forisil固相萃取-hplc-fld法同时测定肉制品中15种多环芳烃

forisil固相萃取-hplc-fld法同时测定肉制品中15种多环芳烃

多环芳烃（pahs）是由煤、油、木材、草和有机化合物引起的发展性碳氢化合物。它是环境和食品的重要污染物，具有“三致”（致残、致畸形、突变）毒性，是永久性有机污染物。迄今为止,发现200余种PAHs,其中有相当部分具有致癌性,如苯并[a]芘、苯并[a]蒽等目前检测PAHs的方法有液相色谱法1材料和方法1.1荧光检测仪器乙腈、正己烷、二氯甲烷(色谱纯,DIMAK公司);15种多环芳烃混合标准溶液(北京曼哈格生物科技有限公司);苊、芴、芘、菲、蒽、萘、荧蒽、苯并[a]蒽、苯并[a]芘、二苯并[a,h]蒽、苯并[b]荧蒽、茚并[1,2,3-c,d]芘、苯并[k]荧蒽、苯并[g,h,i]苝、标准溶液(美国CHEMSERVICE公司);FlorisilSPE小柱(DIMAK公司)。Agilengt1260高效液相色谱仪,配荧光检测器;KH-2000DB型超声波;摩尔超纯水机;IKAMS3涡旋振荡器;Waters固相萃取装置;SartoriusSQP型分析天平;瑞典BiotageTurboVap2氮吹仪;SIGMA4-16S离心机。1.2测试方法1.2.1标准中间液的制备单标溶液配制:分别准确移取适量各种单标溶液,用乙腈稀释成10ng/mL的单标溶液。多环芳烃标准中间液配制:准确移取0.1mL多环芳烃混合标准溶液(200μg/mL)于100mL棕色容量瓶中,用乙腈定容至刻度,得质量浓度200ng/mL的标准中间液。多环芳烃标准工作液配制:准确移取0.05,0.25,0.50,1.00和2.50mL多环芳烃标准中间液于10mL棕色容量瓶中,用乙腈定容至刻度,配制成质量浓度分别为1,5,10,20和50ng/mL的系列标准工作液。1.2.2样品的提取和净化称取2g(精确到0.0001g)试样于50mL离心管中,加入10mL乙腈,涡旋振荡30s后,超声提取30min,以4500r/min离心5min,吸取上清液于氮吹管中,离心管下层用10mL乙腈重复提取1次,合并提取液于氮吹管中,35℃下氮吹至近干。加入5mL正己烷,涡旋振荡30s溶解,待净化。样品净化:依次用5mL二氯甲烷和10mL正己烷活化FlorisilSPE小柱,将待净化溶液全部上样,用5mL正己烷洗涤氮吹管并入柱中,再用10mL正己烷-二氯甲烷(1+1)混合溶液洗脱并收集净化液到离心管中。在35℃下氮吹至近干,用乙腈定容至1.0mL,过0.22μm滤膜,待测。1.2.3设备条件铬合金WatersPAHsC2结果与分析2.1加标回收试验称取空白样品,按10μg/kg添加水平进行加标回收试验,比较FlorisilSPE小柱和以900mg硫酸镁、100mgPSA、100mgC2.2标准曲线的绘制在1.2.3的测定条件下,对配制的标准工作液进行测定,以待测PAHs的峰面积(y)为纵坐标,各PAHs的质量浓度(x)为横坐标,绘制标准曲线。结果表明,用HPLC-FLD法测定PAHs时,在1～50ng/mL线性范围内均呈良好的线性关系,相关系数R>0.9995,结果见表4。在空白基质中依次加入较低浓度的标准溶液后进行测定,以每种化合物的3倍信噪比(S/N=3)和10倍信噪比(S/N=10)确定方法的检出限和定量限,结果见表4。2.3回收率和精密度称取2g(精确到0.0001g)空白试样,进行5,10和20μg/kg加标水平的基质加标回收试验,水平平行测定6次,按照1.2.2进行样品预处理并进行HPLC-FLD分析,计算平均回收率和方法精密度,结果见表5。HPLC-FLD法各PAHs添加水平的回收率为78.2%～93.3%,相对标准偏差为1.8%～5.0%;方法准确度和精密度均满足分析的要求。2.4种pahs在8批作用下的检验结果按1.2.2的处理样品,将处理好的样品在优化条件下进行测定,外标法定量,各样品中的PAHs含量见表6。15种PAHs在8批烤肉中有13种被检出,其中烤肉5、烤肉8苯并[a]芘含量小于5μg/kg,但PAH4总量大于12μg/kg,8批烤肉全部符合中国标准,但有2批不符合欧盟标准。由此可见,单一控制苯并[a]芘含量,不足以保证烤肉品质,为提高其安全性,且与国际接轨,应尽快提高中国熏、烧、烤肉制品中多环芳烃的判定标准。3hplc-fld检测用少量乙腈超声提取后,采用FlorisilS