脓血便，血较多。全身中毒症状明显。血白细胞减少，中性６０％。血细菌培养阴性。肥达反应：Ｈ：１∶３２０，Ｏ：１∶１６０，ＴＡ：１∶２０，ＴＢ：１∶２０。讨论：１.最可能的诊断是什么？依据是什么？如何进一步明确诊断？２．当前的病程进入哪一阶段？一病人持续高热３周，日前体温有所下降，但出现腹泻、脓血便，血第三节沙门菌属（Salmonella）是一群寄生在人类和动物肠道中，生化反应和抗原结构相似的革兰阴性菌血清型多，约1400多种能感染人类分两个种：肠道沙门菌和邦戈沙门菌其中肠道沙门菌包括6个亚种，感染人类的沙门菌都在第一亚种第三节沙门菌属（Salmonella）是一群寄生在人类对人致病的血清型---肠热症伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌人畜共患病的血清型-食物中毒或败血症鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌等对人致病的血清型---肠热症一、生物学性状形态染色

G-杆菌、有周身鞭毛、有菌毛培养和生化反应兼性厌氧、营养要求不高不分解乳糖、多数产生H2S一、生物学性状形态染色培养和生化反应肠杆菌科课件3、抗原构造主要有O和H两种抗原，少数菌中尚有Vi抗原。

O-Ag分组的依据，数字排序

H-Ag分型的依据，数字排序

Vi-Ag质粒编码的毒力抗原，可阻止O凝集。抗吞噬和保护，可引起带菌免疫现象。4、抵抗力较差但对胆盐、煌绿的耐受性较强3、抗原构造主要有O和H两种抗原，少数菌中尚有Vi抗原。（一）致病物质

1、侵袭力

侵袭小肠粘膜耐酸应答基因、菌毛、分泌系统、侵袭蛋白、Vi抗原等2、内毒素

3、肠毒素鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素，致胃肠炎二、致病性与免疫性（一）致病物质二、致病性与免疫性传染源：病人和带菌者（健康带菌者更重要）传播途径：粪-口途径人类沙门菌感染有4种类型：

1.肠热症(entericfever,typhoidfever)（二）所致疾病传染源：病人和带菌者（健康带菌者更重要）（二）所致疾病菌毛、分泌系统、侵袭蛋白经淋巴液经胸导管迟发型变态反应典型症状：高热、缓脉、肝脾肿大、玫瑰疹全身中毒症状肝脾肾淋巴结胆囊尿排菌发病期（1-4W）潜伏期2W致病过程通过胃进入小肠经M细胞运输至被巨噬细胞吞噬肠壁、肠系膜淋巴组织中繁殖血流（菌血症）肠出血、肠穿孔肠道菌毛、分泌系统、侵袭蛋白经淋巴液经胸导管迟发型变态反应典型症2.胃肠炎（食物中毒）

是最常见的沙门菌感染，约占70%。多见于老人、婴儿和体弱者。致病机制：细菌对肠黏膜的侵袭以及细菌释放的内毒素临床表现潜伏期6-24小时症状起病急，发热、恶寒、呕吐、腹痛、水样便，偶有粘液或脓性腹泻。2.胃肠炎（食物中毒）3.败血症

多见于儿童和免疫力低下成人。经口感染后，但肠道症状较少见。4.无症状带菌者

约1％～5％伤寒或副伤寒患者，

病菌储存场所主要在胆囊（三）免疫性特异性细胞免疫是主要防御机制。胃肠炎的恢复与肠道局部生成sIgA有关3.败血症（三）免疫性（一）标本肠热症：第1周取外周血，第2周起取粪便，第3周起还可取尿液，第1-3周均可取骨髓液；胃肠炎，败血症：带菌者：可取十二指肠引流液。三、微生物学检查法（一）标本三、微生物学检查法（二）分离培养和鉴定血液、骨髓液→增菌

↓粪便、尿沉渣→SS选择培养基

↓37℃孵育24小时挑取无色半透明的乳糖不发酵菌落

↓

双糖或三糖铁培养基

系列生化反应、多价抗血清玻片凝集（二）分离培养和鉴定系列生化反应、多价抗血清玻片凝集（三）血清学诊断用于肠热症的血清学试验有

肥达试验（Widaltest）

SPA协同凝集试验对流免疫电泳法胶乳凝集试验

EIA法免疫印迹试验等（三）血清学诊断用于肠热症的血清学试验有肥达试验（Widaltest）定义：用已知伤寒沙门菌菌体O抗原和H鞭毛抗原、副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H鞭毛抗原的诊断菌液与受检血清做试管或微孔板定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。肥达试验（Widaltest）肥达试验结果的解释：1.正常值一般是伤寒O凝集效价<1:80，H凝集效价<1:160；副伤寒H凝集效价<1:80。2.动态观察3.O与H抗体的诊断意义

OH→则肠热症的可能性大；

OH→患病可能性小；O→H→接种或非特异性回忆反应

OH→→感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。肥达试验结果的解释：病例 入院后第四天 入院后第十二天 Ｈ Ｏ ＴＡ ＴＢ Ｈ Ｏ ＴＡ ＴＢ例一 1∶80 1∶80 1∶40 1∶40 1∶320 1∶320 1∶40 1∶20例二 1∶80 1∶80 1∶40 1∶40 1∶80 1∶80 1∶320 1∶20例三 1∶40 1∶80 1∶40 1∶20 1∶80 1∶320 1∶20 1∶20例四 1∶160 1∶20 1∶20 1∶40 1∶80 1∶20 1∶20 1∶20下列为四例住院发热待查病人的前后两次肥达反应结果讨论：１．对每例肥达反应动态检测的结果作何判断？２．如何明确诊断？下列为四例住院发热待查病人的前后两次肥达反应结果讨论：（四）伤寒带菌者的检出最可靠的诊断方法是分离出病原菌。但一般是先