秘鲁番茄高效再生体系的研究

秘鲁番茄高效再生体系的研究供应中占有特别重要的位置。

随着育种技术的不断进展,番茄品种不断丰富,番茄产量不断提高,但随着设施番茄种植面积的不断增加,番茄病害的发生也逐步加重,特殊是番茄病毒病常常呈暴发趋势[1-3],对番茄生产造成了严峻危害,并且病害發生时往往以复合侵染的形式危害。

现有番茄品种的抗性已不能满意现实的生产需求。

同时,番茄属于严格的自花授粉作物[4],经过人类长期的驯化和选育,其栽培种的遗传背景已经变得越来越狭窄,仅依靠现有栽培种已很难满意育种要求。

与栽培番茄资源匮乏相反,番茄属野生种番茄及番茄近缘野生种类番茄中却拥有丰富的优良遗传性状[5],能抗多种病虫害,有较高的抗旱性、耐盐性和可溶性固形物含量等。

秘鲁番茄是栽培番茄的一种近缘野生种,对番茄的多种病害均表现出较强的抗性或免疫性[6],在改良番茄抗性方面具有重要的利用价值,但秘鲁番茄与栽培番茄的有性不亲和障碍问题迄今尚未得到很好解决[7]。

通过原生质体融合等远缘体细胞杂交技术,可以将野生番茄属植物或者近缘种的遗传物质转入到番茄栽培种中,制造出具有多抗、高品质的优良性状种质资源,而建立秘鲁番茄高效再生体系是利用体细胞杂交的基础。

本试验以秘鲁番茄的叶片和茎段作为外植体,通过添加不同浓度和配比的激素,建立其高效再生体系,为充分利用秘鲁番茄的优异性状奠定基础。

。

田间取秘鲁番茄的腋芽,进行表面消毒处理后接种于基本培育基获得无菌苗。

,先用洗洁精清洗腋芽,除去表面尘土,自来水冲洗20~30,用滤纸吸干水分。

移入超净工作台后,先用75%乙醇浸泡15,%2浸泡8,无菌水冲洗5~6次,无菌滤纸吸干水分,接种于基本培育基。

1的小块,~,将这2种外植体分别接种到添加不同浓度、、和、、、的培育基上进行诱导培育。

、、和、、、的培育基上诱导不定芽的产生。

~2的不定芽分切下来,分别转入附加不同浓度、、和、、的生根壮苗培育基中,以基本培育基为对比,20后观看统计生根率。

、根系发达的健壮幼苗炼苗移栽,每天渐渐打开瓶盖,3后完全打开瓶盖,置于通风光明的常温房间里保持3,每天早、中、晚各喷水1次,洗净附着在根系的培育基,移植在草炭土+珍宝岩体积比1∶1栽培基质上,淋水、罩上透亮     塑料薄膜保持湿度,7后打开保湿罩,20后统计成活率。

,接种5左右,叶片伤口边缘间续膨大,叶片消失卷曲,茎段两端快速膨大,渐渐形成愈伤组织图1-。

由表1可见,不同的激素浓度和配比对秘鲁番茄愈伤组织诱导具有较大影响,以叶片作为外植体,当浓度肯定时,随着浓度的渐渐提高,愈伤组织诱导率基本呈现先提高后降低的趋势;当浓度肯定时,随着浓度的增加,愈伤组织诱导率总体也呈先提高后降低的趋势,但以叶片和茎段作外植体的诱导愈伤率有肯定差异,以叶片为外植体时,%,最佳诱导愈伤培育基为++,%,愈伤组织结构紧密,颜色浓绿,而以茎段为外植体时,%,最佳诱导愈伤培育基为++,%,可见秘鲁番茄以叶片作为外植体更易诱导愈伤组织。

,8左右愈伤组织上开头消失绿色芽点图1-、1-,接种4周后统计愈伤组织分化率。

试验结果表明,不同浓度配比的、对愈伤组织的分化率具有较大影响,采纳叶片和茎段作为外植体的愈伤组织分化率也有肯定差异。

愈伤组织分化的最佳培育基为++,以叶片为外植体时,%,%;以茎段为外植体时,%,%表2。

,分别转入附加和的生根壮苗培育基中。

秘鲁番茄不定芽生根相对较简单,%,但添加或者对生根率具有明显的影响,特殊是添加后,生根率明显提高,根系数量多且粗大,最佳生根培育基为+,%,表3,根系粗大,叶色浓绿,植株健壮,相宜移栽驯化图1-、1-。

、根系发达的秘鲁番茄试管苗进行炼苗驯化,炼苗后移栽到草炭土∶珍宝岩体积比=1∶1的花盆中,移栽前应对基质进行消毒。

移栽后留意保湿遮阴,开头时可罩上1层塑料薄膜,1周后除去薄膜。

通过以上措施,秘鲁番茄试管苗的移栽成活率可达90%以上图1-。

3结论与争论一般栽培番茄组织培育中的外植体一般采纳子叶、下胚轴、叶片、叶柄等,尤其以子叶作为外植体的居多[8-9]。

本试验过程中没有秘鲁番茄种子材料,只能取植株上的叶片和茎段作为外植体。

试验结果表明,采纳秘鲁番茄的叶片和茎段作为外植体均能建立其高效再生体系,但以叶片作为外植体更适合愈伤诱导和不定芽的分化。

激素在植物组织培育再生体系中占有重要作用,一般采纳细胞生长素和分裂素结合的方式诱导植株再生[10-11]。

本试验表明,以和的激素组合对建立秘鲁番茄再生体系具有较好的作用,以叶片作为外植体时,最佳的愈伤组织诱导培育基为++,%,愈伤组织结构紧密,颜色浓绿;愈伤组织分化的最佳培育基为++,%,%。

番茄不定芽一般生根较简单[12],在不添加激素的培育基上也能生根,但所生的根系瘦长,生根数量也较少,移栽不易成活。

本试验也发觉,在基本培育基上,秘鲁番茄的生根率低,根系数量少,。

番茄组织培育中,最常用的诱导生根激素为和。

于明礼等发觉,在添加的培育基上,栽培番茄不定芽诱导生根的效果最好[10];裴华丽等发觉,在添加的培育基上,3个栽培番茄品种均达到了最佳生根效果[9]。

本试验比较了不同浓度的和对秘鲁番茄不定芽诱导生根的影响,发觉添加后的秘鲁番茄的生根效果要好于添加后的生根效果。

本讨论所建立的秘鲁番茄再生体系为番茄体细胞杂交创新种质资源供应了肯定的理论依据和技术支持。

:[1]——番茄黄化曲叶病毒病[].中国蔬菜,202321:1-4.[2]宋晰,师迎春,张世晨,[].植物病理学报,2023,432:113-119.[3]刘永光,魏家鹏,乔宁,[].中国蔬菜,20235:67-69.[4][].,1986190:39-47.[5],:[].,1997,2775329:1063-1066.[6],,,-4,2172,-,-[].,2023,1096:1215-1223.[7]吴定华,[].园艺学报,1992,191:41-46.[8]-,,,[].-,2023,385:501-507.[9]裴华丽,李美芹,刘永光,[].北方园艺,