山西省朔州市怀仁市大地学校高中部2022-2023学年高二5月月考生物试题（解析版）

绝密★启用前怀仁市大地学校2022-2023学年度下学期第四次月考高二生物（考试时间：90分钟试卷满分：100分）注意事项：1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名。准考证号填写在答题卡上。2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。4．考试结束后，将答题卡交回。第Ⅰ卷一、选择题：本题共30个小题，1-10题，每小题1分，11-30题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1.下列关于果酒和果醋的制作原理及发酵过程的叙述中，错误的是（）A.果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B.制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件【答案】A【解析】【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，其反应式为：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃，发酵时，将温度控制在18~30℃进行发酵。醋酸菌是好氧细菌，当O2、糖源都充足时能将糖分解成醋酸，反应式为：C6H12O6+O22CH3COOH+2H2O+2CO2+能量；当缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应式为：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。进行醋酸发酵时，发酵温度控制为30~35℃。果酒、果醋制作的注意事项：(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。冲洗以洗去灰尘为目的，且不要太干净，以防洗去野生型酵母菌。(2)防止发酵液被污染的方法①榨汁机要清洗干净并晾干。②发酵瓶要洗净并用体积分数为70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤。③装入葡萄汁后要封闭充气口。【详解】A、果酒发酵的菌种是酵母菌，其代谢类型为异养兼性厌氧型，而果醋发酵的菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，A错误；B、制作果酒和果醋时均需要对发酵瓶消毒，均可用体积分数为70%的酒精进行消毒，B正确；C、在变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，C正确；D、果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件，果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18～30℃，而果醋制作需要有氧环境，适宜温度为30～35℃，D正确。故选A。2.有关平板划线操作的叙述，错误的是（）A.平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面B.每次划线前，灼烧接种环待其冷却后再划线C.在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自菌液D.每次划三至五条平行线，注意用力大小要适当，不要划破培养基【答案】C【解析】【分析】1、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。2、平板划线操作的注意事项：①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③划线时最后一区域不要与第一区域相连。④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。【详解】A、结合分析可知，平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，以获得单个菌落，A正确；B、每次划线前，灼烧接种环需要待其冷却后再划线，否则高温会杀死菌种，B正确；C、在平板划线时，第一区域内划线时接种环上的菌种直接来自菌液，而第二区域内划线时，接种环上的菌种来自于上一次划线区域，C错误；D、每次划三至五条平行线，注意用力大小要适当，不要划破培养基，否则无法形成单个菌落，D正确。故选C。3.将接种后的培养基和一个未接种的培养皿都放入37℃恒温箱的目的是（）A.对比观察培养基有没有被微生物利用 B.对比分析培养基上是否生有杂菌C.没必要放入未接种的培养基 D.为了下次接种时再使用【答案】B【解析】【分析】通过实验验证培养基是否被污染，分析实验设计的思路应是把不接种任何菌种的培养基放在恒温箱中培养，一段时间后若有菌落说明培养基被污染，若无菌落说明培养基没有被污染，然后根据选项分析判断。【详解】将接种后的培养基和未接种的培养基同时放入37℃恒温箱，目的是作为空白对照，判断培养基是否被污染．一段时间后若未接种的培养基有菌落说明培养基被污染，则培养基不能使用，若无菌落说明培养基没有被污染，可以使用，故选B。【点睛】本题的知识点是对培养基灭菌是否彻底或培养基是否被污染的判断，主要考查学生实验设计的能力和运用微生物知识解决问题的能力。4.获得纯净培养物的关键是（）A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B.接种纯种细菌C.适宜环境条件下培养D.防止外来杂菌的入侵【答案】D【解析】【分析】获得纯净培养物的关键是无菌技术，即防止外来杂菌的入侵。【详解】将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌只是无菌技术的一个方面，不是无菌技术的全部，A错误；接种纯种细菌是获得纯净培养物的前提，B错误；适宜条件下培养只能提供微生物生长的条件，不能防止杂菌的污染，C错误；防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键，D正确。5.平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是()A.接种时再拿起来方便 B.在皿底上标记日期等方便C.正着放置容易破碎 D.防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染【答案】D【解析】【详解】微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染，平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，故选D。【考点定位】微生物的分离和培养6.下图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气。下列说法错误的是（）A.米曲霉发酵过程中，大豆中蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源B.米曲霉分泌的酶可将大分子有机物水解为小分子有机物C.发酵池发酵阶段应密封进行，酵母菌与米曲霉对氧气需求相同D.发酵池中两种主要微生物产生的酒精、乳酸可以抑制杂菌生长【答案】C【解析】【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。2、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。【详解】A、大豆中蛋白质含有N，可为米曲霉的生长提供氮源，A正确；B、米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的蛋白酶、脂肪酶能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，B正确；C、米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气，由此可以判断米曲霉属于异养好氧型，而酵母菌属于兼性厌氧生物，C错误；D、发酵池中两种主要微生物产生的酒精具有抑制杂菌的作用，产生的乳酸会营造酸性环境，也可以抑制杂菌生长，D正确。故选C。7.某同学将1mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0．1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是（）A.可得出土壤样液中活菌数大约为5．7×107个/LB.此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低C.一般选择菌落数在30—300的平板进行计数D.显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数【答案】D【解析】【分析】稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57，据此可得出每升样品中的活菌数为（56+58+57）÷3÷0.1×1000×100=5.7×107个，A正确；B、由于两个或多个细菌形成一个菌落，所以统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，B正确；C、一般选择菌落数在30—300的平板进行计数，C正确；D、显微镜直接计数法统计的都是稀释液中所有个体的数目，包括死菌，D错误。故选D。8.下列有关动物细胞核移植和克隆动物的叙述，错误的是（）A.胚胎细胞核移植的难度明显低于体细胞核移植B.用于核移植的卵母细胞需要在体外培养到MⅡ期C.核移植后形成的重构胚可以直接移入受体动物体内D.克隆动物和体细胞供体动物的性状基本相同【答案】C【解析】【分析】动物克隆主要通过核移植技术来完成；动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的猴子不需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。【详解】A、体细胞分化程度高，表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易，因此胚胎细胞核移植的难度明显低于体细胞核移植，A正确；B、获得的卵母细胞去核后，需要培养到减数第二次分裂中期才能进行核移植，B正确;C、重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程才能移入受体动物体内，C错误；D、个体性状表现主要由细胞核控制，因此克隆动物的性状表现与供体动物（供核动物）基本相同，D正确。故选C。9.下列有关细胞工程的叙述，正确的是（）A.动物细胞培养应置于含95%O2和5%CO2的培养箱中进行B.动物细胞培养和植物组织培养都利用了细胞全能性的原理C.愈伤组织培养过程中加入聚乙二醇，可获得染色体加倍的细胞D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性【答案】D【解析】【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。2、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。【详解】A、动物细胞应置于含95%的空气和5%的CO2的培养箱中培养，A错误；B、植物组织培养的原理是细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，B错误；C、植物细胞融合时必须先去除细胞壁，再加入聚乙二醇，才能获得染色体数目加倍的细胞，C错误；D、可在培养液中加入待检测的有毒物质，再培养动物细胞，检测细胞的生长情况，达到检测有毒物质，判断某种物质的毒性的目的，D正确。故选D。【点睛】10.两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。下列说法错误的是（）A.过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞B.过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂C.过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合D.耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段【答案】C【解析】【分析】从图中看出①是去掉植物细胞壁，②是用紫外线诱导染色体变异，③融合形成杂种细胞。【详解】A、过程1是获得植物细胞的原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁分解，A正确；B、根据题干信息“将其中一个细胞的染色体在融合前断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，”故过程②通过紫外线照射是使中间偃麦草的染色体断裂，B正确；C、灭活的病毒诱导是动物细胞融合特有的方法，诱导植物原生质体融合常用物理法、化学法，C错误；D、实验最终将不抗盐的普通小麦和抗盐的偃麦草整合形成耐盐小麦，说明耐盐小麦染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段，D正确。故选C。【点睛】本题的难点是对过程②的分析，考生需要结合题干中的信息作答。11.下列关于植物细胞工程应用的叙述，错误的是（）A.植物微型繁殖具有高效、快速的特点B.在紫草宁的工厂化生产的过程中使用的是固体培养基C.对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种D.利用植物组织培养技术培育的脱毒苗具有不含或很少含病毒的特点【答案】B【解析】【分析】微型繁殖技术是指利用植物组织培养技术快速繁殖优良品种方法，也被称为植物的快速繁殖技术。细胞产物的工业化生产使用的是液体培养基。对植物的愈伤组织进行化学或物理的诱变处理，促使其发生突变，再通过诱导分化形成植株，从这些植株中筛选出高抗、高产、优质的突变体，从而培育成新品种。进行组织培养时，一般选取植物茎尖作材料，其依据是茎尖不含病毒（或含病毒极少）。【详解】A、植物微型繁殖技术的优点是可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，还可以保持优良品种的遗传特性，A正确；B、细胞产物的工厂化生产是从人工培养的愈伤组织细胞中提取某种成分，如紫草素等，使用的液体培养基，B错误；C、在育种中，可以对植物的愈伤组织进行化学或物理的诱变处理，促使其发生突变，再通过诱导分化形成植株，从这些植株中筛选出高抗、高产、优质的突变体，从而培育成新品种，C正确；D、利用组织培养技术培育脱毒草莓幼苗的原理是细胞的全能性，培育时，一般选取植物茎尖作材料，其依据是茎尖分生区不含病毒（或含病毒极少），D正确。故选B。12.人心肌细胞中的肌钙蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。下列有关叙述错误的是（）A.反复给小鼠注射cTnI的目的是让小鼠体内产生更多的抗体B.人工诱导细胞融合获得甲常用的方法可用灭活的病毒诱导C.经检测、筛选后的丙，既能无限增殖又可分泌特异性抗体D.抗cTnI单克隆抗体检测心肌损伤具有特异性强、灵敏度高的特点【答案】A【解析】【分析】题图分析：①表示用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；②表示筛选获得能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞，因此丙细胞具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特点，既能产生特定抗体，又能无限增殖。【详解】A、用cTnI作为抗原反复注射小鼠，其目的是刺激小鼠产生更多的B淋巴细胞，A错误；B、人工诱导细胞融合获得甲常用的方法可用灭活的病毒诱导，是诱导动物细胞融合特有的手段，B正确；C、经两次筛选后，获得到的丙细胞具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特点，即既能产生特定抗体，又能无限增殖，C正确；D、与传统抗体的制备方法相比，经此方法制备的抗cTnI单克隆具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等优点，D正确。故选A。13.下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（）A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定B.过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植【答案】B【解析】【分析】分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取乙牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。【详解】A、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A错误；B、动物细胞培养中需要提供95%空气（保证细胞的有氧呼吸）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，B正确；C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误；D、过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，D错误。故选B。【点睛】14.下图为科学家制备诱导多能干细胞(iPS细胞)的操作流程图。下列叙述错误的是（）A.该项技术可用于器官的再生研究B.诱导多能干细胞分化程度较低，具有分裂和分化的能力C.诱导多能干细胞分化成表皮细胞是基因选择性表达的结果D.诱导多能干细胞应用前景不如胚胎干细胞【答案】D【解析】【分析】分析图：图示为利用成年体细胞制备iPS细胞（多能干细胞）的操作流程模式图。成年体细胞经过人工诱导，使细胞核重编程后即可形成多能干细胞，多能干细胞可以分化形成多种组织细胞。【详解】A、干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生成各种组织器官的潜在功能，因此该项技术可用于器官的再生研究，A正确；B、由图可知，多能干细胞（iPS细胞）能分化成多种细胞，说明其分化程度较低，具有分裂和分化的能力，B正确；C、细胞分化的实质是基因的选择性表达，故多能干细胞分化成表皮细胞是基因选择性表达的结果，C正确；D、由于诱导多能干细胞具有活跃分裂能力，故诱导多能干细胞的应用前景优于胚胎干细胞，D错误。故选D。15.下列有关限制性内切核酸酶的叙述，正确的是（）A.用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个B.限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大C.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接D.只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒【答案】B【解析】【分析】限制酶的来源、作用及其结果：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）作用（特异性）：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端；特别注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。【详解】A、用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，需要切割目的基因的两侧，又因DNA为双链结构，因此要断裂4个磷酸二酯键，即被水解的磷酸二酯键有4个，A错误；B、限制酶具有专一性，限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现概率就越大，B正确；C、—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端不同，分别为—CATG和GATC—，因此不能用DNA连接酶连接，C错误；D、用不同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，若产生的黏性末端相同，则也能形成重组质粒，D错误。故选B。16.基因工程利用某目的基因（图甲）和P1噬菌体载体（图乙）构建重组DNA．限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ下列分析错误的是（）A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA【答案】D【解析】【分析】一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割，切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。【详解】A、如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；B、由于Sau3AI的切割位点在EcoRI的左侧，因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；C、P1噬菌体载体为环状DNA，其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；D、从图甲看出，用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，方向可能接反，即可产生两种重组DNA，D错误。故选D。17.一种双链DNA分子被三种不同的限制酶切割，切割产物通过电泳分离，用大小已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记（右图左边一列）。关于该双链DNA,下列说法错误的是（）A.呈环状结构B.分子质量大小为10kbC.有一个NotI和两个EcoRI切点D.其NotI切点与EcoRI切点的最短距离为2kb【答案】D【解析】【分析】通过与分子量标记比较可知单用EcoRI处理后产生了4kb和6kb两条带；而利用EcoRI和NotI双酶切时产生了6kb、3kb、1kb三条带，即4kb的片段进一步被NotI酶切为3kb和1kb的片段，因此DNA含有一个NotI酶切位点，因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，所以该分子必须是环状的，长度一定是10kb。据此答题。【详解】AB、单用EcoRI处理和利用EcoRI和NotI双酶切时产生的结果不同，说明DNA含有NotI酶切位点，因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，所以该分子必须是环状的，且长度一定是10kb，A正确；B正确；C、因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，说明该环状DNA上含有一个NotI切割位点，单用EcoRI处理后产生了4kb和6kb两条带，说明该环状DNA上含有2个EcoRI切割位点，C正确：D、用EcoRI处理后产生的4kb的片段，进一步被NotI酶切为3kb和1kb的片段，可以得知NotI切点与EcoRI切点的最短距离为1kb，最大距离为3kb，D错误。故选D。【点睛】18.限制酶a和b的识别序列与切割位点如下图所示。下列叙述正确的是（）A.a酶、b酶均能切割氢键和磷酸二酯键B.能被a酶识别并切割的序列也能被b酶切割C.相同DNA分子被a酶切割的概率一般高于b酶D.基因工程中用两种酶切割质粒就能防止其自身环化【答案】C【解析】【分析】分析题图：限制酶a和限制酶b的识别序列不同，但两者切割产生的黏性末端相同，因此经过两种酶切后的黏性末端可在DNA连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。【详解】A、a酶与b酶切断的化学键相同，都是磷酸二酯键，而不是氢键，A错误；B、据图分析，酶a的识别序列是-GATC-，酶b识别序列是-GGATCC-，酶b的识别序列包含酶a的序列，故能被b酶识别并切割的列也能被a切割，但能被a酶识别并切割的序列不一定能被b酶切割，B错误；C、a酶的识别序列比b酶短，识别列越短，含有的识别位点就越多，因此在相同的DNA分子中a酶的识别位点明显多于b酶，被a酶切割的概率一般高于b酶，C正确；D、为防止限制酶切割后的质粒自身环化，在基因工程中通常使用两种切割后产生不同黏性末端的限制酶切割同一质粒，D错误。故选C。19.新冠病毒是一种RNA病毒，极易产生变异。其表面棘突蛋白（S蛋白）的受体结合域（RBD）可与人体细胞表面的ACE2受体结合而感染细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，可与S蛋白的RBD更为紧密的结合，以干扰新冠病毒感染。下列有关说法错误的是（）A.LCB1结构的设计可参考S蛋白的RBD和人体细胞ACE2受体的结构进行B.LCB1的生产可通过直接改造人体细胞内的某些基因来实现C.LCB1的基本组成单位中可能含有自然界不存在的氨基酸D.LCB1的设计和合成也遵循中心法则【答案】C【解析】【分析】根据题干分析，新冠病毒通过表面棘突蛋白（S蛋白）的受体结合域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用而感染细胞；而蛋白质LCB1可与S蛋白的RBD结合，阻断上述过程，从而干扰新冠病毒的感染。病原体表面的一些特定的蛋白质等物质，能够与免疫细胞表面的受体结合，从而引发免疫反应，这些能引发免疫反应的物质称为抗原。新冠病毒表面的S蛋白就是一种抗原。抗体是机体产生的专门应对抗原的蛋白质，能与相应抗原发生特异性结合。抗体与病原体的结合可以抑制病原体的增殖或对人体细胞的黏附。【详解】A、由题干信息分析可知，人工合成的LCB1可以与S蛋白的RBD结合，故LCB1可以依据S蛋白的RBD结构进行设计，A正确；B、LCB1的生产属于蛋白质工程，可通过直接改造人体细胞内的某些基因来实现，B正确；C、LCB1是人工设计并合成的一种自然界不存在的蛋白质，但合成蛋白质的氨基酸都是自然界存在的氨基酸，C错误；D、LCB1的设计和合成属于蛋白质工程，在此过程中遵循中心法则，D正确。故选C。20.基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，是成功的关键，下列相关说法不正确的是（）A.构建基因表达载体的目的包括使目的基因在受体细胞中能稳定存在且遗传给下一代B.基因工程中使用的标记基因有许多种，有的标记基因是质粒上固有的C.一个基因表达载体一般包括目的基因、标记基因、起始密码和终止密码等结构D.基因表达载体中的复制原点是质粒DNA的复制的起点【答案】C【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】A、基因表达载体的构建的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用，A正确；B、质粒上的标记基因有的是固有的，也可以是人为加上去的，B正确；C、一个基因表达载体一般包括目的基因、标记基因、启动子和终止子等结构，C错误；D、因表达载体中的复制原点是质粒DNA的复制的起点，没有复制远点，质粒DNA就不能复制，D正确。故选C。21.下列有关DNA粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是（）A.酵母菌、菜花和猪的成熟红细胞都可作为提取DNA的材料B.溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后在常温下颜色变蓝C.一般用0．14mol/L的NaCl溶液溶解DNAD.粗提取DNA实验中利用了DNA不溶于酒精的特点【答案】D【解析】【分析】DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度不同，可以实现DNA的溶解或沉淀，达到分离的；DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，故可以将DNA和蛋白质进一步分离。【详解】A、猪的成熟红细胞无细胞器和细胞核，不能作为提取DNA的材料，A错误；B、DNA鉴定时，加入二苯胺试剂后需沸水浴加热才可观察到颜色反应，B错误；C、0．14mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度较小，一般用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA，C错误；D、DNA粗提取实验中，可根据DNA不溶于酒精但某些蛋白质溶于酒精的原理初步分离DNA与蛋白质，D正确。故选D。22.细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述不正确的是（）A.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞B.选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率C.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得较多突变体D.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗【答案】A【解析】【分析】1、动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆个体。2、选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。3、植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详解】A、高度分化的细胞已经失去分裂能力，因此选择高度分化的动物体细胞进行培养不会获得大量细胞，A错误；B、卵母细胞的细胞质中含有促进全能性表达的物质，因此选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率，B正确；C、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此选择植物的愈伤组织进行诱变处理，再进行人工选择，可获得优质的突变体，C正确；D、茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。故选A。23.下列有关培养基的叙述正确的是（）A.筛选、培养硝化细菌的培养基中不能加入氮源B.固体培养基中的琼脂能为微生物生长提供碳源C.在进行微生物的富集培养时常选用液体培养基D.培养基中加入刚果红可用于尿素分解菌的鉴定【答案】C【解析】【分析】分解尿素的细菌的鉴定：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。【详解】A、硝化细菌属于化能合成型自养微生物，因此制备培养硝化细菌的培养基不需要添加碳源，但需要添加氮源，A错误;B、固体培养基中的琼脂只是作为凝固剂，不能为微生物生长提供碳源，B错误；C、液体培养基可以增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多的营养和空间，所以在进行微生物的富集培养时常选用液体培养基，C正确；D、培养基中加入刚果红可用于纤维素分解菌的鉴定，D错误。故选C。24.航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是（）A.培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌B.人心脏的跳动受到自主神经系统的调控C.心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖D.培养心肌细胞时，需要O2但不需要CO2【答案】B【解析】【分析】动物细胞培养在培养过程中要求一定的培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）适宜的温度和pH。（4）气体环境。【详解】A、动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，但培养心肌细胞的试剂不能进行高压蒸汽灭菌，A错误；B、心脏跳动接受交感神经和副交感神经的双重支配，即人心脏的跳动受到自主神经系统的调控，B正确；C、心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂增殖，但增殖一定时间后会出现接触抑制，C错误；D、培养心肌细胞时需要的气体条件为95%空气加5%CO2，D错误。故选B。25.羊在畜牧生产和生物医学模型方面都具有重要价值，因此与羊相关的基础生物学研究也格外受到关注。科学家通过胚胎工程的方法繁育肉羊。下列相关叙述错误的是（）A.从雌性肉羊卵巢内取出的卵母细胞不可直接进行体外受精B.可用普通雌性羊作为受体进行胚胎移植但需生理状态相同C.可以通过胚胎分割技术，得到更多遗传性状相同的肉羊后代D.在胚胎移植前，需要对体外培养的原肠胚进行质量筛查【答案】D【解析】【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，可见试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术。【详解】A、从卵巢内取出卵母细胞不可直接进行体外受精，需要培养到MII中期，A正确；B、胚胎移植需要受体的生理状态满足胚胎的发育，B正确；C、可以通过胚胎分割技术获得遗传性状相同的多个子代，C正确；D、早期胚胎培养到桑基胚或囊胚阶段进行移植，D错误。故选D。26.利用组织培养技术可以快速生产出脱毒苗。下列叙述错误的是（）A.获取的植株茎尖切段需用70％的酒精和5％的次氯酸钠进行消毒处理B.生产脱毒苗和培养克隆动物所依据的原理不同C.形成愈伤组织的过程中，可能会发生染色体变异、基因突变及细胞分化D.利用植株茎尖细胞培育的脱毒苗不能抗病毒【答案】C【解析】【分析】植物组织培养技术：1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。2、原理：植物细胞的全能性。3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。【详解】A、植组织培养获得的植株茎尖切段需用70％的酒精和5％的次氯酸钠进行消毒处理，清洗时用无菌水，A正确；B、生产脱毒苗和培养克隆动物所依据的原理不同，前者是细胞的全能性，后者是动物细胞核的全能性，B正确；C、形成愈伤组织的过程是脱分化，可能会发生染色体变异、基因突变，但不会发生细胞分化，C错误；D、利用组织培养技术可以快速生产出脱毒苗，脱毒苗不含病毒（或病毒含量极少），但不具有抗病毒的性状，D正确。故选C。27.T4溶菌酶来源于T4噬菌体（以DNA为遗传物质），是重要的工业用酶。科学家通过一定技术使T4噬菌体产生的T4溶菌酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸（二者R基上都不含氨基和羧基，异亮氨酸的密码子是AUU、AUC、AUA，半胱氨酸的密码子是UGU、UGC），于是该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，从而使T4溶菌酶的耐热性得到了提高。下列对上述过程的有关叙述，错误的是（）A.上述对T4溶菌酶进行的改造属于蛋白质工程的范畴B.上述过程通过直接改造T4溶菌酶mRNA上的2个碱基实现C.参与新的T4溶菌酶合成的tRNA种类可能不变D.改造后的T4溶菌酶肽键数不变，二硫键的作用类似于DNA中的氢键【答案】B【解析】【分析】蛋白质工程是以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。【详解】A、由题意可知，对T4溶菌酶的改造是通过改造蛋白质分子来实现的，故对T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程的范畴，A正确；B、要将T4溶菌酶的异亮氨酸变为半胱氨酸，只改变一个氨基酸，发生的是碱基的替换；两种氨基酸最接近的密码子是AUU和UGU，或AUC和UGC，仍然相差两个碱基，由于DNA是双链结构，故对应的DNA上的碱基至少要替换2个碱基对，即上述过程通过直接改造T4溶菌酶的相关基因实现，B错误；C、tRNA是氨基酸的载体，在翻译过程中起作用，改造前组成T4溶菌酶的氨基酸中就含有异亮氨酸和半胱氨酸，改造后组成T4溶菌酶的氨基酸中仍含有异亮氨酸和半胱氨酸，因此参与其合成的tRNA种类可能不变，C正确；D、改造后的T4溶菌酶中氨基酸数目没有发生改变，且变化后的氨基酸的R基上均不含氨基和羧基，因此，氨基酸种类改变后其结构中的肽键数目不变，但多了一个二硫键，二硫键使T4溶菌酶的耐热性提高；DNA分子中氢键越多，热稳定性越强，二者作用类似，D正确。故选B。28.解磷菌是一种能将土壤中植物不能利用的磷转化为植物可以利用的磷的微生物（主要为细菌），其在提高土壤中有效磷含量、促进磷循环方面发挥着重要作用，解磷菌能分解含磷化合物使得菌落周围会出现透明圈。如下图为从某植物根际土壤中筛选出高效解磷菌的部分流程示意图，下列叙述正确的是（）A.取样后用生理盐水将土壤菌液进行系列梯度稀释B.配制培养基时应将培养基的pH调至中性或弱碱性C.若筛选更高效解磷菌，应排选培养基C中①号菌落D.操作Ⅱ使用的工具和接种方法分别是接种环和平板划线法【答案】B【解析】【分析】接种微生物的方式常见有：平板划线法、稀释涂布平板法等，目的是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。将微生物接种到固体培养基常用稀释涂布平板法，接种前先要将菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在一定的稀释度的菌液里，聚集在一起的微生物能分散成单个细胞，在适宜的条件下培养让菌体进行繁殖，能够在培养基表面形成单个菌落。【详解】A、从土壤中取样后，由于土壤中菌的数量较多，需要用无菌水对土壤菌液进行梯度稀释，A错误；B、不同的微生物培养需要的pH不同，培养细菌时需将培养基的pH调至中性或弱碱性，B正确；C、由题意可知，解磷菌能分解含磷化合物使得菌落周围出现透明圈，透明圈越大，说明其分解磷的能力越强，C培养基中②的透明圈最大，该菌分解磷的能力最强，C错误；D、操作Ⅱ所使用的工具是涂布器，所使用的接种方法是稀释涂布平板法，D错误。故选B。29.下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是（）成分含量成分含量NaNO23gFeSO40．01gK2HPO41g葡萄糖30g琼脂15gH2O1000mLMgSO4·7H2O0．5g青霉素0．1万单位A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基B.由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉C.本培养基中青霉素添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3，并应加入尿素【答案】C【解析】【分析】各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基等。培养基按其特殊用途可分为选择性培养基和鉴别培养基。液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基。【详解】A、从培养基成分看，配方中含有凝固剂琼脂，故依物理性质划分，应属于固体培养基，A正确；B、由培养基的原料可知，葡萄糖属于有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，加入的青霉素能抑制细菌的生长，酵母菌或毛霉都是异氧型微生物，都可利用葡萄糖作为碳源，都属于真核生物，因此该培养基培养的微生物可以是酵母菌或毛霉，B正确；C、本培养基中青霉素的添加是为了筛选能够抗青霉素的微生物，C错误；D、若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应以尿素为唯一氮源，因青霉素有杀菌作用，故应除去青霉素和NaNO3，并应加入尿素，D正确。故选C。30.研究发现，无机盐离子的特殊配比可促使犬早期胚胎的基因组激活，而添加新鲜的维生素、组织液提取物等物质则可帮助犬早期胚胎维持正常的形态和细胞分化。下列有关胚胎工程的叙述，错误的是（）A.可对犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵来获得多个犬卵母细胞B.可选择桑葚胚、囊胚和原肠胚时期的胚胎进行胚胎分割以获得多个胚胎C.早期胚胎的体外培养液中还要注意气体条件且应该加入血清等成分D.囊胚期胚胎细胞开始分化出现了内细胞团和滋养层细胞【答案】B【解析】【分析】胚胎的早期培养：（1）培养目的：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。（2）培养液成分：除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。（3）当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同（牛、羊一般要培育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植）。【详解】A、为获得多个犬卵母细胞，可对犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵，A正确；B、进行胚胎分割时，应选择囊胚或之前的桑葚胚进行，B错误；C、早期胚胎的体外培养液中还应该加入有机盐和血清等成分并需控制好温度和气体条件，C正确；D、早期胚胎包括桑葚胚、囊胚和原肠胚等，囊胚期开始出现细胞分化，出现了内细胞团和滋养层细胞，D正确。故选B。第Ⅱ卷二、非选择题：本大题共4个小题，共50分。31.生物柴油是以野生油料植物。废餐饮油等为原料，通过化学反应制成的可供内燃机使用的燃料，是一种绿色能源，其中微生物脂肪酶在催化生产生物柴油中起着重要作用。为筛选产脂肪酶的微生物，石河子大学的科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：（1）产脂肪酶的微生物主要从油污土壤或水体中寻找，原因是_____。（2）为确保能够分离得到产脂肪酶的微生物，常将土壤或水体稀释液先进行选择培养，该培养基的碳源要求为___，该培养基具有选择作用的原理是_____。（3）分离、纯化培养时，可采用_____法接种，从而得到分布均匀的单菌落﹔从物理形态角度考虑，该培养基属于______培养基。培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径______的菌落进行纯化培养。为提高该步操作的可信度，设置了如下对照实验：对照组作用应出现的现象未接种的选择培养基判断选择培养基是否被污染①______接种的牛肉膏蛋白胨培养基②_______对照组培养基上的菌落数大于选择培养基上的菌落数（4）从自然界中筛选得到的产脂肪酶的微生物产酶能力普遍较差，可采用____育种技术改良，获得有应用价值的高产菌株。【答案】（1）油污土壤或水体中所含脂肪较多（2）①.以脂肪作为唯一碳源②.允许产脂肪酶的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长（3）①.平板划线法或稀释涂布平板法②.固体培养基③.大④.无菌落⑤.判断选择培养基是否起到了选择作用（4）诱变【解析】【分析】选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。【小问1详解】产脂肪酶的微生物工要从油污土壤或水体中寻找，这是依据生物与环境相适应的原理设计的，即需要在目的菌生活的环境中去寻找它，因为在富含油污的水源或土壤中分解脂肪的微生物含量多；【小问2详解】为确保能够分高得到产脂肪酶的微生物，常将土壤或水体稀释液先进行选择培养，其目的是为了增加分解油污的微生物的数量，该培养基的碳源要求应该为以脂肪（或油污）作为唯一碳源，在该培养基中允许产脂肪酶的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长；【小问3详解】分离、纯化培养时，可采用平板划线法或稀释涂布平板法接种，从而得到分布均匀的单菌落；从物理形态角度考虑，该培养基属于固体培养基，因为菌落是在固体培养基上表现出来的。培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，通常选择直径大的菌落进行纯化培养；为提高该步操作的可信度；设置了如下对照实验：为了判断选择培养基是否被污染，即配制的培养基是否合格，可用未接种的培养基置于相同的环境中培养，若未接种的培养基上无菌落出现，则说明实验结果可以用于下一步实验的依据；为了判断选择培养基的选择作用，需要将同样的菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基上，并置于相同的环境中进行培养，若牛肉膏蛋白胨，即对照组培养基上的菌落数多于选择培养基上的菌落数，则可证明选择培养基的选择作用；【小问4详解】从自然界中筛选得到的产脂肪酶的微生物产酶能力普遍较差，可采用诱变育种技术改良，获得生产高效降解脂肪的菌株，进而获得有应用价值的高产菌株。32.转基因三文鱼已经走上人类的餐桌。普通的大西洋三文鱼生长缓慢，需要3年左右才能长大上市。转基因三文鱼的生产过程中其中一项就是对普通三文鱼植入了生长激素基因，转入了这种基因后，三文鱼只要18个月就能长大，而且个头也比同类非转基因三文鱼要大；因而可以更快、更多地满足人们的消费需求。请回答下列问题：（1）用PCR技术扩增生长激素基因时，PCR扩增的一般步骤是______。（2）____是该工程的核心。为获得生长激素基因表达载体，需用______酶对该基因和载体进行切割。除此之外，该表达载体还必须含有______、标记基因等调控组件。（3）通过_____的方法将重组的表达载体导入三文鱼_____细胞中。最后用_____技术检测是否有生长激素的合成。【答案】（1）变性、复性、延伸（2）①.基因表达载体的构建②.同种限制酶或能产生相同末端的限制酶③.启动子、终止子、复制原点（3）①.显微注射②.受精卵③.抗原—抗体杂交【解析】【分析】1、PCR的主要步骤有：①DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板在高温下，氢键断裂，形成单链DNA；②复性（55℃-60℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链；③延伸（70℃-75℃）：在耐高温的DNA聚合酶的作用下，以dNTP为原料，合成与模板互补的DNA链。每一循环经过变性、复性和延伸，DNA含量即增加一倍。2、将目的基因与运载体结合的过程，首先要用一定的限制酶切割运载体，使运载体出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。将切下的目的基因的片段插入运载体的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。【小问1详解】PCR扩增的一般步骤是①DNA变性（90℃-95℃）、②复性（55℃-60℃）、③延伸（70℃-75℃），如此重复循环多次；【小问2详解】为了让目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；同时，使目的基因能够表达和发挥作用，这就需要构建基因表达载体，构建基因表达载体是基因工程的核心。为获得生长激素基因表达载体，需用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶对该基因和运载体进行切割，保证生长激素基因和运载体具有相同的黏性末端；该表达载体还必须含有启动子、终止子、标记基因等调控组件；【小问3详解】将目的基因导入动物细胞的方法是用显微注射法将目的基因注入受精卵细胞中，培育成动物个体，用抗原-抗体杂交法检测是否有特定蛋白质合成。33.新冠疫情出现后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。回答下列问题。（1）新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法。这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是______，再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。（2）为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的______来进行。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是______。（3）某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测（检测体内是否有新冠病毒抗体），若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明______（答出1种情况即可）；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明______。（4）常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是______。【答案】（1）逆转录酶##反转录酶（2）①.特异性核苷酸序列②.退火##复性（3）①.曾感染新冠病毒，已康复②.已感染新冠病毒，是患者（4）获取S蛋白基因→构建S蛋白基因与运载体的表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定（检测受体能否产生S蛋白）

【解析】【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。【小问1详解】分析题意可知，新冠病毒的遗传物质是RNA，而RT-PCR法需要先得到cDNA，由RNA到DNA的过程属于逆转录过程，逆转录过程需要的酶是逆转录酶（反转录酶）。【小问2详解】PCR过程需要加入引物，设计引物时应有一段已知目的基因的核苷酸序列，在该过程中为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的特异性核苷酸序列来进行；PCR过程每次循环分为3步，分别为变性（90-95℃）、复性（55-60℃）、延伸（70-75℃），故其中温度最低的一步是复性（或退火）。【小问3详解】某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测，若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明该个体曾经感染过新冠病毒，机体发生特异性免疫反应，产生抗体，将病毒消灭，则核酸检测为阴性，但由于抗体有一定的时效性，能在体内存在一段时间，故抗体检测为阳性；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明该个体体内仍含有病毒的核酸，机体仍进行特异性免疫过程，能产生抗体，则说明该人已经感染新冠病毒，为患者。【小问