生物选修一复习市公开课一等奖课件省赛课获奖课件

生物选修一——生物技术实践1/53课题1果酒和果醋制作课题2腐乳制作课题3制作泡菜并检测亚硝酸盐含量专题1传统发酵技术的应用2/53一、果酒制作1、酵母菌：4、流程：选果→冲洗→榨汁→发酵→酒精2、原理：5、检查：酸性条件酒精遇重铬酸钾呈灰绿色真菌、异养兼性厌氧型、繁殖最适温度20℃C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量酶C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量酶（1）前期需O2（2）后期不需O23、发酵条件：18℃～25℃3/53二、果醋制作1、醋酸菌：2、原理：

（1）氧气、糖源都

：醋酸菌将葡萄汁中

分解成

。（糖制醋）（2）氧气充足、糖源不足：醋酸菌将

→乙醛→

。（酒变醋）果酒制作果醋反应式为:

。充足糖醋酸乙醇醋酸C2H5OH+O2CH3COOH+H2O3、条件：

最适温度为30℃～35℃，需要充足氧气。4、流程：选果榨汁→酒精发酵→醋酸发酵原核、异养需氧型4/53思考讨论：（1）装置中充气口、排气口和出料口分别有哪些作用？（2）为何排气口要通过一种长而弯曲胶管与瓶身连接？（3）为何发酵瓶中只装入2/3液体？其目标是先让酵母菌有氧呼吸迅速繁殖，耗尽氧气后再进行酒精发酵；其次，避免发酵过程中产生CO2造成发酵液溢出。充气口：在醋酸发酵时连接充气泵进行充气排气口：排出发酵时产生CO2，以免发酵瓶爆裂。出料口：用来取样。排气管长而弯，可避免空气中微生物污染。5/531．（2023·广东理综，25）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌发酵装置中进行试验（见图），恰当做法是（双选）（）高考真题A．加入适量酵母菌B．始终打开阀b通气C．始终关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验AC6/53三、腐乳制作1、毛霉（主要）：让豆腐长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制2、原理：5、盐与酒作用：抑制微生物生长毛霉等产生蛋白酶、脂肪酶分解豆腐成小分子肽、氨基酸、甘油、脂肪酸。3、温度条件：15℃～18℃真菌、异养需氧型4、流程：7/53四、泡菜制作1、乳酸菌：3、流程：2、原理：原核、异养厌氧型C6H12O6→2C3H6O3+少许能量酶8/534、亚硝酸盐及其含量测定：（1）测定亚硝酸盐含量办法：比色法（2）测定亚硝酸盐含量原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N-1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红染料，通过目测比较，大体估算其含量。9/53专项2：微生物培养与应用10/53一、培养基：1、概念：2、成份

培养基（培养液）是人们按照微生物对营养物质不一样需求，配制出供其生长繁殖营养基质。水无机盐碳源(提供碳元素物质）氮源（提供氮元素物质注意：培养基还需要满足微生物对PH、特殊营养物质以及氧气需求。课题1:微生物的实验室培养11/533、类型液体培养基固体培养基选择培养基：在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要微生物生长,促进所需要微生物生长。鉴别培养基：在培养基中加入某种批示剂或化学药品,用以鉴别不一样种类微生物。例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、放线菌生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又如，在培养基中加入高浓度食盐能够抑制多种细菌生长，但不影响金黄色葡萄球菌生长。根据微生物代谢特点，在培养基中加入某种批示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不一样种类微生物。例如，在培养基中加入伊红和美蓝，能够用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌：假如有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。12/53使用措施成果常用措施举例消毒灭菌较为温和物理或化学办法强烈理化原因仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害微生物（不包括芽孢和孢子）杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法等灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌二、无菌技术泛指在培养微生物操作中，所有避免杂菌污染办法

13/53灭菌办法：back14/53三、微生物培养技术（一）试验操作步骤（以培养大肠杆菌为例）：1、制备培养基（1）计算（2）称量（3）溶化（注意取出称量纸）（4）灭菌:高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。（5）倒平板:待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯附近倒平板。2d后观测平板，无杂菌污染才可用来接种。15/53倒平板技术16/532、纯化大肠杆菌：平板划线法和稀释涂布平板法在培养基上将细菌逐渐稀释或分散成单个细胞，使其长成单个菌落，这个菌落就是一种纯化细菌菌落。*菌落是判定菌种主要根据。（1）原理：（2）常用接种办法：17/5318/53菌落19/532.稀释涂布平板操作办法20/5321/53四、菌种保存办法1、临时保藏：接种到试管固体斜面培养基，待长出菌落后放4℃冰箱保藏2、长期保存：甘油管藏22/53一、试验室中微生物筛选原理：人为提供有助于目标菌株生长条件（包括营养、温度、PH等），同步抑制或制止其他微生物生长。二、分离能够分解尿素细菌培养基：以尿素作为唯一氮源课题2:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数23/53三、统计菌落数目：2、间接计数法（活菌计数法）利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物数量。此法缺陷是不能辨别死菌和活菌。1、显微镜直接计数法当样品稀释度足够高时，培养基表面生长一种菌落，起源于样品稀释液中一种活菌，通过统计平板上菌落数，就能推测出样品中大约具有多少活菌。（1）常用办法：（2）原理：稀释涂布平板法24/53（3）操作：①设置反复组，增强试验说服力和精确性。②为了确保成果精确，一般选择菌落数在30－300平板进行计数。（4）计算公式：每克样品中菌株数＝（C÷V）×MC：某一稀释度下平板上生长平均菌落数V：涂布平板时所用稀释液体积（ml)M：稀释倍数25/53四、细菌分离与计数试验流程：土壤取样

样品稀释取样涂布微生物培养细菌计数观测并统计成果26/53一.纤维素与纤维素酶课题3:分解纤维素的微生物的分离1.纤维素纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成高分子化合物，是地球上含量最丰富多糖类物质。2.纤维素酶纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素纤维素酶（复合酶）27/53二.纤维素分解细菌筛选：1.办法：

刚果红染色法。2.原理：刚果红能够与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心透明圈，我们能够通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3.长处：该办法能够通过颜色反应直接筛选。28/53三.试验设计：土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌培养基上挑选产生透明圈菌落注意：分解纤维素微生物分离可用以纤维素为唯一碳源选择培养基。（应选择富含纤维素环境）29/532.（2023·广东理综，6）下列为某爱好小组取得试验成果及其分析，正确是B

30/53一、菊花组织培养1、原理：植物细胞全能性2、步骤：（1）制备MS固体培养基（灭菌）无机盐、维生素、蔗糖、激素

（2）外植体消毒（未开花新生侧枝）

（3）接种（4）培养（5）移栽（6）栽培专项3植物组织培养技术培养条件：PH5.8、温度18-22、每日光照12h31/533、过程：根、芽（胚状体）4、不一样植物激素使用次序和使用量使用次序试验成果先生长素，后细胞分裂素先细胞分裂素，后生长素同步使用生长素/细胞分裂素成果比值高时比值低时比值适中有助于分裂但不分化细胞既分裂也分化分化频率提升

有助于根分化，抑制芽形成有助于芽分化，抑制根形成

促进愈伤组织生长32/53二、月季花药培养1、花药选用：2、花粉发育检查：（1）醋酸洋红法（细胞核红色）（2）焙花青-铬矾法（细胞核蓝黑色）3、培养过程：花药中花粉胚状体愈伤组织从芽从芽生根移栽脱分化分化再分化诱导花药中花粉初花期、未开放花蕾、单核期

注意：两条途径之间没有绝正确界限，主要取决于培养基中激素种类及其浓度配比。33/53一、果胶酶在果汁生产中应用专项4：酶应用果胶酶可水解果胶，瓦解植物细胞壁和胞间层。34/53二、酶活性与影响酶活性原因酶活性是指酶催化一定化学反应能力。酶活性高低能够用在一定条件下，酶所催化某一化学反应反应速度来表达。酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物减少许或产物增加量来表达。影响酶活性原因：温度、PH和酶抑制剂等条件35/53二、加酶洗衣粉洗涤效果1、定义:加酶洗衣粉是指具有酶制剂洗衣粉。2、酶制剂：用特殊化学物质包裹酶，使之耐酸碱、耐高温、忍受表面活性剂3、酶制剂种类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶，其中效果最显著是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶4、作用：分解污渍（蛋白质、脂肪、淀粉、纤维素）36/53三、固定化酶1、原理：2、高果糖浆生产：（1）原理：（2）固定化酶：（3）生产过程：把酶固定在颗粒状载体上，易于催化回收、反复使用葡萄糖异构酶葡萄糖果糖酶固定在载体上、装入反应柱上端注入葡萄糖，柱内酶催化，下端生产果糖浆37/53固定化酶和固定化细胞是利用理化办法，把酶或细胞固定在一定空间内发挥作用技术。四、固定化细胞2、办法：（1）包埋法：包埋在多孔载体里（2）化学结合法：结合到载体上（3）物理吸附法：吸附到载体表面1、概念：注意：一般来说，酶更适合采取化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采取包埋法固定化。38/53

3、固定化酵母细胞（1）酵母细胞活化：1g干酵母+10ml水（2）配制CaCl2溶液：0.05mol/L（3）配海藻酸钠溶液：0.7g海藻酸钠+10ml水（4）海藻酸钠溶液与酵母细胞混合成A液（吸入注射器）（5）固定化酵母细胞：把A液滴入CaCl2形成凝胶珠（6）冲洗凝胶珠（蒸馏水）（7）酒精发酵：凝胶珠+葡萄糖液→酒精（25度）39/53专项5DNA和蛋白质技术40/53一、DNA粗提取与判定（一）试验原理

1.血细胞在蒸馏水中易吸水而造成细胞膜和核膜破裂。利用此特性可得到具有DNA溶液。2.DNA在不一样浓度氯化钠溶液中溶解度不一样，在0.14mol／L氯化钠溶液中溶解度最低。利用这一原理，可使溶解在氯化钠溶液中DNA析出。

3.DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质则能够溶于酒精。利用这一原理，能够深入提取出含杂质较少DNA。

4.DNA遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色，因此，二苯胺能够作为判定DNA试剂。

41/53（二）试验设计1、试验材料选用选用DNA含量相对较高组织（如鸡血细胞）2、破碎细胞，获取含DNA滤液动物细胞：加入一定量蒸馏水，同步用玻璃棒搅拌，过滤后搜集滤液植物细胞：需要先用洗涤剂溶解细胞膜42/533、除去滤液中杂质原理：方案一：（高中试验室较常用）DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样。过程：利用DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样，通过控制NaCl溶液浓度清除杂质。详细做法是：在滤液中加入NaCl

，使NaCl溶液浓度为2mol/L，过滤除去不溶杂质，再加入蒸馏水调整NaCl溶液浓度为0.14mol/L，析出DNA，过滤清除溶液中杂质，再用2mol/LNaCl溶液溶解DNA。方案二：直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10-15min，嫩肉粉中木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。方案三：将滤液放在60-75℃恒温水浴箱中保温10-15min，注意严格控制温度范围。43/534、DNA析出与判定与滤液体积相等冷却酒精溶液(体积分数95％)，静置2－3min，溶液中会出现白色丝状物

——粗提取DNA。1、DNA析出2.DNA判定试剂：条件：二苯胺（现配现用）沸水浴条件下，

DNA遇二苯胺被染成蓝色沸水浴现象：44/53①DNA模板；②分别与两条模板链相结合两种引物；③四种脱氧核苷酸；④耐高温DNA聚合酶；⑤控制温度，但不需解旋酶；⑥缓冲溶液二、PCR技术1、反应条件：45/53变性退火（复性）延伸3’5’3’5’3’3’3’3’3’3’3’3’5’5’5’5’5’5’5’5’2、过程：（1）变性：95℃DNA解旋为单链（2）复性：55℃引物与模板配对（3）延伸：72℃合成子链注意：DNA合成方向总是从子链5′端向3′端延伸。46/53三、血红蛋白提取和分离1、分离办法：（1）凝胶色谱法（分派色谱法）原理：

根据相对分子质量大小分离蛋白质有效办法。47/53不一样蛋白质通过多孔凝胶通道时：→大分子路程短、流动快→先收集→小分子路程长、流动慢→后收集48/53（2）电泳法

②原理：

利用了待分离样品中多种分子带电性质差异以及分子本身大小，形状不一样，使带电分子产生不一样迁移速度，从而实现样品中多种分子分离。①概念：带电粒子在电场作用下发生迁移过程。49/532、血红蛋白提取：分四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度判定样品处理和粗分离：

（1）红细胞洗涤：生理盐水--除杂蛋白

（2）血红蛋白释放：蒸馏水--40%甲苯（3）分离血红蛋白溶液：离心分层

第3层红色透明液体，是血红蛋白水溶液。

（4）透析：除去样品中相对分子质量较小杂质。纯化：一般采取凝胶色谱法对血红蛋白和其他杂