毒物分析第二章

毒物分析第二章第1页，课件共43页，创作于2023年2月第二章毒物分析的方法与特点第2页，课件共43页，创作于2023年2月毒物分析：是应用化学、物理、生物和现代仪器分析的原理和技术，对毒物可疑物质进行快速、准确鉴别与测定的一门学科。一、毒物分析的性质第3页，课件共43页，创作于2023年2月为了抢救及医疗服务为了环境保护和卫生监测查明中毒原因，澄清事故二、毒物分析的目的和任务第4页，课件共43页，创作于2023年2月三、对毒物分析人员素质的要求具有化学及仪器分析的精湛技术；具有药理和毒理的基础知识；具有临床医疗的常识第5页，课件共43页，创作于2023年2月1.样品纯度较低：检验样品:包含在食品、呕吐物、排泄物、尸体等之中非化学纯或药典标准的物质，含有影响测定结果的物质需要分离和净化四、毒物分析的特点第6页，课件共43页，创作于2023年2月2.要求迅速准确：毒物分析项目具有突然性：要求很快提供结果，且其结果务必准确无误。3.要求分析方法的灵敏度高：检品量少，被测物浓度低（10﹣6-10﹣12

g）采用微量或半微量分析方法：较高灵敏度及专属性第7页，课件共43页，创作于2023年2月五、试样采集1.认真勘查现场现场勘查（环境、症状、尸检、口供、调查资料…）对检测对象的组分、检验目标物、选择分析方法、及结论的可信性都有极其重要的意义。第8页，课件共43页，创作于2023年2月颜面樱红色：一氧化碳；颜面潮红：阿托平、河豚；颜面口唇青紫：亚硝酸盐、苯胺、硝基苯；口鼻泡沫溢出：有机磷杀虫剂、巴比妥、安妥等。特殊面容：第9页，课件共43页，创作于2023年2月蒜臭味：有机磷杀虫剂、黄磷、磷化锌；酶臭味：六六六；酒精味：乙醇、甲醇和其他醇类；来苏味：酚、甲酚；杏仁味：氰化物、硝基苯等。特殊气味：第10页，课件共43页，创作于2023年2月剧烈腹痛：强酸、强碱、砷、汞化合物等。剧烈呕吐与腹泻：砷、汞化合物、巴豆、桐油、蓖麻等。口渴：磷化锌、砷化合物等。流涎：有机磷杀虫剂、乌头以及砷化合物、汞化合物等。第11页，课件共43页，创作于2023年2月昏睡、呼吸减慢：安眠药、麻醉药、吗啡、一氧化碳、甲醇、乙醇等。痉挛：士的宁、氰化物、有机磷杀虫剂等。瞳孔缩小：吗啡、有机磷杀虫剂、巴比妥类等。瞳孔扩大：阿托平、颠茄、乌头、钩吻、大麻、奎宁。其他：血色鲜红：一氧化碳、氰化物；血呈酱油色：亚硝酸盐、苯胺、硝基苯；广泛性出血：敌鼠钠盐、肝素、蛇毒等。第12页，课件共43页，创作于2023年2月2.正确收集检体:检体应收集含毒物最多的部分。检体是否适当，影响检验成败。甚至发生判断错误。因此以收集多种检体为好。胃内容物、呕吐物量较大，可能尚未分解；血是分析CO的唯一检体；尿检验非挥发性毒物；肝、肾等是检测重金属中毒的较好检体。第13页，课件共43页，创作于2023年2月第14页，课件共43页，创作于2023年2月样品被检测物质的分离、富集选择合适检测方法检测六、毒物分析的一般方法第15页，课件共43页，创作于2023年2月除蛋白质萃取浓缩、富集（一）毒物的分离、富集采用适宜方法检测第16页，课件共43页，创作于2023年2月是测定血浆、血清、全血及组织匀浆等样品中物质的第一步目的：释放结合型被检测物质，利于提取，保护仪器，防止干扰1.除蛋白质加入沉淀剂和变性试剂

酶消化法

超滤法常见方法第17页，课件共43页，创作于2023年2月加入沉淀剂和变性试剂使pro脱水：硫酸铵、与水混合有机溶剂(乙醇、甲醇、乙腈)使pro成不溶性盐而沉淀：阴离子型沉淀剂（三氯醋酸、高氯酸、钨酸、焦磷酸）、阳离子型沉淀剂（含锌盐、铜盐）第18页，课件共43页，创作于2023年2月酶消化法

蛋白水解酶中的枯草菌溶素：酶解组织，使被检测物质析出。优点：温和条件下进行，可避免某些被检测物质在酸中水解及高温降解；可显著改善对蛋白结合率强的被检测物质的回收率；可用有机溶剂直接提取消化液而无乳化生成的危险；缺点：不适用于一些在高pH时易水解的被检测物质。第19页，课件共43页，创作于2023年2月超滤法被检测物质和代谢产物多为低分子化合物，与pro相比相差甚远，可用特殊微孔滤膜超滤不适合与pro结合力强的被检测物质影响被检测物质的回收率易堵塞第20页，课件共43页，创作于2023年2月2.萃取液－液萃取液－固萃取：加速液相萃取固相萃取固相微萃取第21页，课件共43页，创作于2023年2月溶液的pH调节提取溶剂的极性(1)、液－液萃取第22页，课件共43页，创作于2023年2月溶液的pH调节最佳pH选择主要与被检测物质的pKa值有关。pH＝pKa时，50%的被检测物质以非电离形式存在。碱性被检测物质最佳pH值要高于pKa值1-2个pH单位；反之，则低1-2个单位，可使90%被检测物质以非电离形式存在，易为溶剂提取。高解离被检测物质采用“离子对”技术进行提取和定量体内酸性物质较多，在碱性条件下不会被萃取出来，故在pH值偏高的情况下进行提取较好。第23页，课件共43页，创作于2023年2月提取溶剂的极性满足提取要求，极性尽可能小加入少量醇类(乙醇)可克服小极性溶剂(庚烷)提取能力弱的不足和减小被检测物质在容器表面的吸附损失利用不同极性的混合溶剂来提取被检测物质和净化脂肪酸类，如己烷—甲醇

第24页，课件共43页，创作于2023年2月定义：在较高温度(50-200℃)和压力(10.3-20.6Mpa或1000-3000psi)下用溶剂萃取固体或半固体样品。溶出速度增快数十倍。特点:有机溶剂用量少(10g样品仅需溶剂15ml)、快速(1次萃取全过程仅需15min).（2）加速液相萃取(AcceleratedSolventExtraction,ASE)第25页，课件共43页，创作于2023年2月第26页，课件共43页，创作于2023年2月（3）、固相萃取聚丙烯管滤板样品室填料(固相床)由液固萃取技术和柱相色谱技术结合发展而来无乳化现象溶剂多为水和甲醇，安全价廉萃取效率高速度快生物样品离心后方能萃取多为一次性产品，成本高优点缺点第27页，课件共43页，创作于2023年2月柱分两类：一种是阻留全部样品在柱上：亲水性装填物，可捕集全部样品。样品全部吸附在固相颗粒表面。采用一种与水不相混溶的有机溶剂如氯乙烷倾入柱中，洗提被检测物质。一种则仅阻留被检测物质及其相关物质，较有选择性。可装填疏水物(活性碳、聚苯乙烯或C18化学键合硅胶)或离子交换树脂。疏水柱：吸附亲脂性被检测物质，用有机溶剂洗提分离。离子交换柱：高极性、可电离的被检测物质。

第28页，课件共43页，创作于2023年2月柱预处理（活化）平衡萃取柱装载样品洗去干扰物回收分析物第29页，课件共43页，创作于2023年2月（4）固相微萃取(Solid-phaseMicro-extraction)定义：以柱分离方式进行操作，又称为固相提取柱法。在固相萃取基础上发展起来的，保留了其所有的优点，摒弃了其需要柱填充物和使用溶剂进行解吸的弊病。固相物质:

氧化铝、活性碳、硅藻土、离子交换树脂、凝胶或C18化学键合硅胶等。洗脱相：采用不同溶剂洗脱被检测物质。第30页，课件共43页，创作于2023年2月第31页，课件共43页，创作于2023年2月第32页，课件共43页，创作于2023年2月固相微萃取分为两步第一步是萃取，将针头插入试样容器中，推出石英纤维对试样中的分析组分进行萃取；第二步是在进样过程中将针头插入色谱进样器，推出石英纤维中完成解吸、色谱分析等步骤。固相微萃取的萃取方式有两种：石英纤维直接插入试样中进行萃取，适用于气体与液体中的分析组分顶空萃取：试样中挥发性、半挥发性分析组分。第33页，课件共43页，创作于2023年2月（1）KL-512氮吹仪氮气快速、连续、可控地吹到加热样品表面，实现样品快速浓缩。由底盘、中心杆、样品定位架、配气系统等构成。试管由定位架弹簧和托盘固定。气体通过可调流量计到达配气系统，经软管到各样品针阀管，吹向溶液表面原理：3.浓缩、富集第34页，课件共43页，创作于2023年2月性能：样品位数：12适用于试管、锥形瓶、离心管试管尺寸Ф10-29mm，样品容量1-50ml针阀控制各样品位氮气流速及开关氮气流量0-5L/min，压力小于200kPa第35页，课件共43页，创作于2023年2月MF-10A薄膜蒸发器NE-1001旋转薄膜蒸发器3.浓缩、富集-蒸发器第36页，课件共43页，创作于2023年2月毒品检验定性分析定量分析（二）毒物分析常用方法第37页，课件共43页，创作于2023年2月毒物分析常用方法化学法仪器分析法生物法物理法色谱法光谱法质谱法TLCHPLCGCCEUVIRAASFLu免疫分析法第38页，课件共43页，创作于2023年2月七、导致待测物损失的因素一）吸附玻璃表面或胶塞：吸附脂肪胺类及含硫化物血样中红血球和纤维蛋白元凝块的形成，常能引起待测物的共沉淀：措施：全血加入缓冲液后再行提取血球散开，被检测物质可从血球表面解吸：缓冲液的一定离子强度，可引起蛋白质变性，形成疏松絮状物-------减少被检测物质的物理性滞留和共沉淀的损失。第39页，课件共43页，创作于2023年2月二）化学降解三）络合

被测物质分解物光、热氧化水解微生物措施：采用温和条件制备样品，低温、避光。被测物质络合物或配合物重金属内源性分子第40页，课件共43页，创作于2023年2月四）蒸发被检测物质本身的挥发性（如苯丙胺）蒸发所得残渣未完全溶于所加的小体积溶剂中因减压浓缩引起溶液暴沸而导致损失在吹氮过程中被检测物质以气溶胶形式逸出第41页，课件共43页，创作于2023年2月复习题一、选择题：1.中毒者血呈酱油色中毒原因可能是：()