星状神经节阻滞在无血预充过程中对体外循环大鼠认知功能的影响

星状神经节阻滞在无血预充过程中对体外循环大鼠认知功能的影响

体外循环（cpb）是指将患者体内的血液引导到外，通过膜氧合器交换气体，然后通过泵的作用将其放入体内，以维持身体的氧气和血液循环的相对状态。这是一种有效的持续血液动力学工具，取代了心肺环，成为临床领域的重要工程。1材料和方法1.1大鼠分组及分组30只健康SD成年雄性大鼠，由广西医科大学实验动物中心提供（许可证编号：SCXK桂2014-0002），体重400～450g。将大鼠随机分为3组：假手术组（S组）、CPB组（C组）和SGB+CPB组（SC组），每组10只。S组大鼠只进行动静脉置管，C组大鼠建立CPB模型转流2h,SC组大鼠建立SGB后立即行CPB模型转流2h。1.2动脉穿刺方法腹腔注射1%戊巴比妥钠50mg/kg将大鼠麻醉后仰卧固定于手术台上，行气管插管，连接HX-300S动物呼吸机（成都泰盟软件有限公司），控制潮气量为8mL/kg，呼吸频率为60次/min，维持呼气末二氧化碳4.66～5.99kPa的机械通气。CPB采用右侧颈外静脉—右侧股动脉。右侧颈外静脉用22G静脉穿刺针置管引流，右侧股动脉用24G静脉穿刺针进行灌注，尾动脉穿刺术监测动脉血压和血气分析。静脉给予400IU/kg的肝素钠，激活全血凝固时间（activatedclottingtime,ACT）≥480s后进行CPB转流1.3局麻和罗哌卡因注射大鼠腹腔注射1%戊巴比妥钠30mg/kg，在仰卧位的状态下行SGB。在大鼠左侧胸锁关节外侧0.3cm处注射0.1mL1%利多卡因进行局麻，用1mL注射器垂直进针穿刺，针尖斜面朝上，朝向足端约0.3cm时注射0.25%罗哌卡因0.5mL+1%利多卡因0.5mL。SGB成功的标志为出现明显Horner综合征，表现为大鼠左侧眼窝内陷、瞳孔缩小、眼睑下垂和眼裂变小。SGB成功后进行CPB模型建立。1.4酸ph值、钠离子na分别于实验开始前（T0）和实验开始后1h(T1）、2h(T2）、6h(T3）、24h(T4）、72h(T5）、第7天（T6）抽取大鼠尾动脉血0.4mL，用i-STAT1血气分析仪（美国Medtroniz公司）测量酸碱（pH）值、钠离子（Na1.6切片制备将各组大鼠麻醉后断颈取脑，用组织固定液固定24h后修块，阶梯式脱水，石蜡包埋，冠状位切片，厚约5μm。HE依次染色，脱水封片，光学显微镜观察大鼠海马的组织结构。1.7尼氏染色试验将各组大鼠脑组织的石蜡切片脱蜡后用甲苯胺蓝染色，冰醋酸分化，脱水透明封片，显微镜观察海马神经元形态学特征。1.8中药测试测试将T4～T6时间段的各组大鼠放入水迷宫中进行测试。测试开始前让大鼠在水中自由游泳2min，找到水中平台，若大鼠未及时找到平台，则引导大鼠找到平台1.9统计方法所有数据均采用SPSS23.0统计软件进行分析。计量资料以均数±标准差（2结果2.1不同时期各组大鼠的血液生化指标的比较与S组相比，C组和SC组在T2～T3时间段的pH值、Na2.2组hb含量比较C组和SC组在T2～T5时间段的Hb的含量低于S组，且在T2时间段最低（均P<0.05）。在T2～T4时间段，C组Hb含量低于SC组，且均低于S组（P<0.05）；在T5时间段，C组和SC组Hb含量低于S组（P<0.05），见表2。2.3s组与s组p>0.05比较C组和SC组的IL-2浓度在T2～T4时间段高于S组（均P<0.05），且在T2时间段最高。在T2～T4时间段C组IL-2浓度高于SC组，且均高于S组（P<0.05），见图1。2.4马组织受损HE染色观察，S组DG区的大鼠海马细胞排列紧密而整齐；而C组大鼠海马组织受损严重，细胞排列紊乱疏松、神经元弥漫性空泡变性、大量小胶质细胞浸润、核固缩明显；SC组的病理学改变较C组明显缓解，细胞排列较为规则，小胶质细胞、核固缩细胞和神经元空泡变性的数量也明显减少，见图2。2.5c组神经元自由基型尼氏染色观察，S组的大鼠海马CA3区神经元排列紧密且层次清晰、结构完整且神经元中尼氏小体含量丰富；而C组神经元带不完整、神经元缺失严重，且尼氏小体解体明显；SC组神经元受损情况较C组明显好转，神经元排列相对规整，神经元缺失数量减少，且尼氏小体含量相对丰富，见图3。2.6空间探索次数对逃避充压在T4～T6时间段，C组比SC组大鼠在空间探索中象限穿越次数增加，逃避潜伏期时间延长，且两组数值明显高于S组（均P<0.05），见图4。3血清il-2、mds-na表达NaIL-2作为有效的抗炎因子，主要来源于CD辅助T细胞下，从而持续低水平状态。在无血预充的CPB中，可能反复激活了Prdm1编码的转录因子B淋巴细胞激活，诱导成熟蛋白1抑制IL-2的大量产生在CPB中，无论是缺血还是炎症均会引起细胞水肿进而导致脑水肿，最先体现于星形胶质细胞，表现为空泡样变性。在CPB中会增加反应性的星形胶质细胞反应性的星形胶质细胞中的血管内皮生长因子，从而会破坏血脑屏障，并加速星形胶质细胞肿胀，而无血预充下的CPB会使其进一步加剧，加重脑水肿有研究表明，Morris水迷宫广泛用于空间记忆和学习，可作为术后认知功能的检测实验，但运动功能缺陷不能作为水迷宫认知功能测定的混淆因素研究显示，在无血预充的情况下进行CPB容易加重机体内环境紊乱，导致组织、器官缺血缺氧坏死，如外周末梢功能循环障碍、认知功能障碍、延长术后恢复时间甚至实验动物死亡综上所述，SGB可以在一定程度上稳定大鼠在无血预充条件下进行CPB时机体的内环境，调控血浆中IL-2的表达，减轻大脑的组织细胞水肿和神经炎症反应，改善大脑缺血缺氧的状况，从而减少大鼠POCD的发生。将大鼠麻醉后，在右颈内静脉处取血0.8mL，置于抗凝管中