红细胞膜缺陷性贫血及其实验诊断考点总结

红细胞膜缺陷性贫血及其实验诊断考点总结<大纲要点>一、红细胞膜的结构与功能（了解）二、红细胞膜缺陷的检验及其应用（掌握-熟练掌握）三、遗传性红细胞膜缺陷性贫血的实验诊断（掌握-熟练掌握）四、获得性红细胞膜缺陷性贫血的实验诊断（熟练掌握）一、红细胞膜的结构与功能1.红细胞膜的组成与结构红细胞膜（脂类、蛋白质、碳水化合物）的主要蛋白有主体蛋白和外周蛋白。后者包括收缩蛋白、肌动蛋白、锚蛋白和区带（4.1～4.5）等，即骨架系统，起支架作用，对维持红细胞的形状、稳定性和变形性有重要作用。膜的主要脂类为磷脂和胆固醇，起屏障和保持内环境稳定性作红细胞膜的组成与结构示意图2.红细胞膜的功能屏障作用和可变性；半透性；免疫性；受体特性：激素类受体、递质类受体、丙二、红细胞膜缺陷的检验及其应用1.红细胞渗透脆性试验（熟练掌握）2.自身溶血试验及其纠正试验（掌握）3.酸化甘油溶血试验（掌握）4.蔗糖溶血试验（掌握）5.酸化血清溶血试验（熟练掌握）6.红细胞膜蛋白电泳分析（掌握）1.红细胞渗透脆性试验原理：检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在低渗盐溶液中，当水渗透到红细胞内部达一定程度时，红细胞发生膨胀破裂。根据不同浓度的低渗盐溶液中红细胞溶血的情况，通过红细胞表面积与容积的比值，反映对低渗盐溶白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等。2.自身溶血试验及其纠正试验解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可导作为纠正物，观察溶血可否有一定的纠正，称为纠正试验。纠正；自身免疫性溶贫溶血度轻度增加，加葡萄糖3.酸化甘油溶血试验但甘油与膜脂质又有亲和性，可使膜脂质减少。当红细胞膜蛋白及膜脂质有缺陷时，它们在pH6.85甘油缓冲液中比正常红细胞溶解速度快，导致红细胞悬液的吸光度降至50%的时间（AGLT）明显缩短。临床意义：减少见于遗传性球形细胞增多症（25～150s）、肾功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶4.蔗糖溶血试验为PNH简易、重要的筛查试验。原理：是根据PNH患者的红细胞，在低离子强度的蔗糖溶液中对补体敏感性增强，经孵育，补体与红细胞膜结合加强，蔗糖溶液进入红细胞内，导致渗透性溶血而设计的。参考值：定性试验：正常为阴性；定量试验：正血病、骨髓硬化时可出现假阳性。5.酸化血清溶血试验称Hamtest，即红细胞在酸性（pH6.4～6.5）的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶6.红细胞膜蛋白电泳分析（1）原理：将制备的红细胞膜样品进行SDS电泳，离得到红细胞膜蛋白的电泳图谱，从而可见各膜蛋白组分百分率。参考值：各种膜蛋白组分百分率变化较大，多以正常红细胞膜蛋白电泳图谱作比较。或以带3蛋白为基准，各膜蛋白含量以与带3蛋白的比例表示。有收缩蛋白等含量减低或结构异常。某些血红蛋白病骨架蛋白等可明显异常。三、遗传性红细胞膜缺陷性贫血的实验诊断1.遗传性球形红细胞增多症（熟练掌握）2.遗传性椭圆形红细胞增多症（掌握）1.遗传性球形红细胞增多症心淡染区消失，简易红细胞滚动试验呈阳性。（2）骨髓象：骨髓红细胞系统增生活跃。不同患者外周血涂片可见球形红细胞球形红细胞形成机制遗传性球形红细胞增多症患者常表现为黄疸、脾大、胆石症SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析：红细胞骨架蛋白、收缩蛋白缺陷。2.遗传性椭圆形红细胞增多症骨髓象：骨髓红细胞系统增生活跃。特殊试验：脆性试验、孵育后和自身溶血试验阳性。遗传性椭圆形红细胞增多症患者外周血涂片可见椭圆形红细胞四、获得性红细胞膜缺陷性贫血的实验诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症是一种后天获得性红细胞膜缺陷引起的溶血病。临床上以间歇发作的睡眠后血红蛋白尿为特征。在一天不同时间点收集的PNH患者尿样，外观呈不同颜色。HSC的糖化磷脂酰肌醇（GPI）基因发生突变，影响GPI锚连接蛋白的稳定性（如调节细胞对补体敏感性的蛋白），其中最重要的是CD59（反应性溶血膜抑制因子，可阻止膜攻击复合物的组装）和CD55（衰变GPI锚连接蛋白示意图（1）血象：贫血为大细胞正色素性或低色素性，网织红细胞增高，少数病例减少。红细胞按对补体敏感性分为接近正常红细胞(Ⅰ型）、中等敏感(Ⅱ型）、高度敏感(Ⅲ型）。溶血程度取决于Ⅲ型红细胞多少。白细胞计数半数病例减少，中性粒细胞减少，淋巴细胞增多，血小板多数低（2）骨髓象：骨髓象随病情变化不一，除按有核细胞分四级外，注意粒红比例，增生低下者应注明部位，诊断疑难者需同时作病理活检。①酸化血清溶血试验（Hamtest）、蔗糖溶血试验、蛇毒溶血试验、尿潜血（尿含铁血黄素）试验等，②排除其他需鉴别的溶血性疾病；锚连蛋白（CD55或CD59）低表达的异常细胞群，支持PNH，是目前诊断PNH特异性和敏感性最高且可定量诊断溶血性贫血最根本直接的证据为A.总胆红素增高B.血清乳酸脱氢酶增高C.网织红细胞增高D.红细胞寿命缩短E.以上都不是『答案解析』诊断溶血性贫血最根本直接的证据是红细胞寿命缩短，其他选短引起的相应的症状。红细胞膜异常导致的贫血是A.丙酮酸激酶缺乏症B.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症C.阵发性睡眠性血红蛋白尿症D.珠蛋白生成障碍性贫血E.血红蛋白病『答案解析』阵发性睡眠性血红蛋白尿症是由于红细胞膜异常导致的贫血。关于尿含铁血黄素试验，下列叙述哪项不正确A.阴性结果可排除血管内溶血存在B.亦称Rous试验C.阳性对慢性血管内溶血的诊断价值最大D.用普鲁士蓝反应显示含铁血黄素E.阵发性睡眠性血红蛋白尿常为阳性『答案解析』尿含铁血黄素试验阴性结果不能排除血管内溶血存在，急性血管内溶血尿中检不出含铁（+Coombs试验：阴性，红细胞渗透脆性增加，最有可能的诊断是A.先天性非溶血性黄疸B.慢性肝病性贫血C.遗传性球形红细胞增多症D.珠蛋